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方法文章

婴猴手养方法

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DOI:

10.3791/65296

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2023年6月9日

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本文内容

摘要

本文介绍了一种在动物培养箱中人工饲养婴猴的方法。该方法显著提高了婴猴的存活率,为研究具有相似遗传背景但在不同产后环境中饲养的婴猴的发育过程提供了可能。

摘要

普通狨猴(Callithrix jacchus)是一种体型小且社会性极强的新世界猴,具有较高的繁殖率,已被证实是生物医学和神经科学研究中极具价值的非人灵长类动物模型。部分雌性狨猴会产下三胞胎;然而,亲猴无法成功抚育全部幼崽。为了挽救这些幼崽,我们开发了一种人工抚育方法用于饲养新生狨猴。本方案中,我们详细描述了饲料配方、喂养时间、温湿度设置,以及人工抚育幼崽向群体环境的适应过程。该人工抚育方法显著提高了狨猴幼崽的存活率(无人工抚育:45%;人工抚育:86%),并为研究具有相似遗传背景但在不同产后环境中成长的狨猴幼崽发育提供了机会。由于该方法实用且易于操作,我们预期其也可被其他从事普通狨猴研究的实验室所采用。

引言

普通狨猴(Callithrix jacchus)是一种小型树栖的新世界猴,原产于南美洲和中美洲。在过去几十年中,由于与其它非人灵长类动物(NHPs)相比,狨猴具有体型较小、易于在圈养条件下饲养和繁殖、妊娠期较短、性成熟较早以及人畜共患病风险较低等多项显著优势,其在生物医学研究中的应用迅速增长1,2,3,4,5,6。普通狨猴的大脑结构和功能与人类相似,具有丰富的发声行为和高度社会化的行为特征,并表现出复杂的情感活动。因此,它已成为多种神经科学研究中极具吸引力的非人灵长类动物模型,例如感觉信息处理7,8,9,10,11,12,....

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方案

所有实验程序均经浙江大学动物使用与护理委员会批准,并遵循美国国立卫生研究院(NIH)的指南。

1. 饲养与管理44

  1. 将猴群饲养室设置为12小时光照/12小时黑暗的昼夜循环,温度保持在26–28 °C,相对湿度维持在45%–55%。
  2. 将2–6岁的雄性和雌性狨猴配对饲养,安置于足够空间并具有良好通风条件的笼具(850 mm × 800 mm × 800 mm)中,并配备24小时持续通风系统。
  3. 在笼内提供休息板、秋千、栖木和吊床。
  4. 每日两次为配对的狨猴提供新鲜饮水及30–40 g饲料,饲料包括谷物、鸡蛋、甘薯、蜂蜜、水果、蔬菜和面包虫。
    ​注意:兽医和实验人员必须每天至少检查一次动物设施,确保及时发现病患个体并进行诊断与治疗。

2. 繁殖猴婴儿出生前的准备工作

  1. 妊娠绒猴的护理
    注意:通过触诊诊断受孕时间(通常在胚胎期开始后10-20天),并参考动物个体的繁殖史。
    1. 为繁殖配对提供更大的空间,并尽量减少人为干扰。
    2. 为繁殖配对额外提供如面包虫、鸡蛋、酸奶和干果等食物,以确保雌性营养充足。
    3. 细心照料并频繁检查妊娠绒....

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结果

体重是动物身体发育的关键指标,在本方案中用作评估狨猴健康状况的指标。在本研究中,人工饲养动物的体重随年龄增长而逐渐增加(图2A,n = 16),与先前研究中新生儿婴儿的体重增长趋势相似46。为了尽量减少对群体中繁殖家庭的干扰,我们未对群体中饲养的婴儿狨猴每日称重。我们仅在出生后1个月及之后获取亲代抚养动物的体重数据,并将其与同龄人工饲养婴儿的体重进行比较。亲代抚养组与人工饲养组的婴儿体重之间无显著差异(P30,人工饲养组:52.25 g ± 2.10 g,n = 18;群体组:57.34 g ± 2.77 g,n = 7;t = −1.3417,P = 0.1928;P60,人工饲养组:91.76 g ± 3.44 g,群体组:93.06 g ± 4.68 g;t= −0.2019,P = 0.8424;Student's t-test)(图2B)。

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讨论

普通狨猴是生物医学和神经科学研究中非常有用的非人灵长类动物模型。然而,狨猴资源过于有限,难以满足日益增长的研究需求。在本研究中,我们建立了一种人工哺育方法,该方法不仅提高了狨猴婴儿的存活率,还为研究其出生后发育提供了机会。这种人工哺育方法具有实用性且易于掌握,因此可方便地推广应用于其他从事普通狨猴研究的实验室。

一些先天性缺陷通常在出生后的前两周内出现。迄今为止,我们已发现多例新生狨猴存在眼睑、肺、肠道和脑部的先天缺陷,这些个体极少能存活至出生后第14天(P14)。因此,P1至P14是通过人工哺育方法筛选出健康新生狨猴的关键时期。此外,若婴儿期的狨猴因父母疏忽或乳汁不足而从母体脱落,它们也无法存活。因此,人工哺育方法有助于挽救其生命。在本研究中,未采用人工哺育时,存活率为45%(n = 13/29),而应用人工哺育方法后,存活率提高至86%(n = 25/29)。

有几点需要特别注意。护理人员在喂食时必须保持耐心;推进注射器过快是不可取的,因为这会妨碍婴猴吞咽,可能导致呛咳或肠梗阻,从而损害动物的呼吸系统或消化系统。喂食过程中.......

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披露

作者声明无利益冲突。

致谢

作者感谢李明轩对本文初稿的语法修改与润色。本工作得到中国浙江省自然科学基金(LD22H090003)、国家自然科学基金(32170991 和 32071097)、科技创新2030重大项目 2021ZD0204100(2021ZD0204101)和 2022ZD0205000(2022ZD0205003)以及教育部脑科学前沿科学中心的资助。 & 脑机融合,浙江大学

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材料

本文使用的材料清单
姓名公司目录编号评论
动物培养箱RCOM, 韩国MX - BL600N, 855 mm (W) x 470 mm (L) x 440 mm (H)
婴儿奶粉Meadjohnson, 美国适用于0-12月龄,执行标准 - GB25596
婴儿米糊HEINZ, 中国适用于0-6月龄,执行标准 - GB10769
婴儿湿巾babycare, 中国柔软
烧杯ShuNiu, 中国100 mL
毯子Grace, 中国10 cm × 10 cm, 柔软
攀爬架WowWee, 中国牢固且无细小环状结构
一次性吸水垫Hi Health Pet, 中国M或L号均可
一次性无菌注射器Cofoe, 中国1 mL, 2.5 mL, 3 mL, 5 mL, 10 mL
电子天平YouSheng, 中国量程0至6,000 g,精度0.2 g
静脉注射器HD, 中国0.55 mm x 20 mm 针头
电热水壶FGA, 中国保温电水壶 1,500 mL
乳果糖BELCOL, 中国用于缓解便秘
塑料称量皿SKSLAB, 中国80 mm x 80 mm x 22 mm,用作小碗
毛绒玩具Lebiyou, 中国柔软
益生菌粉剂G-Pet, 中国用于调节胃肠道环境
无菌离心管NEST, 中国50 mL
拭子OYEAH, 中国80 - 100 mm
玩具滚筒WowWee, 中国牢固且无细小环状结构

参考文献

  1. Miller, C. T., et al. Marmosets: A neuroscientific model of human social behavior. Neuron. 90 (2), 219-233 (2016).
  2. Ross, C. N., Colman, R., Power, M., Tardif, S. Marmoset metabolism, nutrition, and obesity. ILAR Journal. 61 (2-3), 179-187 (2020).
  3. Kishi, N., Sato, K.,....

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重印与许可

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