Method Article

小鼠肾移植程序

DOI:

10.3791/1150

July 10th, 2009

In This Article

Summary

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在小鼠肾移植在技术上是一个具有挑战性的过程,需要仔细的术后护理和治疗的成功。

Abstract

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在小鼠肾原位移植是一个技术上具有挑战性的过程。 Russell等人虽然进行了第一次肾脏移植在小鼠体内超过30年的前(1)张等年后(2)精制而成,在世界上少数几个人已经掌握了此过程。在我们的实验室中,我们已成功地执行1200> 90%的存活率原位肾移植。成功的关键点包括再灌注损伤,出血及血栓形成,无论是在程序和移植后,严格控制,并吻合,而不是使用的10-0 11-0缝合。

手术后的护理和治疗的收件人,移植成功和评估是非常重要的。所有肾移植受者接受抗生素注射青霉素立即移植后,在饮水中不断sulfatrim。每天和全血中肌酐常规分析评估移植肾功能与便携机的I - STAT的整体动物健康评估。

Protocol

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捐赠者的器官丰收(2):

  1. 麻醉使用65mg/kg戊巴比妥IP捐助;异氟醚(2-3%)维持麻醉。
  2. 一个从胸骨到耻骨正中切口进入捐助者的腹部,暴露左肾,大肠侧向移动到右侧。
  3. 用8-0丝线缝合肾上腺和睾丸血管结扎和分裂隔离的左肾。
  4. 调动的主动脉与肾动脉和静脉交界处以上。
  5. 动员与肾动脉和静脉交界处的上方和下方的下腔静脉(IVC)。
  6. 结扎肾动脉和静脉用8-0丝线缝合,以尽量减少出血以下的主动脉。
  7. 解剖肾门左侧输尿管膀胱。
  8. 公开输尿管交界处,对膀胱圆顶caudad回缩。
  9. 海关一个小,椭圆形的斑块含有左输尿管交界处,用于通过尿膀胱膀胱吻合重建膀胱。不包括右输尿管与膀胱。
  10. 下腔静脉结扎肾动脉和静脉用8-0丝线缝合以下。
  11. 结扎肾动脉和静脉,主动脉以上,慢慢地与0.2 -0.4毫升冷灌注原位移植,肝素林格乳酸钠溶液通过下腹主动脉。
  12. 下腔静脉结扎肾动脉和静脉用8-0丝线缝合以上。
  13. 断面肾静脉与下腔静脉交界处。
  14. 划分的主动脉斜刺,约比肾动脉2毫米。
  15. 取出肾脏和输尿管血管供应整块膀胱修补。在林格乳酸钠溶液冰的商店。
  16. 安乐死在麻醉状态下颈椎脱位的捐助鼠标。

收件人移植(2):

  1. 麻醉用65....

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Discussion

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我们已经执行了约1200例肾移植技术的成功率> 90%的小鼠。相比,心脏移植,肾移植的成功率通常比较低。然而,我们的实验室一直保持着较高的肾移植的成功率(> 90%)。成功的关键点,以减少再灌注损伤供肾和受助人,并最大限度地减少出血和血栓形成的整个过程中和手术后。 (三)下列因素可能是最重要的是:(a)减少收件人出血,在手术过程中尽可能通过细心和轻柔的操作可能;(b)尽量减少热缺血和阻断期间供肾的准备和受援国移植时间;用一个小的捐助膀胱修补,防止坏死,血液供应不足和膀胱漏手术后;(四)原生肾延迟肾切除术,直到4〜7天进行移植后允许肾移植手术后恢复功能(E )执行的主动脉减少血栓的发生率外吻合(之间的捐助国主动脉袖口和前壁和的捐助主动脉袖口和收件人的主动脉后壁之间);(F)保持至少受体小鼠的温暖手术后24小时;(G)手术后受体小鼠给予抗生素,以防止潜在的感染。

在这个协议中,我们用10-0 11-0缝合,而不是在不影响生存率。 11-0缝合虽然是理想的,并在许多移植实验室,我们感到,上述因素以及控制10-0缝合只要在肾移植中使用的是足够的。

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Disclosures

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动物实验是由美国俄亥俄州立大学IACUC规定的准则和法规的规定执行。

Acknowledgements

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这些研究支持部分资金,由美国国立卫生研究院R01 AI36532 GAH。我们想确认在移植病理蒂博尔Nadasdy博士提供出色的支持,由已故的查尔斯博士欧罗斯发起这项研究工作提供了宝贵的指导和远见。

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Materials

List of materials used in this article
NameCompanyCatalog NumberComments
i-STAT其他HESKACat 5101
i-STAT 墨盒其他HESKACAT 5110-CREA
Sulfatrim其他阿特维斯R02109
异氟醚其他NOVAPLUSCA-0474
10-0 缝合手术SharpointAK0100

References

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  1. Russell, P. S., Chase, C. M., Colvin, R. B., Plate, J. M. D. Kidney transplants in mice. An analysis of the immune status of mice bearing long-term, H-2 incompatible transplants. JExpMed. 147, 1449-1468 (1978).
  2. Zhang, Z., Schlachta, C., Duff, J., Stiller, C., Grant, D., Zhong, R.

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