Name: PDMS的设备制造和表面改性 (视频) | JoVE Journal
Uploaded: 2007-10-01T15:22:25.000+00:00
Duration: 14 min 48 s
Description: 学习使用免疫亲和捕获微流控设备分离中性粒细胞并进行基因组分析的方法。该技术已在多家医院应用，可高效分离细胞并提取高质量RNA用于下游研究。

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作者无任何利益冲突需要披露。

pdms 器件制备与表面修饰

PDMS Device Fabrication and Surface Modification

PDMS 器件制备与表面修饰

我叫Ken Kotz。我是隶属于麻省总医院的生物分子资源中心的一名博士后。我的主要研究项目是利用带有微流控结构的免疫亲和捕获装置来分离中性粒细胞。我们在全国五家不同的医院使用该设备来分离RNA，用于下游基因组分析。基本结构是在硅片上有一层SU-8光刻胶作为模具。我们将在该模具上浇注双组分弹性体A-P-D-M-S，该PDMS将形成一个铸模。将母模从其容器中取出，并放入培养皿中。用胶带将母模固定在培养皿底部。在天平上称取一定量的PDMS、固化剂和基础树脂的混合物。比例为一份固化剂配十份树脂。通常情况下，对于已经裁切好的器件，我们称取20至30克树脂以及相应2至3克的固化剂。将固化剂和树脂倒入小的塑料容器后，使用标准的塑料叉子将两者混合均匀。需要确保充分剧烈混合，并将混合物上下翻拌，以保证固化剂在树脂中均匀分布。通常，我们会通过观察气泡的数量来判断两者的混合程度，目标是使微小的气泡在整个弹性体中均匀分布。然后将PDMS倒入培养皿中的SU-8模具上。将带有PDMS的模具放入真空干燥器中，抽真空以去除混合其中的空气。通常，脱气过程需要30分钟至1小时。脱气后，我们将装置从真空室中取出，并置于65至80摄氏度的烘箱中。在此温度范围内的最短固化时间为3至6小时。在我们实验室中，通常会将装置在烘箱中放置过夜。通常，我们使用11号外科级钢刀。从硅胶母版边缘向下约半厘米处开始，进行直线切割，并沿母版边缘切割成一个较大的圆盘。将PDMS模具从母版上剥离，并将带有微结构的一面朝上放置于洁净的培养皿中。将脱模后的模具从培养皿中取出，使用刀片或安装在直线导轨上的刀片将其放置到切割表面。对模具上包含的器件进行切片。每个切片后的器件随后被放回培养皿中，以进行后续处理。通常，为了使我们的装置与液体连接，需要在PDMS装置上打孔。我们用来打孔的装置是一个标准的3毫升注射器。该3毫升注射器的尖端是一根钝头不锈钢针。不锈钢针头内部有一根与针头内径相匹配的金属丝，该金属丝连接在注射器的推杆上。通过向后拉动推杆并回缩针头，即可在PDMS上打孔或插入柱塞。翻转PDMS装置后，通过推动推杆将其推出。打孔装置的关键在于尽可能保持压杆垂直，且完全不要旋转打孔装置。当您在PDMS上打孔时，用一对镊子将整个装置、即整个PDMS装置提起，翻转过来，然后通过下压压杆将孔塞推出。再用一对镊子夹住孔塞并将其丢弃。然后再次回拉活塞，将装置翻转回原位并抽出切割装置。重复此操作，直至完成所有孔的打孔。接下来进行键合过程，我们将PDMS装置键合到玻璃载片上。对于我们的装置，我们将通过不可逆键合或共价连接的方式将聚二甲基硅氧烷（PDMS）固定在玻璃载片上。实现这一过程的方法是将它们放入等离子体灰化仪中，并暴露于活性氧等离子体。具体操作步骤如下：取PDMS装置并将其放置在等离子体灰化仪的托盘上。将设备的特征面朝上放置，您可以使用任何

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