本研究表明，从石胡荽（Eupatorium lindleyanum DC.）中提取的倍半萜内酯（SLEL）在二甲苯诱导的小鼠耳肿胀和角叉菜胶诱导的大鼠足跖肿胀模型中均表现出显著的抗炎作用，其机制包括减轻组织病理学损伤、减少细胞因子释放以及抑制NF-κB信号通路的活化。
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研究文章
* These authors contributed equally
本研究表明，从石胡荽（Eupatorium lindleyanum DC.）中提取的倍半萜内酯（SLEL）在二甲苯诱导的小鼠耳肿胀和角叉菜胶诱导的大鼠足跖肿胀模型中均表现出显著的抗炎作用，其机制包括减轻组织病理学损伤、减少细胞因子释放以及抑制NF-κB信号通路的活化。
急性炎症是多种免疫相关疾病中的一种基本病理过程。Eupatorium lindleyanum DC. 是一种传统药用草本植物，富含倍半萜内酯（SLEL），已有研究报道其具有药理活性；然而，其抗炎作用及相关分子机制尚未完全阐明。本研究采用二甲苯诱导的小鼠耳肿胀模型和角叉菜胶诱导的大鼠足肿胀模型来诱导急性炎症反应。通过苏木精-伊红染色评估组织损伤和炎症细胞浸润情况。采用ELISA法检测血清中促炎细胞因子（TNF-α、IL-6和IL-1β）的水平，并通过定量PCR（qPCR）分析其在炎症组织中的转录表达。通过蛋白质印迹法（western blotting）检测NF-κB通路相关蛋白（包括磷酸化的IκBα和p65）的变化。SLEL处理可减轻耳部和足部肿胀，并改善急性炎症的组织病理学特征，包括组织水肿、炎症细胞浸润和血管充血。同时，SLEL给药与血清中TNF-α、IL-6和IL-1β水平降低以及炎症组织中Tnf-α、Il-6和Il-1β的mRNA表达下调相关。蛋白质印迹分析显示，SLEL处理后炎症组织中IκBα和p65的磷酸化水平降低，提示NF-κB相关信号事件受到调控。综上所述，本研究建立了一种用于评估SLEL在急性炎症模型中抗炎活性的实验流程，并表明其作用机制与促炎细胞因子表达减少及NF-κB通路相关信号改变有关。
炎症是由病原体入侵或组织损伤引发的一种复杂防御反应，在限制感染、清除有害刺激以及促进组织修复中发挥关键作用1。虽然受控的炎症反应对维持组织稳态至关重要，但过度或持续的炎症可导致组织损伤、器官功能障碍以及慢性疾病的进展。临床上，炎症表现为红、肿、热、痛，严重时可引发全身性病理反应。越来越多的证据表明，炎症调控失常与癌症、心血管疾病及自身免疫性疾病的发生发展密切相关2˒3。
目前，非甾体抗炎药（NSAIDs）是用于控制炎症最广泛使用的药物。尽管NSAIDs在缓解症状方面具有疗效，但长期使用常伴随不良反应，包括胃肠道刺激、超敏反应和肝毒性4，这限制了其临床应用。因此，人们越来越关注寻找具有更好安全性的替代性抗炎剂。天然产物，包括传统草药，已被探索作为具有免疫调节特性的生物活性化合物的潜在来源。然而，对于有关低毒性或系统性调节功能的泛化性说法应谨慎对待，并需在明确的疾病模型中通过实验加以验证5。
Eupatorium lindleyanum DC. 是一种传统药用植物，其特征性植物化学成分包括倍半萜内酯，主要为吉马烷型（guaianolide）和桉烷型（eudesmanoli....
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动物研究方案已获得重庆医科大学机构动物护理和使用委员会（IACUC-CQMU-2025-10073）的批准。
倍半萜内酯富集组分（SLEL）的制备
Eupatorium lindleyanum DC. 的干燥药材经粉碎后，用70%（v/v）乙醇在减压条件下回流提取两次，每次提取溶剂与药材的体积质量比为10:1（v/w），提取时间为2小时。合并提取液，过滤后在≤60 °C条件下减压浓缩，再经真空冷冻干燥，得到粗乙醇提取物粉末。
将干燥的提取物完全溶解于蒸馏水中（终浓度：100 mg/mL），依次经过聚酰胺树脂柱层析和D101大孔吸附树脂柱层析，以富集倍半萜内酯成分。待吸附平衡后，用蒸馏水洗涤D101树脂以去除极性杂质，随后用无水乙醇进行洗脱。乙醇洗脱后，收集的馏分在减压条件下浓缩，并经冷冻干燥得到SLEL组分，储存于−20 ℃备用。
采用超高效液相色谱平台进行分离，流动相系统为乙腈和含0.1%（v/v）甲酸的水溶液组成的二元体系。梯度程序包括：初始25分钟低有机相比例的等度洗脱，随后短暂线性梯度升至70%乙腈，接着在90%乙腈的高有机相条件下进行洗脱，最后重新平衡至初始条件。系统流速为0.25 mL·min⁻1，柱温为35 °C，进样体积为....
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通过UPLC-Q/TOF/MSn分析SLEL中的化学成分
采用UPLC-Q/TOF-MSn在正离子和负离子模式下分析了SLEL的化学成分。共鉴定出9种倍半萜内酯为主要成分（补充图S1）。分子式通过观察到的加合离子确定，正离子模式包括[M+H]⁺和[M+Na]⁺，负离子模式包括[M−H]⁻和[M+HCOO]⁻（补充表S1）。
SLEL在二甲苯诱导的耳肿胀试验中的作用
在模型组小鼠中，于诱导后30分钟按方案局部应用二甲苯后，耳片重量较对照组显著增加（补充图S2）。连续7天每日口服给予SLEL可剂量依赖性地降低耳片重量，其中SLEL-H组的减轻效果最为明显（补充图S2）。
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本研究采用两种经典的急性炎症模型——小鼠耳廓二甲苯致炎水肿模型和大鼠足跖角叉菜胶致炎水肿模型，对菊科泽兰属植物Eupatorium lindleyanum DC.（SLEL）中的倍半萜内酯成分进行了评价。通过整合组织病理学评分、血清细胞因子检测、组织水平mRNA定量以及蛋白信号通路分析，该实验方案在一个完整的实验流程中实现了对局部和全身性炎症反应的多层次表征。
在预定的终点时间（二甲苯给药后30分钟及角叉菜胶给药后4小时），组织学评估显示，与模型对照组相比，SLEL处理组动物的水肿、炎性细胞浸润及组织结构破坏均有所减轻。半定量评分进一步支持了这些结果，使得观察结果的可重复性超越了单纯的定性判断。一致地，血清中促炎细胞因子水平以及组织中细胞因子mRNA表达均下降，同时IκBα和p65的磷酸化水平降低，提供了在这些急性诱导条件下炎症相关信号通路状态的分子层面证据。综上，这些多层次的检测结果支持本方案适用于关联急性炎症的宏观、组织学及分子指标。
需要注意的是，二甲苯和角叉菜胶模型表现出不同的炎症动力学特征和NF-κ.......
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作者声明不存在利益冲突。
本研究由重庆市自然科学基金项目（编号：cstc2021jcyj-msxmX0365）、重庆市教育委员会科学技术研究项目（编号：KJZD-K202215101，编号：KJZD-M202515104）、重庆市璧山区科学技术局与重庆中医药学院技术创新联合研究基金（编号：BSZYYLH010）、中国博士后科学基金（编号：2025M783952）以及四川省科学技术厅川渝协同创新项目（编号：2024YFHZ0083）资助。
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| 姓名 | 公司 | 目录编号 | 评论 |
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| 抗p-IκBα | Cell Signaling Technology | 2859 | |
| 抗p-P65 | Abmart | TP70621 | |
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| IL-1β检测试剂盒 | 厦门慧嘉生物科技有限公司 | EHJ-20537r | |
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| 酶标仪 | 基因有限公司 | Odyssey Fc | |
| PVDF膜 | Millipore | IPVH00010 | |
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| RIPA裂解液 | 碧云天生物技术有限公司 | P0013B | |
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| TNF-α检测试剂盒 | 厦门慧嘉生物科技有限公司 | EHJ-20039r | |
| TRIzol | Thermo Fisher Scientific | 15596018CN | |
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