小鼠肾移植手术步骤

摘要

小鼠肾移植是一种技术上具有挑战性的手术，需要精细的术后护理和治疗才能成功。

摘要

小鼠肾脏原位移植是一种技术上具有挑战性的手术。尽管Russell等人在30多年前首次完成了小鼠肾移植(1)，随后Zhang等人对其进行了改进(2)，但目前全球掌握该技术的研究人员仍寥寥无几。在我们的实验室中，已成功实施了1200例原位肾移植手术，术后存活率超过>90%。手术成功的关键在于严格控制手术期间及移植后的再灌注损伤、出血和血栓形成，并在吻合过程中使用10-0缝线而非11-0缝线。

术后对受体动物的护理和治疗对于移植成功及评估至关重要。所有肾移植受体均在术后立即接受青霉素注射，并持续在饮水中添加磺胺甲噁唑-甲氧苄啶（sulfatrim）以提供抗生素支持。每日评估动物整体健康状况，并常规使用便携式I-STAT仪器进行全血肌酐分析，以评估移植物功能。

方案

供体器官获取（2）：

1. 使用65 mg/kg戊巴比妥钠腹腔注射麻醉供体；通过异氟烷（2-3%）维持麻醉状态。
2. 从胸骨至耻骨做正中切口进入供体腹腔，并将肠管向右侧牵拉以暴露左肾。
3. 使用8-0丝线结扎并切断肾上腺和睾丸血管，从而游离左肾。
4. 游离肾动脉和肾静脉汇合处上方的主动脉。
5. 游离肾动脉和肾静脉汇合处上方及下方的下腔静脉（IVC）。
6. 在肾动脉和肾静脉下方用8-0丝线结扎主动脉，以减少出血。
7. 从肾门开始游离左输尿管直至膀胱。
8. 通过向尾侧牵拉膀胱顶部，暴露输尿管膀胱连接部。
9. 切除包含左输尿管膀胱连接部的小块椭圆形膀胱组织，用于通过膀胱-膀胱吻合进行尿路重建。右侧输尿管不随膀胱一并切除。
10. 在肾动脉和肾静脉下方用8-0丝线结扎下腔静脉。
11. 在肾动脉和肾静脉上方结扎主动脉，并经肾下主动脉缓慢灌注0.2–0.4 ml冷的含肝素乳酸林格液，对移植物进行原位灌洗。
12. 在肾动脉和肾静脉上方用8-0丝线结扎下腔静脉。
13. 在下腔静脉汇合处横断肾静脉。
14. 在肾动脉下方约2 mm处斜行切断主动脉。
15. 将肾脏及其血管蒂连同附着于膀胱片的输尿管整块取出，置于冰上保存的乳酸林格液中。
16. 在麻醉状态下通过颈椎脱位处死供体小鼠。

讨论

我们已在小鼠中完成了约1200例肾移植手术，技术成功率达到>90%。与心脏移植相比，肾移植的成功率通常较低。然而，我们实验室一直保持较高的肾移植成功率（>90%）。成功的关键在于减少供体肾脏和受体的再灌注损伤，并在整个手术过程及术后最大限度地减少出血和血栓形成。以下因素可能最为重要：（a）通过细致轻柔的操作，尽可能减少受体在手术期间的出血；（b）在供体肾脏准备和受体移植过程中，尽量缩短热缺血时间和交叉阻断时间；（c）使用较小的供体膀胱瓣，以防止术后发生坏死、血供不足及膀胱漏液；（d）延迟切除受体原生肾脏，直至移植后4～7天，以使移植肾在术后有足够时间恢复功能；（e）在主动脉外进行吻合（供体主动脉袖与受体主动脉前壁之间，以及供体主动脉袖与受体主动脉后壁之间），以降低血栓形成的发生率；（f）术后至少24小时内保持受体小鼠体温恒定；（g）术后给予受体小鼠抗生素，以预防潜在感染。

在本方案中，我们使用10-0缝线代替11-0缝线，且不影响存活率。尽管11-0缝线是理想选择，并被许多移植实验室采用，但我们认为，只要上述因素得到良好控制，10-0缝线在肾移植中同样足够适用。

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材料

本文使用的材料清单

姓名	公司	目录编号	评论
i-STAT	其他	HESKA	Cat 5101
i-STAT 试剂盒	其他	HESKA	CAT 5110-CREA
复方磺胺甲噁唑	其他	Actavis	R02109
异氟烷	其他	NOVAPLUS	CA-0474
10-0 缝合线	手术	Sharpoint	AK0100