高分辨率测量果蝇幼虫的嗅觉驱动行为

摘要

在本视频文章中，我们介绍了一种构建具有稳定且可控几何形状的气味梯度的新方法。我们简要说明了如何利用这些梯度来筛查嗅觉缺陷（完全性与部分性嗅觉丧失），并研究趋化行为中更为细微的特征。

摘要

在传统的果蝇幼虫嗅觉反应研究中，通常使用含有单一外围气味源的培养皿进行实验。在这种行为学范式中，研究者通常假设气味分子从源头快速扩散，可在培养皿内形成稳定的浓度梯度。为了在感觉输入与行为反应之间建立定量关联，有必要对气味刺激条件进行更全面的表征。在本视频文章中，我们介绍一种新方法，可构建具有稳定且可控几何形态的气味梯度。我们简要说明这些梯度可用于筛选嗅觉缺陷（完全与部分失嗅）以及研究趋化行为中更为细微的特征。 关键词：果蝇幼虫，嗅觉反应，气味梯度，趋化行为，失嗅，感觉输入，行为分析

方案

1. 仪器与试剂

气味稀释：

• 石蜡油（Sigma，CAS 编号：8012-95-1）
• 尽可能高纯度的、可引诱黑腹果蝇幼虫的气味物质¹。在本视频文章中，实验动物使用了异戊酸乙酯（Sigma，CAS 编号：123-92-2）进行测试。
• 1.5 ml 带聚四氟乙烯（Teflon）盖的玻璃小瓶（Agilent Technologies）
• 用于精确称重稀释的电子天平

检测环境设置：

• 琼脂糖（Promega）
• 96 孔微孔板盖（BD Falcon，目录号：353071）。我们的行为实验区域由三个堆叠的盖子组成。
• 单通道 1-20 μl 移液器或多通道移液器，用于将气味液滴加样至堆叠盖子的顶部盖子中。在建立多源实验时，我们使用 Rainin 公司的 5-50 μl Pipet-Lite 多通道移液器。

行为实验用果蝇幼虫的制备：

• 15% (w/w) 蔗糖溶液
• 普通培养皿（BD Falcon），用于清洗和存放幼虫
• 毛刷（4-5 mm 刷毛长度），用于操作和转移幼虫

记录幼虫运动....