大鼠脑组织显微解剖用于特定脑区的RNA或蛋白质提取

摘要

将大鼠脑组织精细解剖为不同区域对于研究多种神经退行性疾病至关重要。本视频展示了在新鲜大鼠脑组织中对四个主要脑区——嗅球、额叶皮层、纹状体和海马体——进行显微解剖的操作过程。同时提供了快速分离各脑区的实用技巧，以避免组织中RNA和蛋白质的降解。

摘要

大鼠脑组织的微解剖分离成不同区域对于研究多种神经退行性疾病至关重要。本视频展示了在新鲜大鼠脑组织中对四个主要脑区——嗅球、额叶皮层、纹状体和海马体——进行微解剖分离的操作过程。同时提供了快速分离各脑区的实用技巧，以避免组织中RNA和蛋白质的降解。 关键词：微解剖，大鼠脑，嗅球，额叶皮层，纹状体，海马体，RNA降解，蛋白质降解

方案

步骤 1

根据既定方案处死大鼠。取出颅腔内的脑组织，并用冰冻的经DEPC处理的Milli Q水冲洗，以去除表面血液。

步骤 2

将脑置于冰冷的金属板上，沿中线将脑组织切成左右两半。

图1. 大鼠半球内侧视图的切割位置
 

步骤 3

在第一次切割后立即采集嗅球。将样本在液氮中速冻，并于 -80°C 保存。

图2. 嗅球解剖

步骤 4

使用刀片和Dumont 5号镊子在第二次切割后立即采集额叶皮层。将样本在液氮中快速冷冻，并于-80°C保存。

图3. 前额叶皮层解剖

步骤 5

在第三次切割后，使用两把Dumont No.5镊子立即采集纹状体（尾状核）。将样本在液氮中速冻，并于-80°C保存。

图4. 纹状体（尾状核）解剖

步骤 6

采集海马体时，将脑组织腹面朝上，移除中脑以暴露海马体。使用两把Dumont No.5镊子将海马体从皮层中分离。将样本在液氮中速冻，并于-80°C保存。

图5. 海马体解剖

讨论

不同的脑区与不同的神经退行性疾病相关。例如，额叶皮层和纹状体与帕金森病相关，而海马体则与阿尔茨海默病相关。对脑组织进行精确的显微解剖，可使我们更准确地检测病变区域中 mRNA 和蛋白质的变化。

材料

本文使用的材料清单

姓名	公司	目录编号	评论
显微镜	Olympus Corporation
解剖工具			金属板、镊子、刀片等。用铝箔单独包裹后，在180°C加热八小时以去除RNase，使用前置于冰上冷却。