结直肠癌原位小鼠模型

嗨，我是 William Sang。我来自斯坦福大学病理学系 Edgar Engelman 博士的实验室。我也是加州大学旧金山分校的外科住院医师。

今天，我将向您展示如何建立结直肠癌的原位小鼠模型。该模型可用于研究结直肠癌的自然进展和测试针对结直肠癌的新治疗药物。这与传统的皮下肿瘤模型形成鲜

皮下肿瘤模型不太理想，因为肿瘤细胞在改变表型的皮肤下生长，并且经常无法进展和转移。事实上，肿瘤对治疗的反应可能差异很大，具体取决于肿瘤细胞是植入皮下位置还是原位位置。两种技术可用于建立结直肠癌的原位小鼠模型。

一种技术涉及将结直肠癌细胞悬液注射到 SQL 壁中。另一种技术涉及将一块皮下肿瘤移植到盲肠上。这两种技术相似，涉及以下步骤，一是细胞或肿瘤制备。

二、小鼠准备、剖腹手术和盲肠暴露。3 次注射细胞或移植肿瘤，4 次小鼠腹壁闭合和恢复。让我们开始吧。

因此，对于今天的手术，我们使用了许多不同的器械。这些是镊子、剪刀、普通持针器、Castro Viejo ne 持针器。对于该程序来说，重要的是，我们有一块预先切割的无菌纱布。

结直肠癌细胞 在培养物中生长并在亚汇合时收获，在磷酸盐缓冲盐水中制备单细胞悬液并保持在冰上。先前确定的皮下结直肠肿瘤的恶意被安乐死。使用无菌技术切除皮下肿瘤并分成 2 到 3 毫米的小块。

将肿瘤块保存在冰上的磷酸盐缓冲盐水中。在我们的实验室，我们使用吸入麻醉剂 isof 氟。或者，可以使用注射麻醉剂来达到相同的效果。

使用脚趾捏评估麻醉深度。脚趾捏时不应有撤退反射。此时可以给予抗生素。

先前剃光的麻醉小鼠已正确定位。用 Betadine 溶液准备腹部 3 次，然后以无菌方式覆盖腹部和手术部位。皮肤上有一个小缺口。

腹壁肌肉组织被移植并抬起。腹腔受伤，用单把剪刀将腹腔内容物推开。切口延长至 2 至 3 厘米。

带有盲端袋的 secum 被识别和外显。该 secum 与小鼠的其余部分隔离。使用预先切割的无菌纱布温盐水保持盲肠湿润。

使用 27 号或更细的针头将 50 微升体积的细胞注射到 SQL 壁中。针头被移除。检查注射部位以确保无泄漏 除了将细胞注射到 SQL 壁外，另一种方法是将肿瘤移植到盲肠上。

使用 6 oh 或 7 oh 大小的缝合线将 8 字形缝合线放置在盲肠上。seco 墙面有轻微损坏。然后正确定位肿瘤块。

针脚被绑住。后部返回腹腔。小鼠腹壁使用 3 oh 或 4 oh 尺寸的缝合线进行三次间断缝合。

或者，可以使用简单的连续缝线、术后镇痛药和液体推注。此时，允许小鼠使用吸入麻醉剂从麻醉中恢复。小鼠通常在 30 秒内从麻醉中恢复。

我刚刚向您展示了如何建立结直肠癌的原位小鼠模型。发展为原发性肿瘤和肝转移的时间将取决于所使用的技术、使用的细胞系和使用的小鼠物种。该模型可用于研究结直肠癌的自然进展和测试针对结直肠癌的新疗法。

就是这样。感谢您的观看，祝您的实验好运。