本文介绍了一种通过经腹入路采用针刺穿刺法建立兔腰椎间盘退变的手术方案。通过影像学检查和组织学分析验证了腰椎间盘退变模型的成功建立。
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本文内容
摘要
摘要
下背痛是全球人群中极为常见的医学问题。下背痛的主要诱因之一是椎间盘（IVD）退变。理想的椎间盘退变动物模型对于研究下背痛的病理生理机制以及探索潜在治疗策略至关重要。兔模型是一种可靠、经济且易于建立的动物模型。目前，经腹膜后入路已广泛用于在兔模型中诱导椎间盘退变。然而，该技术存在一些报道的并发症，例如节段性动脉撕脱和神经根损伤。本文旨在介绍一种通过经腹入路采用针刺穿刺建立兔腰椎椎间盘退变的手术方案。随后的影像学检查和组织学分析表明，兔腰椎椎间盘退变模型已成功建立。该手术方案能够精确定位目标椎间盘，椎间盘退变模型具有高度可重复性，并且并发症较少。
引言
下背痛（LBP）是全球致残的首要原因1。椎间盘（IVD）退变（IVDD）是导致下背痛的主要原因之一2,3,4。IVDD 是一种复杂且尚未完全阐明的多因素过程，可因不同的环境和生物学因素而加速5,6,7。IVDD 的病理变化特征包括椎间盘结构紊乱、髓核含水量减少以及周围细胞外基质的降解8,9。椎间盘退变动物模型对于与椎间盘相关研究具有重要意义9,10,11。
迄今为止，已建立了多种椎间盘退变（IVDD）动物模型，以模拟人类椎间盘退变的进展过程。大型动物模型，如牛、羊、山羊、犬和非人灵长类动物，在椎间盘大小以及退变椎间盘的细胞组成方面（例如羊和山羊缺乏脊索细胞）与....
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方案
实验方案经华北医疗健康集团邢台总医院动物护理与使用委员会批准（批准号：ZCKT-2021-0009）。本研究采用健康的骨骼成熟的雌性新西兰白兔（1岁，体重3-5 kg）。
1. 术前准备
- 在全身麻醉前，将兔子禁食并禁水 6-8 小时。
- 称量兔子的体重。
- 使用纱布蘸取 70% 乙醇擦拭兔子耳朵。
- 在耳朵上涂抹局部麻醉药膏。
- 压迫耳根部位，使耳缘静脉扩张。
- 通过耳缘静脉注射咪达唑仑（1-2 mg/kg）对兔子进行镇静20。
- 使用面罩给予吸入麻醉。设置氧气流速为 1 L/min，异氟烷浓度为 4%-5%，以诱导麻醉。
注意：判断麻醉深度时，将动物后肢拉直，并用拇指和食指用力夹捏足部。在撤退反射消失之前，不应进行手术操作21。 - 维持异氟烷浓度在 2.5%-3.5%（根据兔子体重调整）。
2. 术中操作
- 手术前对所有手术器械（血管钳/镊子、组织剪、缝合剪、手术刀柄、#22 手术刀片、双头手持拉钩、无菌纱布、3-0 可吸收缝线、4-0 不可吸收编织缝线、持针器....
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结果
经腹途径在我们之前的研究中已得到验证，可用于建立椎间盘退变兔模型22X射线和磁共振成像（MRI）在第4天进行th, 12th, 和 16th 术后数周。X线影像显示，针刺手术后16周内，L5-6和L6-7节段椎间盘（IVD）高度逐渐降低。图1A）。针刺组的DHI在第4天时下降th, 12th，和16th 术后数周与术前相比23 (p < 0.05, 图1B).
为评估椎间盘退变（IVDD）的分级，对腰椎进行了MRI扫描24。MRI图像显示，在针刺手术后16周内，L5-6和L6-7节段的信号强度逐渐降低（图2A）.......
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讨论
本方案中的关键步骤包括保护腹部器官、确定目标椎间盘以及针头的位置和方向。L5-6 椎间盘位于髂静脉分叉下方，L6-7 椎间盘则根据其与髂嵴平行的位置来识别。这两个解剖标志有助于精确地定位椎间盘，提高手术的准确性和可重复性——这也是经腹入路的主要优势之一。当针头穿刺目标椎间盘时，应确保针尖位于椎间盘中央，且针尖方向与上下终板平行，以避免损伤终板。
由于兔的腹部较为柔软，在确定腹部正中切口时容易发生偏移。有趣的是，我们发现通过两侧乳头连线的中点可以准确定位中线切口，从而提供一种更为标准化的解剖方法，并减少不必要的损伤。此外，使用花生纱布分离椎前软组织，能够更快且更清晰地暴露椎间盘（IVD）结构，同时减少出血。
经腹途径的局限性包括腹腔内静脉丛破裂风险增加，以及轻度肠管和腹壁粘连。本研究中针刺组共有4只兔子，其中1只死亡。死亡原因为腹腔内静脉丛破裂，导致术中及术后出血过多。根据我们的经验，如果术者对兔的手术操作及解剖结构不熟悉，手术时间将延长，并导致更多的术后并发症。此外，我们未采用气管插管或心电图监测，因为这些措施会显著延长手术时.......
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披露
作者声明不存在可能导致利益冲突的竞争性利益或关系。
致谢
本研究由河北省自然科学基金（编号：H2021108006）资助。
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材料
| 姓名 | 公司 | 目录编号 | 评论 |
|---|---|---|---|
| #22 手术刀片 | Huaiyin MEDICAL Instruments Co., Ltd. | AA6468 | 无 |
| 16 号针头，26 号针头 | Zhejiang Kangkang MEDICAL-DEVICES Co., Ltd. | 305111 | 无 |
| 3-0 可吸收缝线 | Huaiyin MEDICAL Instruments Co., Ltd. | V500431 | 无 |
| 4-0 不可吸收编织缝线 | Huaiyin MEDICAL Instruments Co., Ltd. | R413 | 无 |
| 5 mL 注射器，1 mL 注射器 | Zhejiang Kangkang MEDICAL-DEVICES Co., Ltd. | 301942 | 无 |
| 双头手持拉钩 | Huaiyin MEDICAL Instruments Co., Ltd. | 60002066 | 无 |
| 咪达唑仑 | 宜昌人福药业有限责任公司 | M-908CAS | 无 |
| 持针器 | Huaiyin MEDICAL Instruments Co., Ltd. | HC00505336 | 无 |
| 花生纱布 | 自制 | 无 | 手工制作的球形纱布 |
| 兔 | Tonghui ulture Limited Liability Company | SCXK2016--002 | 无 |
| 手术刀柄 | Huaiyin MEDICAL Instruments Co., Ltd. | AM5100678 | 无 |
| 塞子 | 自制 | 无 | 深度为 5 mm |
| 组织剪 | Huaiyin MEDICAL Instruments Co., Ltd. | HC00505422 | 无 |
| 麻醉蒸发器 | Apollo Management L.P. | BW-AM503 | 无 |
| 血管钳/镊子 | Huaiyin MEDICAL Instruments Co., Ltd. | AM5102194 | 无 |
参考文献
- Hartvigsen, J., et al. What low back pain is and why we need to pay attention. The Lancet. 391 (10137), 2356-2367 (2018).
- Simon, J., McAuliffe, M., Shamim, F., Vuong, N., Tahaei, A. Discogenic low back pain. Physical Medicine and Rehabilitation Clinics of North America.....
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