方法文章

大鼠脑组织显微解剖用于特定脑区的RNA或蛋白质提取

DOI:

10.3791/269

2007年8月30日

本文内容

摘要

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将大鼠脑组织精细解剖为不同区域对于研究多种神经退行性疾病至关重要。本视频展示了在新鲜大鼠脑组织中对四个主要脑区——嗅球、额叶皮层、纹状体和海马体——进行显微解剖的操作过程。同时提供了快速分离各脑区的实用技巧,以避免组织中RNA和蛋白质的降解。

摘要

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$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
大鼠脑组织的微解剖分离成不同区域对于研究多种神经退行性疾病至关重要。本视频展示了在新鲜大鼠脑组织中对四个主要脑区——嗅球、额叶皮层、纹状体和海马体——进行微解剖分离的操作过程。同时提供了快速分离各脑区的实用技巧,以避免组织中RNA和蛋白质的降解。 关键词:微解剖,大鼠脑,嗅球,额叶皮层,纹状体,海马体,RNA降解,蛋白质降解

方案

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步骤 1

根据既定方案处死大鼠。取出颅腔内的脑组织,并用冰冻的经DEPC处理的Milli Q水冲洗,以去除表面血液。

步骤 2

置于冰冷的金属板上,将脑组织沿中线切成左右两个半球。

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图1.  大鼠半球内侧视图的切割位置
 

步骤 3

在第一次切割后立即采集嗅球。将样本在液氮中快速冷冻,并于 -80°C 保存。

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讨论

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不同的脑区与不同的神经退行性疾病相关。例如,额叶皮层和纹状体与帕金森病相关,而海马体则与阿尔茨海默病相关。对脑组织进行精确的显微解剖,可使我们更准确地检测病变区域中 mRNA 和蛋白质的变化。

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披露

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动物的处理遵循香港大学教学与科研用活体动物使用委员会(CULATR)批准的动物研究使用方案,以及美国国立卫生研究院关于动物使用的指南。

材料

本文使用的材料清单
姓名公司目录编号评论
显微镜Olympus Corporation
解剖工具金属板、镊子、刀片等。用铝箔单独包裹后,在180°C加热八小时以去除RNase,使用前置于冰上冷却。

参考文献

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  1. Palkovits, M. Maps and guide to micro-dissection of the rat brain. , Elsevier. New York. (c.1988).
  2. Swanson, L. W. Brain maps: structure of the rat brain. 3rd revised edition. , Elsevier Academic Press. (2004).
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标签

RNA

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