0 次观看 • 2:29 分钟 • January 30th, 2026
取一条感染了脓肿分枝杆菌（Mycobacterium abscessus）的斑马鱼胚胎，这是一种靶向中枢神经系统的致病性细菌，可形成包含细菌和宿主免疫细胞的脓肿。
将胚胎置于冰上孵育以使其 immobilize（固定），随后暴露于过量麻醉剂中，以停止心脏和神经活动，导致死亡。
清洗胚胎以去除残留的麻醉剂。
加入去垢剂溶液以破坏细胞膜并裂解胚胎。
用针头剪切裂解液，以均质化组织并释放细菌。
离心，弃去上清液，并将沉淀重悬于表面活性剂溶液中，以防止细菌聚集。
将细菌悬液进行连续稀释，并涂布于琼脂平板上。
培养基中添加抗生素以抑制其他微生物的生长，而具有抗生素抗性的Mycobacterium细胞则得以增殖。
孵育以促进菌落形成，从而定量胚胎中的细菌载量。
为了在预定时间点计数菌落形成单位（CFU），需收集每种感染条件下五个胚胎，并将每个胚胎转移至一个1.5毫升微量离心管中。将胚胎置于冰上孵育10分钟以进行低温麻醉。使用300至500毫克/升的三卡因处死胚胎后，用无菌水在新管中清洗胚胎两次。
接下来，用含1×PBS中2%Triton X-100去除胚胎中的水分，然后使用26号针头匀浆组织以实现完全裂解。
离心悬浮液后，使用 1 X PBST 重悬沉淀。然后，将匀浆液进行连续稀释，并接种于添加了 BBL MGIT PANTA 的 Middlebrook 7H10OADC 培养基上。
将平板在 30 °C 下孵育 4 天，然后计数菌落。