Name: 血红素加氧酶1表达上调在刮痧过程中的生物发光成像 (视频) | JoVE Journal
Uploaded: 2009-08-28T09:00:00.000+00:00
Duration: 6 min 39 s
Description: 了解利用生物发光成像技术在小鼠模型中实时监测刮痧诱导的血红素加氧酶1表达上调的方法。该技术揭示了传统中医疗法的系统性生理效应及其潜在治疗机制。

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K. Wong、S.T.C. Wong 得到布里格姆妇女医院功能与分子影像中心的资金支持 
K. Wong、S.T.C. Wong 得到卫理公会医院研究所生物技术与信息学中心、威尔康奈尔医学院的资金支持 
K.K. Kwong、I. Chen、J-Q Ren 得到麻省总医院阿西诺拉·A·马蒂诺斯生物医学影像中心的资金支持 
Lenuta Kloetzer、Braden Kuo 得到麻省总医院神经胃肠研究中心的资金支持 
作者感谢布里格姆妇女医院光学成像实验室的 Q. Zeng 博士和 X. Xu 博士提供的技术帮助。

<ol>
 <li>雌性 HO-1-luciferase 可从 Taconic Farms, Inc. 购买 4–6 周龄的转基因小鼠。到达后, 小鼠被安置在动物饲养设施中至少4天以适应环境。 </li>
 <li>生物发光成像的准备工作： 
 <ol style="list-style-type:lower-alpha;">
 <li>称量每只HO-1小鼠。动物体重用于计算荧光素的给药剂量。 </li>
 <li>脱毛： 使用棉签将脱毛剂Nair®涂抹于动物的腹部和/或背部，等待5至10秒。用干净的棉签擦去毛发。取一片组织纸浸入蒸馏水中，擦拭残留的毛发直至清洁。</li>
 <li>在IVIS 100成像系统的成像平台上放置一张非荧光黑色纸（Strathmore Artagain® 黑色纸），以降低背景噪声。 </li>
 <li>准备荧光素（来自 Xenogen Corporation）溶液，浓度为 7.5 mg/ml（溶于无菌 H2O）。荧光素的剂量为每公斤体重65.5 mg。因此，一只20克重的小鼠需腹腔注射0.175 ml荧光素溶液。为实现该操作，将单次注射量的荧光素溶液（0.175 ml）预先装入带有26号针头的注射器中 </li>
 </ol></li>
 <li>刮痧操作步骤： 刮痧仅在进行生物发光成像实验前实施一次。由于刮痧不会引起疼痛，小鼠仅需通过异氟烷短暂麻醉以保持安静。刮痧操作包括以下步骤：
 <ol style="list-style-type:lower-alpha;">
 <li>在刮痧过程中，数次于刮痧部位涂抹食用油或蒸馏水以润滑皮肤。 </li>
 <li>使用陶瓷汤匙或塑料汤匙，以轻柔但有力的方式反复刮擦小鼠背部无毛区域。</li>
 <li>刮拭持续至背部皮肤发红，这是皮下出血的征象，通常在2到3分钟内达到。 </li>
 </ol></li>
 <li>生物发光成像 可在刮痧后立即开始，或在刮痧后数小时开始，因为HO-1的上调在数小时内逐渐增强。生物发光成像的操作步骤如下：
 <ol style="list-style-type:lower-alpha;">
 <li>在充满异氟烷（1.5%）与医用级空气混合气体的麻醉诱导舱中对小鼠进行麻醉。</li>
	<li>小鼠麻醉后，将其转移至IVIS 100光学成像系统的成像室中，置于仰卧位（腹部朝上）。成像室持续通入1.5%异氟烷，成像平台加热至 37°C 保持小鼠体温。</li>
	<li>将成像采集设置为“中等 binning”模式，曝光时间设为 30 秒。开始采集图像，并设置仪器每三分钟重复一次成像采集，可手动或自动进行。在首张图像采集完成后，绘制一个感兴趣区域（ROI），覆盖腹部、胸部和头部区域。随后使用 IVIS 100 系统配套的“Living Image®”软件，将该 ROI 复制并粘贴至后续各图像中。</li>
	<li>信号强度以每秒光子数进行测量。标记信号强度达到峰值的时间，并在达到峰值后继续对小鼠成像约5至10分钟。</li>
	<li>当完成仰卧位的成像采集后，将小鼠翻转，使其呈俯卧位（背部朝上）。继续使用“Living Image®”软件对动物进行5至10分钟的成像，此时感兴趣区域（ROI）应绘制为覆盖背部和头部区域。俯卧位成像在仰卧位之后进行的选择是任意的；可根据主要关注的器官决定是否以俯卧位作为起始成像体位。另一种可选方案是在不同的实验中分别进行仰卧位和俯卧位的成像。</li>
	<li>当俯卧位成像采集结束后，关闭异氟烷，将小鼠从成像室转移至诱导室以恢复。此时诱导室仅通入医用空气，小鼠通常在不到一分钟内苏醒。</li>
	<li>保存成像数据以供后期处理。</li>
	<li>初次成像研究后，将在刮痧后的数天内进行额外的影像采集。一个示例时间表是在第12天重复成像th 小时，24th 小时，36th 小时，48th 小时，72nd 小时和120th 1 小时，但成像时间表的具体时间安排可灵活调整。如果需要更长时间的随访，可增加额外的成像环节。成像前，若毛发已重新生长，需重复脱毛操作。</li>
 </ol>
 </li>
 <li>对照组重复所有步骤，但跳过刮痧（步骤3）。若同一组小鼠同时用于对照和刮痧实验，对照实验应优先在刮痧操作前进行，或至少在刮痧后一个月进行。</li>
</ol>
代表性结果：
图1中的生物发光图像显示 体内 刮痧刺激后HO-1的上调。图2中的图表显示了同一小鼠在刮痧后120小时内全身光学通量（光子/秒）随时间变化的定量结果。
<img src="/files/ftp_upload/1385/figure1tmb.jpg" alt="生物发光成像，实验结果，小鼠模型，荧光定量，颜色标尺。" border="0" data-altupdatedat="1787630408000" data-alt="图1"> 图1. 从左到右分别为同一小鼠在刮痧前、刮痧后18小时、36小时和120小时的前位（仰卧）代表性图像。刮痧后，可观察到多个器官区域信号强度显著增强，包括胃肠道、生殖道、肝脏、肾脏（背面视图，未显示）及其他部位。请<a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/1385/figure1.jpg">点击此处</a>查看图1的放大版本。
<img src="/files/ftp_upload/1385/figure2tmb.jpg" alt="光子发射速率随时间变化的图表；光子学研究的数据分析；标记的时间点。" border="0" data-altupdatedat="1787630408000" data-alt="图 2"> 图 2. 对图 1 中同一只小鼠进行刮痧后120小时内全身光子通量（光子/秒）的定量变化。请<a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/1385/figure2.jpg">点击此处</a>查看图 2 的放大版本。

<ol><li>Zhang, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Selection+of+potential+therapeutics+based+on+in+vivo+spatiotemporal+transcription+patterns+of+heme+oxygenase-1%5BTitle%5D)+AND+%22J+Mol+Med%22%5BJournal%5D)">Selection of potential therapeutics based on in vivo spatiotemporal transcription patterns of heme oxygenase-1.</a> J Mol Med. 80, 655-6564 (2002).</li>
<li>Zhang, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Rapid+in+vivo+functional+analysis+of+transgenes+in+mice+using+whole+body+imaging+of+luciferase+expression%5BTitle%5D)+AND+%22Transgenic+Res%22%5BJournal%5D)">Rapid in vivo functional analysis of transgenes in mice using whole body imaging of luciferase expression.</a> Transgenic Res. 10, 423-434 (2001).</li>
<li>Contag, C. H., Stevenson, D. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((In+vivo+patterns+of+heme+oxygenase-1+transcription%5BTitle%5D)+AND+%22J+Perinatol%22%5BJournal%5D)">In vivo patterns of heme oxygenase-1 transcription.</a> J Perinatol. 21, Suppl 1. 119-1124 (2001).</li>
<li>Nielsen, A., Knoblauch, N. T., Dobos, G. J., Michalsen, A., Kaptchuk, T. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+effect+of+Gua+Sha+treatment+on+the+microcirculation+of+surface+tissue%3A+a+pilot+study+in+healthy+subjects%5BTitle%5D)+AND+%22Explore+%28NY%29%22%5BJournal%5D)">The effect of Gua Sha treatment on the microcirculation of surface tissue: a pilot study in healthy subjects.</a> Explore (NY). 3, 456-466 (2007).</li>
<li>Schwickert, M. E., Saha, F. J., Braun, M., Dobos, G. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Gua+Sha+for+migraine+in+inpatient+withdrawal+therapy+of+headache+due+to+medication+overuse%5BTitle%5D)+AND+%22Forsch+Komplementmed%22%5BJournal%5D)">Gua Sha for migraine in inpatient withdrawal therapy of headache due to medication overuse.</a> Forsch Komplementmed. 14, 297-300 (2007).</li>
<li>Tsai, P. S., Lee, P. H., Wang, M. Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Demographics%2C+training%2C+and+practice+patterns+of+practitioners+of+folk+medicine+in+Taiwan%3A+a+survey+of+the+Taipei+metropolitan+area%5BTitle%5D)+AND+%22J+Altern+Complement+Med%22%5BJournal%5D)">Demographics, training, and practice patterns of practitioners of folk medicine in Taiwan: a survey of the Taipei metropolitan area.</a> J Altern Complement Med. 14, 1243-1248 (2008).</li>
<li>Nielsen, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Gua+sha+research+and+the+language+of+integrative+medicine%5BTitle%5D)+AND+%22J+Bodyw+Mov+Ther%22%5BJournal%5D)">Gua sha research and the language of integrative medicine.</a> J Bodyw Mov Ther. 13, 63-72 (2009).</li>
<li>Contag, C. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Visualizing+gene+expression+in+living+mammals+using+a+bioluminescent+reporter%5BTitle%5D)+AND+%22Photochem+Photobiol%22%5BJournal%5D)">Visualizing gene expression in living mammals using a bioluminescent reporter.</a> Photochem Photobiol. 66, 523-531 (1997).</li>
<li>Cui, K., Xu, X., Zhao, H., Wong, S. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+quantitative+study+of+factors+affecting+in+vivo+bioluminescence+imaging%5BTitle%5D)+AND+%22Luminescence%22%5BJournal%5D)">A quantitative study of factors affecting in vivo bioluminescence imaging.</a> Luminescence. 23, 292-295 (2008).</li>
<li>Shibahara, S., Yoshida, T., Kikuchi, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mechanism+of+increase+of+heme+oxygenase+activity+induced+by+hemin+in+cultured+pig+alveolar+macrophages%5BTitle%5D)+AND+%22Arch+Biochem+Biophys%22%5BJournal%5D)">Mechanism of increase of heme oxygenase activity induced by hemin in cultured pig alveolar macrophages.</a> Arch Biochem Biophys. 197, 607-617 (1979).</li>
<li>Lee, P. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hypoxia-inducible+factor-1+mediates+transcriptional+activation+of+the+heme+oxygenase-1+gene+in+response+to+hypoxia%5BTitle%5D)+AND+%22J+Biol+Chem%22%5BJournal%5D)">Hypoxia-inducible factor-1 mediates transcriptional activation of the heme oxygenase-1 gene in response to hypoxia.</a> J Biol Chem. 272, 5375-5381 (1997).</li>
<li>Maines, M. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+heme+oxygenase+system%3A+a+regulator+of+second+messenger+gases%5BTitle%5D)+AND+%22Annu+Rev+Pharmacol+Toxicol%22%5BJournal%5D)">The heme oxygenase system: a regulator of second messenger gases.</a> Annu Rev Pharmacol Toxicol. 37, 517-554 (1997).</li>
<li>Wunder, C., Potter, R. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+heme+oxygenase+system%3A+its+role+in+liver+inflammation%5BTitle%5D)+AND+%22Curr+Drug+Targets+Cardiovasc+Haematol+Disord%22%5BJournal%5D)">The heme oxygenase system: its role in liver inflammation.</a> Curr Drug Targets Cardiovasc Haematol Disord. 3, 199-208 (2003).</li>
<li>Hoekstra, K. A., Godin, D. V., Cheng, K. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Protective+role+of+heme+oxygenase+in+the+blood+vessel+wall+during+atherogenesis%5BTitle%5D)+AND+%22Biochem+Cell+Biol%22%5BJournal%5D)">Protective role of heme oxygenase in the blood vessel wall during atherogenesis.</a> Biochem Cell Biol. 82, 351-359 (2004).</li>
<li>Yang, N. C., Lu, L. H., Kao, Y. H., Chau, L. Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Heme+oxygenase-1+attenuates+interleukin-1beta-induced+nitric+oxide+synthase+expression+in+vascular+smooth+muscle+cells%5BTitle%5D)+AND+%22J+Biomed+Sci%22%5BJournal%5D)">Heme oxygenase-1 attenuates interleukin-1beta-induced nitric oxide synthase expression in vascular smooth muscle cells.</a> J Biomed Sci. 11, 799-809 (2004).</li>
<li>Morse, D., Choi, A. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Heme+oxygenase-1%3A+from+bench+to+bedside%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Respir+Crit+Care+Med%22%5BJournal%5D)">Heme oxygenase-1: from bench to bedside.</a> Am J Respir Crit Care Med. 172, 660-670 (2005).</li>
<li>Ryter, S. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Protective+functions+of+heme+oxygenase-1+and+carbon+monoxide+in+the+respiratory+system%5BTitle%5D)+AND+%22Antioxid+Redox+Signal%22%5BJournal%5D)">Protective functions of heme oxygenase-1 and carbon monoxide in the respiratory system.</a> Antioxid Redox Signal. 9, 2157-2173 (2007).</li>
<li>Wilson, K., Yu, J., Lee, A., Wu, J. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((In+vitro+and+in+vivo+bioluminescence+reporter+gene+imaging+of+human+embryonic+stem+cells%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">In vitro and in vivo bioluminescence reporter gene imaging of human embryonic stem cells.</a> J Vis Exp. , (2008).</li>
<li>Calabrese, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Vitagenes%2C+dietary+antioxidants+and+neuroprotection+in+neurodegenerative+diseases%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Biosci%22%5BJournal%5D)">Vitagenes, dietary antioxidants and neuroprotection in neurodegenerative diseases.</a> Front Biosci. 14, 376-397 (2009).</li>
<li>Contag, P. R., Olomu, I. N., Stevenson, D. K., Contag, C. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Bioluminescent+indicators+in+living+mammals%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Med%22%5BJournal%5D)">Bioluminescent indicators in living mammals.</a> Nat Med. 4, 245-247 (1998).</li>
</ol>

作者无任何利益冲突需要披露。

血红素加氧酶的可诱导形式 HO-1 的转录可被多种因素上调，包括血红素、过氧化氢、紫外线照射、缺氧和物理应激。全身成像技术（如已报道的 HO-1 生物发光检测方案）可快速呈现多个器官中系统性 HO-1 表达的概况。在小型动物中，生物发光成像能够对系统性基因表达的变化进行高灵敏度、活体、实时、定量且纵向的光学评估，如图所示。生物发光分子成像降低了小型动物基因表达检测的成本，并提高了通量，使其能够快速获得足够的统计效力，用于复杂系统生物学假说的研究，以及评估拟议的药物和其他治疗干预措施的全身效应。其局限性之一是解剖结构的空间分辨率较低。具备断层成像能力的新型光学成像系统可缓解这一问题。通过显微计算机断层扫描（micro-CT）或小型动物磁共振成像（MRI）进行图像采集与配准，将有助于准确定位解剖结构。其他局限性包括光在组织中的穿透深度有限，以及需要使用转基因动物。这些因素基本排除了该技术向大型动物或人类应用的转化，但对于小型动物的系统生物学研究或临床前治疗假说验证而言，并非显著缺陷。

<table><tbody><tr><td>荧光素</td><td>Caliper Life Sciences</td><td>P/N 122796</td><td>曾用名 Xenogen</td></tr><tr><td>IVIS 100</td><td>Caliper Life Sciences</td><td></td><td>曾用名 Xenogen</td></tr></tbody></table>

刮痧疗法中血红素加氧酶-1 上调的生物发光成像

Bioluminescence Imaging of Heme Oxygenase-1 Upregulation in the Gua Sha Procedure

刮痧是一种传统的中医疗法，通过皮肤刮擦导致皮下微血管出血和瘀斑。血红素加氧酶-1（HO-1）生物发光光学成像的实验方案luciferase 本手稿中报道的转基因小鼠提供了一种快速in vivo检测刮痧操作后血红素加氧酶-1（HO-1）基因表达的上调。HO-1 长期以来被认为可提供针对氧化应激的细胞保护作用。通过生物发光信号评估的 HO-1 上调被认为代表了机体对刮痧释放入循环的血红蛋白产物所产生的一种抗氧化反应。刮痧操作采用光滑的汤匙边缘，在转基因小鼠背部或其他目标部位的润滑皮肤上反复刮拭，直至观察到提示皮下毛细血管出血的皮肤表现，如瘀点（裂片状出血）或瘀斑（挫伤）。刮痧后，连续数日每日进行生物发光成像，以追踪多个内脏器官中 HO-1 表达的动态变化。

刮痧是一种传统的中医治疗性皮肤刮擦疗法，可引起皮下微血管的血液外渗。本文报道了一种利用血红素加氧酶-1（HO-1）-luciferase 转基因小鼠进行生物发光成像的实验方案，以证明刮痧可在多个器官中上调血红素加氧酶-1（HO-1）的表达。

刮痧是一种传统中医民间疗法，通过皮肤刮擦导致皮下微血管出血和瘀斑。该方案……

您好，我是来自哈佛医学院教学医院布莱根妇女医院放射科神经放射科分部的 Jeffrey Young。您好，我是 Brad Quo，来自马萨诸塞州总医院胃肠科和内科，以及马蒂诺放射学中心。今天，我们将向您展示一种在活体小鼠模型中进行血红素加氧酶-1调控生物发光成像的实验方法。在我们的实验室中，利用该技术研究通过刮痧——一种传统中医皮肤刮擦疗法——所诱导的血红素加氧酶-1系统性上调。现在开始操作。在对雌性HO-1荧光素酶转基因小鼠进行麻醉前，需先称重，以便后续计算卢西弗酶的正确剂量，然后开始脱毛。通过脚趾夹捏反射消失来确认小鼠已完全麻醉。然后用棉签将脱毛乳液涂抹于动物背部。等待5到10秒后，用干净的棉签擦去毛发。接着，将一片纸巾浸入蒸馏水中，用该纸巾擦拭清除残留的毛发。在操作过程中，需多次涂抹蒸馏水以润滑刮痧部位的皮肤。使用塑料勺子轻轻但有力地刮擦小鼠背部无毛区域。持续刮擦直至背部皮肤变红，这是皮下出血的迹象。通常在两到三分钟内即可达到此效果。在准备荧光素溶液的同时，将小鼠放入诱导室中，荧光素溶液的配制方法将在下一节中介绍。通过将荧光素溶解于无菌水中，配制浓度为 7.5 毫克/毫升的荧光素溶液。荧光素的给药剂量为每公斤体重 65.5 毫克。用26号针头预装一支注射器，内含一份完整的荧光素溶液剂量。迅速将针头插入小鼠腹部，并一次性完成全部剂量的注射。在IVUS 100成像系统的成像区域放置一张非荧光黑色纸。为了在成像过程中减少背景噪声。开始成像时，将小鼠转移至IVUS 100光学成像系统上的成像室。成像室持续灌注1.5%的异氟烷以维持小鼠麻醉状态，将小鼠置于仰卧位。腹部朝上。将图像采集设置为中等亮度，曝光时间为30秒。将设备设置为每三分钟重复一次图像采集，可手动或自动进行。在获取第一张图像后开始采集图像。绘制一个感兴趣区域（ROI），覆盖腹部、胸部和头部区域。然后复制此感兴趣区域并粘贴到后续图像中。使用活体成像软件，以每秒光子数来测量信号强度。标记信号强度达到峰值所需的时间，并继续对小鼠成像约5至10分钟。在达到峰值时间后，当仰卧位的图像采集完成后，将小鼠翻转，使其呈俯卧位放置。此次向后移动，绘制 ROI 以覆盖背部和头部区域。获取第一张图像后，继续对动物成像 5 到 10 分钟。当俯卧位图像采集完成后，关闭异氟烷。将小鼠从成像室转移至诱导室，进行恢复。此时诱导室仅充入医用空气，小鼠应在不到一分钟内苏醒。保存成像数据以供后期处理。初次成像后，需在胍法处理后的数天内继续进行多次成像。成像前，需重复对小鼠背部进行脱毛处理。如果毛发在体内重新生长，可观察到在刮痧刺激下HO-1的表达上调。从左到右分别为同一小鼠在刮痧前、刮痧后18小时、36小时和120小时的正面图像。可以看出，刮痧后多个器官中的生物发光信号强度逐渐增强。该图显示了同一小鼠全身在120小时内光学通量的定量时间

bioluminescence-imaging-heme-oxygenase-1-upregulation-gua-sha

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科研

JoVE Journal

Biology

生物学

血红素加氧酶1表达上调在刮痧过程中的生物发光成像

在乳腺癌脑转移小鼠模型中，利用生物发光成像技术监测缺氧诱导因子-1α活性，以观察颅内肿瘤缺氧的发展过程。...

in vivo 生物发光成像技术在小鼠模型中对乳腺癌脑转移瘤缺氧动态的观察

NADPH 氧化酶是吞噬细胞中活性氧（ROS）的主要来源。由于 ROS 具有短暂存在的特性，因此在活体动物中测量和监测 ROS 水平十分困难。本文描述了一种在活体小鼠中连续定量检测 ROS...

不同动物模型中NADPH氧化酶活性的生物发光成像

本文介绍了将携带lux标记的细菌给予小鼠，并随后使用IVIS生物发光成像进行活体分析的方法。...

活体生物发光细菌成像 In Vivo

来源：Hunt, A. M. A., 等. 走向光明的一侧：在糖尿病无毛小鼠模型中对慢性伤口内 Pseudomonas aeruginosa 生物膜感染进行活体监测。J. Vis.

利用生物发光成像追踪小鼠模型中的细菌感染与伤口愈合

我们描述了一种用于区分炎症阶段的非侵入性成像方法。全身递送的鲁米诺可显示依赖于中性粒细胞中髓过氧化物酶（MPO）活性的急性炎症区域。相比之下，注入的双甲酰胺（lucigenin）则可实现对依赖于巨噬细胞中NADPH氧化酶（Phox）活性的慢性炎症的可视化成像。...

体内成像方法区分急性与慢性炎症

本论文描述了在活细胞成像中应用基因编码的荧光生成报告系统，用于检测外源性物质诱导的氧化应激。该实验方法具有无与伦比的空间-时间分辨率、灵敏度和特异性，同时避免了传统毒理学氧化应激检测方法的诸多局限性。...

利用基因编码的荧光传感器成像评估毒理学氧化应激的方法

我们介绍一种非侵入性的体内成像方案，该方案流程简化且成本效益高，利用化学发光的鲁米诺类似物L-012，对小鼠全层皮肤缺损伤口模型中产生的活性氧（ROS）进行可视化和定量分析。...

体内成像小鼠伤口模型中的活性氧

本方案描述了建立荷瘤小鼠模型，通过双荧光素酶成像实时监测肿瘤进展和血管生成的方法。...

双生物发光成像监测肿瘤进展与血管生成

本实验方案的目的是在小鼠皮肤中诱导产生非致死水平的活性氧（ROS），从而进一步促进组织中的生理反应。...

通过可切换的原卟啉IX依赖性原位活性氧生成刺激小鼠皮肤干细胞微环境及组织再生

生物发光是指荧光素酶氧化小分子底物（荧光素）所发出的光，可用于激活光感应蛋白，从而为光刺激增加一个新的维度，并能够在时间和空间尺度上调控细胞中多种由光介导的功能。...

生物发光光遗传学2.0：利用生物发光激活光感受蛋白 体外 和 体内

本方案描述了一种标准化的逐步操作流程，用于对诊断为慢性疲劳综合征的人类受试者进行铜质砭石刮痧。该技术涉及将铜合金刮痧板应用于特定经络路径（督脉和膀胱经）及指定的穴位。文中包含了干预前后的代表性观察数据，以说明操作流程和数据采集方法。...

一种用于治疗人类慢性疲劳综合征的标准化铜质砭石刮痧方案

了解利用生物发光成像技术在小鼠模型中实时监测刮痧诱导的血红素加氧酶1表达上调的方法。该技术揭示了传统中医疗法的系统性生理效应及其潜在治疗机制。

刮痧疗法中血红素加氧酶-1 上调的生物发光成像

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