OP-IVM：取卵后卵母细胞体外成熟与妇科手术的结合

该技术即体外成熟技术（OP-IVM），是传统体外成熟（IVM）方案的延伸，结合了取卵后体外成熟与常规妇科手术。该技术适用于在接受辅助生殖技术（ART）治疗或生育力保存前需接受妇科手术的不孕或亚临床不孕女性，对克罗米芬耐药且需接受腹腔镜卵巢打孔术的多囊卵巢综合征患者，需要接受良性妇科手术的不孕患者，如宫腔镜下肌瘤切除术、息肉切除术、经胸隔膜切除术以及腹腔镜输卵管手术，以及在ART治疗前行卵巢囊肿切除术的患者；同时也适用于正在接受化疗放疗或放疗的癌症及血液系统疾病患者，此类患者可通过该手术实现生育力保存。将超声探头置入阴道内，扫描并记录双侧卵巢的卵泡数量。

选择最靠近卵巢的位置作为穿刺点，避开肠管、膀胱和大的血管。用pH稳定的操作液冲洗19号单腔抽吸针，然后在超声引导下将针插入卵巢。在80至90毫米汞柱的压力下用针抽吸卵泡液，轻微旋转针头以尽可能多地抽吸卵泡液。

在穿刺过程中使用肝素以降低卵泡液的黏稠度。调整探头位置，使其始终尽可能靠近卵巢，并以适当力度按压阴道穹窿，以减少损伤和出血。确保在25至30分钟内完成卵泡液的抽吸。

完成一侧卵巢操作后拔出针头，用操作液清洗针头，再用相同方法穿刺另一侧。在37摄氏度的恒温平面上进行操作，准备好操作液、培养皿和细胞筛。用预热的pH稳定型操作液冲洗培养管和细胞筛。

使用70微米尼龙细胞滤网过滤抽吸的卵泡液，并用预热的pH稳定操作培养基反复冲洗培养管和滤网。确保将所有未成熟COCs完全转移至培养皿中。将血液转移至清洁的操作培养基中。

然后，将细胞滤网转移至新的培养皿中并进行清洗。吸出含有卵丘-卵母细胞复合体（COCs）、颗粒细胞和组织的处理液，并转移至新的培养皿中。在体视显微镜下以40倍放大倍数观察COCs。

迅速将未成熟卵母细胞转入预热的IVM卵母细胞培养基中。接着，检查血凝块和细胞滤器中的卵丘-卵母细胞复合体（COCs）。将COCs及操作液转移至预热的IVM卵母细胞培养基中。

将未成熟卵母细胞-冠丘复合体（COCs）在含5%二氧化碳和5%氧气的湿润空气中，于37摄氏度培养28至32小时。截至2019年12月，体外成熟技术（OP-IVM）已用于274名患者的生育力保存。其中一个案例为一名28岁女性患者，诊断为原发性不孕、左侧附件囊肿及多囊卵巢综合征（PCOS）。

她于2016年9月接受了腹腔镜下囊肿切除术和体外成熟（OP-IVM）治疗，共获得27个未成熟的卵丘-卵母细胞复合体（COCs）。经过28小时的培养，选取了7个处于MII期的卵母细胞，并通过卵胞浆内单精子注射（ICSI）进行受精。五天后，将两个囊胚冷冻保存。

其中一枚于2017年2月解冻并移植入子宫，患者于同年11月顺利分娩一名健康女婴。体外成熟技术（OP-IVM）最初应用于接受卵巢打孔术的多囊卵巢综合征（PCOS）不孕女性的卵母细胞采集，目前其应用范围可扩展至需接受良性妇科手术的亚生育力女性，甚至可用于癌症患者的生育力保存。

这表明，通过将 IVM 与其他传统妇科手术相结合，可扩大其在女性生育力保存中的应用范围。