在妇科手术前进行的体外成熟（IVM）（OP-IVM）将取卵后的体外成熟技术与常规妇科手术相结合，是传统IVM技术在生育力保存领域应用的延伸。
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OP-IVM：取卵后卵母细胞体外成熟与妇科手术的结合
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摘要
摘要
在妇科手术前采用体外成熟技术（IVM）（简称OP-IVM）是传统IVM技术的延伸，该技术将取卵后的体外成熟与常规妇科手术相结合。OP-IVM适用于因良性妇科疾病需接受手术治疗，同时又有生育力保存（FP）需求或需要进行体外受精-胚胎移植（IVF-ET）等不孕治疗的患者。在手术室中，接受良性妇科手术的患者首先接受麻醉，随后进行超声引导下的未成熟卵泡抽吸（IMFA）治疗。在继续进行后续妇科手术的同时，所获取的卵丘-卵母细胞复合体（COCs）被送至实验室进行评估，未成熟的COCs将被转移至体外成熟培养基中，在IVF实验室中培养28至32小时。培养结束后，对卵母细胞进行评估，选择处于MII期的成熟卵母细胞，将其冷冻保存于液氮中用于生育力保存，或通过卵胞浆内单精子显微注射（ICSI）进行受精，以用于IVF-ET。通过将IVM与妇科手术相结合，原本会被丢弃的未成熟卵母细胞得以被挽救并用于辅助生殖技术（ART）。本文将详细描述OP-IVM的操作步骤、临床意义及关键技术要点。
引言
体外成熟（IVM）是一种辅助生殖技术（ART），指将人类未成熟卵母细胞在体外培养至成熟，用于体外受精-胚胎移植（IVF-ET）或生育力保存（FP）。在IVM过程中，无需使用促排卵药物，从而减轻了疼痛、经济负担以及卵巢过度刺激综合征（OHSS）等并发症的风险1,2。此外，IVM特别适用于可能无法接受或没有时间进行促排卵治疗的癌症患者的生育力保存，以及激素敏感型不孕患者的治疗3。因此，尽管IVM所获得的卵母细胞数量、临床妊娠率（CPR）和活产率（LBR）低于常规IVF4,5，但IVM仍具有其独特的优势。
患有子宫内膜异位症、输卵管积水或卵巢囊肿的不孕患者通常在辅助生殖技术（ART）治疗前需接受妇科手术，而此类患者的卵母细胞通常未成熟。经皮超声引导下取卵行体外成熟（OP-IVM）技术通过经阴道超声引导获取未成熟卵母细胞，并在体外培养至成熟，用于体外受精-胚胎移植（IVF-ET）或生育力保存（FP）。OP-IVM 将取卵后的体外成熟（IVM）与妇科手术相结合，从而减少控制性卵巢超排卵周期中常见的并发症，并节省时间和费用。对于有生育能力的患者，在接受常规妇科手术的同时，OP-IVM 可作为一种 “....
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方案
注意：与体外成熟卵母细胞（OP-IVM）方法相关的研究已获得北京大学第三医院机构审查委员会（IRB）和北京大学伦理委员会（2014S2004）的批准。OP-IVM 的流程概要见图1。具体操作步骤将在下一部分中逐一介绍。
1. 向适宜患者介绍OP-IVM技术
- 确定可能从OP-IVM中获益的潜在患者，例如步骤1.1.1-1.1.3中所述患者：
- 对氯米芬耐药且需要接受腹腔镜卵巢打孔术的多囊卵巢综合征（PCOS）患者。
- 在辅助生殖技术（ART）治疗前需要接受良性妇科手术的不孕患者，例如宫腔镜下肌瘤切除术、息肉切除术、经宫颈子宫纵隔切除术、腹腔镜输卵管手术以及卵巢囊肿切除术。
- 正在接受化疗放疗或放疗的癌症或血液系统疾病患者。
2. 知情同意
- 向患者提供完整信息，包括卵巢组织体外成熟（OP-IVM）可能带来的益处、操作流程、IVM卵母细胞的用途（体外受精-胚胎移植或冷冻保存）、预计的临床妊娠率（CPR）和活产率（LBR），以及可能发生的并发症。要求患者签署知情同意书以表示同意。
3. 准备标签和IVM卵母细胞培养基
- 为培养皿和....
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结果
截至2019年12月，OP-IVM已用于274名患者的生育力保存。2014年至2016年间158名患者的胚胎学及生殖结局已在先前发表的论文中报道。8以下案例讨论了一名于2016年接受体外成熟卵母细胞（OP-IVM）治疗的多囊卵巢综合征（PCOS）患者的治疗过程。该患者为28岁女性，诊断为原发性不孕、左侧附件囊肿及多囊卵巢综合征。她于9月28日接受了腹腔镜下囊肿切除术及OP-IVM治疗th，2016年；共获得27个未成熟COCs。经过28小时培养后，选取7个处于MII期的卵母细胞进行ICSI受精。第1天具有两个原核（2PN）的优质受精卵数量为6个，第3天优质胚胎数为6个，第5天优质胚胎数为2个。第5天获得的囊胚（10月4日th，2016）被冷冻。2月14日th2017年，解冻一枚囊胚。该解冻后的囊胚存活，并于2月14日移植入子宫th，2017年。人绒毛膜促性腺激素（hCG）血液检测结果为阳性，超声检查显示宫内早期妊娠。该患者于11月2日孕4.......
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讨论
本文所述的OP-IVM方法可推广至常规的体外成熟（IVM）应用，将取卵后的卵母细胞体外成熟技术与常规妇科手术相结合。原本在妇科手术中可能丢失的卵母细胞，现在可用于体外受精-胚胎移植（IVF-ET）或生育力保存（FP），且无需增加额外的手术风险。OP-IVM最初用于多囊卵巢综合征（PCOS）患者在卵巢打孔术前获取卵母细胞，随后其应用迅速扩展至需要良性妇科手术的不孕症患者，以及需要接受放化疗的癌症或血液系统疾病患者。由于存在转移的潜在风险，OP-IVM不适用于或不推荐用于恶性肿瘤患者。基于OP-IVM技术，本机构已建立了一种新型的中国模式卵子库，用于不孕症患者和癌症患者的生育力保存。
对于卵巢内卵母细胞体外成熟（OP-IVM），应同时考虑妇科手术的紧急程度以及获取较多数目卵母细胞的潜力。通常，体外成熟（IVM）的结果与取卵过程中获得的未成熟卵母细胞数量呈正相关9。优势卵泡可能抑制周围较小卵泡的生长并导致其闭锁10，从而减少所获取的未成熟卵母细胞数量。因此，若妇科手术并非紧急，OP-IVM 的.......
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披露
作者无任何利益冲突需要披露。
致谢
本工作获得了中国国家重点研发计划&国家重点研发计划（编号：2017YFC1002000、2018YFC1004001、2019YFA0801400）、国家自然科学基金（编号：81571386、81730038）、中国医学科学院医学与健康科技创新工程（2019-I2M-5-001）以及北京市卫生系统特色临床应用研究专项（2018-2-4095）。
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材料
| 姓名 | 公司 | 目录编号 | 评论 |
|---|---|---|---|
| 19 G 单腔抽吸针 | 库克，澳大利亚 | K-OPS-7035-REH-ET | |
| 4孔板 | 康宁 | ||
| 70 μm 尼龙细胞滤网 | Falcon，美国 | 352350 | |
| 一氧化碳2 培养箱 | Thermo | ||
| 培养油 | Vitrolife，瑞典 | 10029，OVOIL | 步骤 3.2. |
| FSH &和 LH | 德国 Ferring 生殖健康 | MENOPUR® | |
| 巴斯德玻璃吸管 | Hilgenberg GmbH，德国 | 3154102-26 | |
| G-MOPS 培养基 | 穿刺前用于冲洗针头的pH稳定型操作液 | ||
| IVM 培养基 | 丹麦奥瑞高 | ART-1600-B | |
| 层流洁净工作台 | ESCO | ||
| 培养皿 | 赛默飞世尔科技，丹麦 | 263991 | |
| pH 稳定的操蛋与胚胎操作液，用于支持在培养箱外对卵母细胞和胚胎进行操作与处理 | Vitrolife，瑞典 | 10130，G-MOPS PLUS | 步骤 7.1. |
| 冲洗液 | 库克，澳大利亚 | K-SIFB-100 | |
| 体视显微镜 | 尼康 |
参考文献
- Ho, V. N. A., Braam, S. C., Pham, T. D., Mol, B. W., Vuong, L. N. The effectiveness and safety of in vitro maturation of oocytes versus in vitro fertilization in women with a high antral follicle count. Human Reproduction. 34 (6), 1055-1064 (2019).
- Yang, Z. Y., Chian, R. C.
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重印与许可
勘误
Formal Correction: Erratum: OP-IVM: Combining In vitro Maturation after Oocyte Retrieval with Gynecological Surgery
Posted by JoVE Editors on 6/26/2023. Citeable Link.
An erratum was issued for: OP-IVM: Combining In vitro Maturation after Oocyte Retrieval with Gynecological Surgery. The Protocol and Representative Results sections were updated.
Step 3.2 of the Protocol was updated from:
Add 0.5 mL of IVM medium supplemented with 0.075 IU/mL of follicle-stimulating hormone (FSH) and 0.075 IU/mL of luteinizing hormone (LH) to each well of a 4-well plate. Cover the medium with oil.
to:
Add 0.5 mL of IVM medium supplemented with 0.75 IU/mL of follicle-stimulating hormone (FSH) and 0.75 IU/mL of luteinizing hormone (LH) to each well of a 4-well plate. Cover the medium with oil.
The legend for Figure 2 was updated from:
Figure 2: Morphological characteristics of representative images of oocytes. (A) COCs, (B) MII, (C) MI, (D) GV stage. Abbreviations: COCs = cumulus-oocyte complexes; GV = germinal vesicle; MI = metaphase I; MII = metaphase II.
to:
Figure 2: Morphological characteristics of representative images of oocytes. (A) COCs, (B) GV, (C) MI, (D) MII stage. Abbreviations: COCs = cumulus-oocyte complexes; GV = germinal vesicle; MI = metaphase I; MII = metaphase II.
