建立评估膜内骨化硬性稳定骨折，牵张成骨，或临界中小企业缺损愈合

该程序的总体目标是创建一个外部固定的胫骨，可用于分析稳定的骨折愈合、牵引、成骨和节段性间隙缺损的愈合。首先，通过将不育昆虫针插入胫骨的近端和远端部分，然后将环固定到不育昆虫针上，将固定器的环定位并固定到位。接下来，在胫骨的中骨干处形成骨折或截骨术 在手术的最后一步，插入第三根螺纹杆以完全稳定近端和远端环。

最终，可以通过 X 射线组织学和分子分析获得显示骨折愈合、牵引、成骨和骨植入机制的结果。演示该程序的将是高级研究人员 Diane 博士、who 和 Y Yuu 以及来自加州大学旧金山分校旧金山总医院的博士后研究员 Chelsea Baney 博士。骨科创伤研究所骨骼再生实验室 首先组装定制设计的外固定装置。

固定框架由两个铝环制成，由三个不锈钢螺纹杆、八个六角螺母和 17 个匹配螺栓稳定。每次骨折需要两个铝环，以使近端环松散地将四个六角螺母和匹配的螺栓拧入适当的孔中。要在不完全拧紧的情况下再次将远端环拧入四个螺母和螺栓中，然后将两根长螺纹杆放在位于 12 点钟和 6 点钟位置的孔中的远端环上，并用两个六角螺母连接。

通过腹膜内注射氯胺酮和美因麻醉所需年龄的小鼠。并使用脚趾捏试验确认完全麻醉。去除头发并用消毒剂清洗后，涂抹眼部润滑剂，然后将鼠标放在加热垫上进行剩余的手术。

将近端环放在腿上，螺母朝向远端，然后将环移动到膝关节上方。使用四个 0.25 毫米的无菌昆虫针固定左胫骨的近端和远端干骺端，方法是将针连接到钻头上并在骨骼中钻孔。将销钉垂直于胫骨的长轴并彼此成 90 度角，在近端和远端销之间至少留出 10 毫米。

将销钉固定到近端环上，保持胫骨位于铝环的中央。将第二个环置于远端销下方。将两根杆固定到近端环上，然后使用六角螺母将销钉固定到环上。

和以前一样，使用适当的设备通过三点弯曲来产生横向断裂。将胫骨的邮政外侧表面放在块上。沿落臂将重物升高到预定高度并放下重物，使其接触胫骨的前外侧。

要产生钝性骨折，请通过 X 线检查确认骨折。接下来，从远端开始将最后一根不锈钢螺纹杆连接到环上。插入杆并将螺母拧到远端环上以固定杆。

然后将另一个螺母放在杆上，使近端环位于顶部。确保两个环保持相等的距离，并且不会拉紧销钉。用第三个螺母将近端环固定到杆上。

将 aamaz 全部添加到反向麻醉和丁丙诺啡镇痛中，并监测动物，直到它们有反应和可以走动。然后皮下注射丁丙诺啡用于镇痛，4 小时后再次注射用于标准牵引成骨。使用这个模型，将固定器放在胫骨上，造成骨折，并让它们单独放置五天的潜伏期。

五天后，通过转动稳定杆上的螺母进行牵引成骨。每天四分之一周转，持续 7 天。术后密切监测动物是否需要额外的镇痛。

完成后 10 天观察到骨桥接，并在 27 天观察到完全巩固。麻醉后，用脱毛剂去除毛发并用消毒剂清洁皮肤，如前所述使用固定器。将鼠标放在解剖显微镜下以观察内侧胫骨，然后在手术刀上用 10 号刀片切开 5 到 7 毫米。

轻轻横切并分离肌肉，露出胫骨中骨干。用剪刀的尖端慢慢剪掉一段 3 毫米的胫骨，小心不要用很大的机械力使骨头移位。然后用镊子去除任何残留的骨碎片。

检查手术部位是否有骨碎片后，更换胫骨钝端周围的肌肉。用两到三根 6.0 聚单丝缝合皮肤上的切口，然后插入第三根杆以稳定外固定器。如前所述，反向麻醉给予镇痛药并继续监测动物的疼痛。

如前所述，如果应用得当，外固定器为闭合性胫骨骨折提供高度刚性的稳定性，如骨折后拍摄的这张 X 光片所示，箭头骨折表明骨段对齐良好，使用这种方法稳定，主要通过膜内骨化愈合，此处显示使用三铬染色，稳定的骨折在骨折部位显示一些新骨。相反，如果骨折不稳定，则在骨折间隙中形成一个大的软骨愈伤组织，并通过软骨内骨化过程被骨取代。这项技术为骨科领域的研究人员探索小鼠骨折稳定愈合的机制铺平了道路。