临床试验和脊髓去除在肌萎缩性侧索硬化症的小鼠模型（ALS）

一个肌萎缩性侧索硬化症（ALS）的小鼠模型研究，临床和行为。作为一个伴随的免疫组织化学分析的前提下编制的脊髓详细描述。

您好，我叫 Lar Turner。我是德国英厄姆大学神经病学系的博士后。大家好，我是 Lin Gunda。

我是一名医学生，我在这个实验室做我的论文工作。今天，我们将向您展示 SODG 93 的临床测试，这是一种萎缩性侧索硬化症的 Moss 模型。此外，我们将通过所谓的转子测试来演示运动功能测试，此外，我们还将使用悬挂的 Wire 手柄进行另一个运动功能测试，以进行免疫逻辑分析。

在对小鼠进行功能测试后，必要的程序包括切除脊髓、STIC 神经和腓肠肌。我们想详细展示这些外科手术，并在最后介绍一些示例性的免疫逻辑发现。好的，现在让我们先从临床试验开始。

这是一种自由移动的野生型 MOE，在我们的临床分类系统中没有表现出任何临床症状，如肌肉震颤或麻痹。那将是 4 分。这是一种转基因 A LS 萌。

在疾病早期，它表现出右肘肢的严重震颤，将其归类为 SCORE 3 E.严重的步态异常 将这种动物归类为 SCORE 2。在吊线测试中，至少一个后肢的拖拽被归类为临床评分 1，评估粗肌肉肋骨力量。每只鼠标都放在 CustomMade 电线上，并小心翼翼地将吸管覆盖的按钮倒置。

在连续训练 3 次至少 180 秒后，测量了跌倒的延迟。每只鼠标最多尝试 3 次握住倒置的盖子，最长的时间是与右侧的白线型鼠标相比。左边的斑块转基因小鼠非常脆弱，在达到最大值之前就从盖子上脱落。

转子杆装置用于测量运动协调性、平衡性和运动学习能力。良好的表现需要高度的感觉运动协调能力。它由一个计算机控制、电机驱动的旋转主轴和五个 5 m 的通道组成。

通过对底部塑料板的压力自动检测小鼠的故障。以每分钟 15 发的恒定速度连续训练 3 次至少 180 秒后，测量动物可以在旋转腐烂中停留的时间。每只动物都经过 3 次试验，并记录了最长的潜伏期没有跌倒。

左侧的健康野生型 mos 在转子杆上运行没有困难。相比之下，右侧的转基因 a s mo 存在严重的问题，甚至无法留在转子杆上，从后面观察一段时间后就会滑落。你会看到 left retre 鼠标的严重运行困难。

与健康的 wire tap 鼠标相比，它无法跟上转子杆的速度，也无法用 HIN 肢体向上推动。为了对脊髓进行免疫化学分析，必须处死动物。始终严格遵守当地正确进行动物实验的指导方针非常重要。

在这种情况下，在这个非常简化的脊柱及其周围组织的概述中，描绘了主要的解剖结构。我们将动物放在它的腹侧，并开始从背袋中准备肌肉。去除肌肉组织后，我们将进入包围脊髓的脊柱。

处死动物并用含有 Paraform Height 的溶液灌注后，可以去除脊髓。将动物放在手术台上，将完整的四肢固定在两侧，以便露出老鼠的背面。弄湿动物以压平毛发并促进随后的皮肤切口。

为此，使用了锋利的手术刀。小心地将皮肤向两侧拉伸。为了方便切割腿部肌肉，应做好准备。

他们的皮肤也必须被切开。皮肤切口完成后，轻轻将其拉到一边。用一把镊子去除了腿部肌肉和坐骨神经后，我们继续接近脊髓并将动物放在新的手术台上。

现在很容易识别颅骨颈部、肌肉和脊柱。确定了所有这些结构后，就很容易进行下一步了。颈部和新韧带的肌肉必须被切除。

小心不要切得太深并引导脊柱。在下一步中，完全去除椎旁肌肉以露出脊柱。为了进入脊柱，必须进行几次切除。

我们从脊柱的颈部开始，包括大西洋枕关节。要进行椎板切除术，我们必须切开椎弓才能从椎体中去除所有椎突。如前所述，椎板切除术从椎弓的切割开始。

然后可以把 laina 拉走。同样，注意不要损伤脊髓，因为必须切除更多的 ral。使用斜剪刀并一次插入两侧的几个椎弓是相当有帮助的。

然后拉动背突以完全去除椎板和特写。你看，这把剪刀必须小心地插入椎管一侧的最外侧。必须去除脊柱的其余外侧部分，以方便以后完全去除脊髓。

脊髓的一个解剖标志是所谓的颈椎和腰椎。完成整个脊髓的切除手术后，确保您还横切了脊髓的所有腹根并将其从脑膜的 dur 物质中释放出来。接下来，切断颈脊髓。

颅骨上，然后再次开始删除。为了不伤害该组织，请非常小心地触摸脊髓，因为这可能会严重限制以后的免疫免疫化学分析。脊髓的切除在胸椎水平进一步继续进行，并进入腰部。

最后，这次是在马脐带的侧面再次切割。现在我们能够完全发布它。在这里，您可以看到脊髓位于 RAL 列中其原始位置的正旁边。

最终，它被放入 Paraform Hyde 固定后溶液中。作为脊髓免疫组织化学分析的经典示例，您可以使用识别胆碱、乙酰转移酶的抗体来识别脊髓前角中的运动神经元。在这里，您可以看到健康的野生型动物中存在大量运动神经元。

相比之下，转基因 A LS 动物在末期确实在前角中表现出较少的运动神经元数量。观看这篇视频文章，您应该已经了解了 SODG 93 的基本临床检查。萎缩性侧索硬化症的小鼠模型。

已经证明了两种电机行为测试，即转子测试和吊线测试。它们为评估基本运动功能提供了很好的可能性。它们易于执行，对运动缺陷的检测灵敏且省时。

本视频的主要部分包括脊髓准备技术的演示。这当然可以应用于任何其他小鼠疾病模型，并且是以后脊髓疾病病理学免疫化学分析的重要步骤。感谢您的观看。

我们希望这篇视频文章对您未来的实验有所帮助。