本方案介绍了一种用于在非血栓性、血栓性和血栓后深静脉中测试静脉成形术球囊（VB）干预的存活啮齿动物模型。
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本文内容
摘要
摘要
球囊血管成形术是一种常用的临床技术，用于治疗因创伤、先天性解剖异常、急性深静脉血栓形成（DVT）或支架植入所致的深静脉狭窄和闭塞。慢性深静脉阻塞在组织病理学上以血栓形成、纤维化或两者兼有为特征。目前尚无直接针对这些病理过程的治疗方法。因此，建立一种可靠的体内动物模型以测试新型干预手段十分必要。啮齿类动物存活状态下下腔静脉（IVC）球囊血管成形术模型（VBM）可用于在非血栓性和血栓后状态下，于多个时间点研究球囊血管成形术。通过组织、血栓和血液检测方法，如实时聚合酶链式反应（RT-PCR）、蛋白质印迹法（western blot）、酶联免疫吸附测定（ELISA）、酶谱分析、静脉壁和血栓细胞分析、全血和血浆检测以及组织学分析，可定量评估涂层与非涂层血管成形术球囊的局部和全身效应。该VBM模型具有良好的可重复性，能够模拟人类外科干预操作，可识别静脉壁-血栓蛋白的局部变化，并允许对同一样本进行多种分析，从而减少每组所需的实验动物数量。
引言
未溶解血栓导致的深静脉阻塞是深静脉血栓形成（DVT）的常见后果之一，也是造成血栓后综合征（PTS）的原因之一，每年在医疗上耗费数十亿美元，并显著影响患者生活质量1,2,3。PTS 是一种独特的炎性病理过程，最终导致静脉壁纤维化4，而现有的小型动物 DVT 模型尚不能完全模拟这一病理特征5,6,7，更重要的是，既往模型无法评估治疗干预措施的效果。血栓性静脉阻塞常通过支架置入和球囊静脉成形术进行治疗8,9；然而，由于再狭窄和闭塞的发生率较高，此类干预措施常受到限制10,11,12。
尽管已有用于治疗动脉特异性狭窄/闭塞的药物涂层球囊，但目前尚无针对深静脉的同类产品....
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方案
以下实验方案遵循密歇根大学（UMICH）机构动物护理与使用委员会（IACUC）的政策与指南、美国政府关于实验、研究和培训中使用脊椎动物的护理与利用原则以及ARRIVE指南2.0版。密歇根大学动物福利保证协议符合OLAW和美国农业部（USDA）要求，并获得国际实验动物评估和认可委员会（AAALAC International）完全认证。本方案已获批准，批准编号为PRO00010841。实验使用来自查尔斯河实验室（Charles River Laboratories）的雄性远交系Sprague Dawley大鼠，体重450 g，年龄15周。
1. 大鼠麻醉
- 将动物从笼中取出，放入麻醉前诱导气体室，以0.8至1 L/min（蒸发器控制）的流速，使用5%异氟烷和100%氧气诱导全身麻醉。
- 在麻醉诱导室中使大鼠镇静，随后将其从气体室中取出，称重，并用无菌眼膏润滑眼睛，然后将其仰卧置于循环温水加热装置上。通过足底反射（用力捏压脚趾）确认麻醉深度足够。
- 使用电动剪刀剃除腹部腹侧的毛发。通过鼻罩连接非重复呼吸回路，以0.8至1 L/min的流速、2.5%异氟烷和100%氧气维持全身麻醉。
2. 大鼠超声扫描
- 在成像过程中监测生理指标，包括呼吸频率、心率和体温。 ....
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结果
静脉球囊模型（VBM）是一种用于评估静脉成形球囊在完全止血控制中作用的模型。首先，我们测量了下腔静脉（IVC）中段肾下部分的直径，如图1所示，以确定合适的球囊尺寸。其次，图图2展示了所建立的逐步显微外科技术，同时我们在图3中展示了关键步骤的示例。请注意，下腔静脉插管时采用逆行入路，并使用了尖端加硬的导丝。
图2：在大鼠中测试血管成形术球囊的.......
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讨论
对于体重≥250 g的大鼠，可使用直径为2.5–3.5 mm范围内的球囊进行VBM操作。对于体重超过750 g的大鼠，该技术的限制因素主要是腹腔内脂肪组织较多和器官体积较大，而非下腔静脉（IVC）直径的变化。根据我们的经验，为了在静脉壁蛋白分析、活性检测及组织学分析中获得组间统计学显著性，每组需要10只或更多动物。在手术过程中，定期监测体温和呼吸频率对于确保操作成功至关重要，同时术后精心管理也十分关键。
VBM 是一种安全且可重复的方法（91次操作中有83次成功，存活率为91.2%），平均操作时间为30分钟。与操作相关的并发症包括麻醉并发症（1%，1/91）、阿片类药物不良反应（1%，1/91）、出血（2.1%，2/91）和血栓形成（4.3%，4/91）。在模型开发过程中，采用经下腔静脉（IVC）逆行插管技术，将插管点置于肾下腔静脉附近，从而增大导丝插入角度，减少腹腔器官干扰，显著降低了下腔静脉出血的发生率。此外，在导丝插入和充气阶段，建议配备一名手术助手，以确保施加的压力、充气时间以及锐利导丝的回撤操作准确无误。在放气后，必须正确回收静脉成形球囊，防止在插入点处撕裂下腔静脉壁。压.......
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披露
未声明任何利益冲突。
致谢
本研究由美国静脉论坛（AVF）2023年基础科学研究基金和Surmodics公司资助。
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材料
| 姓名 | 公司 | 目录编号 | 评论 |
|---|---|---|---|
| 3-0 DemeCRYL | DemeTech | G183019F4P | 每盒12个 |
| 5-0 DemeCRYL | DemeTech | G285017B0P | 每盒12个 |
| 7-0 DemeLENE | DemeTech | PM197011F13M | 每盒12个 |
| 8-0 DemeLON | DemeTech | NL868007C7P | 每盒12个 |
| 斜角夹施加器 | SCANLAN | 3795-01A | 7-1/4″ (18.5 cm) |
| Baxter 0.9% 氯化钠灌洗瓶 | 巴克斯特 | 货号：195-7124 | 1000 mL 瓶 |
| 博维电凝器低温精细尖头 | Symmetry Surgical Inc | AA00 | 10/bx |
| 布托啡诺 | Fidelis 动物健康 | SKU- 099114 | 1.3 mg/mL，3 mL |
| CD（Sprague Dawley）大鼠 | 查尔斯河实验室 | 菌株编号 001 | 雄性，400 克 |
| Clip-It 可追踪计时器 | 可追溯产品 | 货号 5046 | |
| 棉签 applicator 3" | Dukal Corporation | 922-00037BX100 | 1000/盒 |
| 酶解型外科器械清洁剂与预浸泡液 | Medline | MDS88000B9 | 1 单位 |
| 眼用润滑剂 | Optixcare | SKU-065441 | 20克 |
| Gaymar T/Pump Stryker 局部加温/降温治疗系统 | Stryker | TP700 | |
| 海费茨微型夹 12 mm × 2.25 mm | SCANLAN | 3795-20 | 直的 |
| Heifetz 微型夹 12 mm × 2.25 mm | SCANLAN | 3795-28 | 弯曲的 |
| Heifetz 微型夹 8 mm × 1.75 mm | SCANLAN | 3795-14 | 直的 |
| Heifetz 微型夹 8 mm × 1.75 mm | SCANLAN | 3795-18 | 弯曲的 |
| 充气装置 | Merit Medical | IN4130 | 带模拟显示屏的BasixCOMPAK |
| 异氟烷 | MFR VETONE | SKU-501017 | 100 mL，吸入用液体 |
| 显微外科手术器械包，包含镊子和持针钳 | 定制化 | ||
| 氧气，E型气罐 | Medline | MDM1630 | |
| 尖端导丝 | 定制化 | ||
| 无菌Glad保鲜膜 | 格拉德 | 货号 # PSS-140 | ETO暴露 |
| 无菌非织造纱布垫 2片装 4层 4英寸×4英寸 | Medline | SKU PRM21444H | 100Ct |
| 手术显微镜 | Zeiss | S100 / OPMI pico | |
| 外科洗手 &和手洗 | Vetoquinol | NDC：17030-003-16 | 16 盎司 |
| 超声耦合剂 | Medline | CTR001305 | 8.5 盎司，每箱 12 罐 |
| 超声系统 | 西门子 | ACUSON Antares | 三维、彩色、连续波（CW）、脉冲波（PW）、功率连续波/连续波频谱 |
| 球囊血管成形术 | 定制化 |
参考文献
- Prandoni, P., et al. The long-term clinical course of acute deep venous thrombosis. Ann Inter Med. 125 (1), 1-7 (1996).
- Prandoni, P., Kahn, S. R. Post-thrombotic syndrome: prevalence, prognostication and need for progress. Br J Haematol. 145
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