2023年10月6日
迄今为止,从同一只小鼠中同时分离所有主要中枢神经系统驻留细胞类型的方案尚未满足需求。该方案显示了适用于幼稚和实验性自身免疫性脑脊髓炎小鼠的程序,以研究神经炎症期间的复杂细胞网络,同时减少所需的小鼠数量。
为了研究自身免疫性疾病(如多发性硬化症)的分子和细胞机制,生成可重复和复杂的细胞分离方案是一项未满足的需求。目前大多数用于分离和分析中枢神经系统驻留细胞的技术都显示出严重的缺点,例如仅关注一种细胞类型或仅关注出生后小鼠。目前从一次中枢神经系统复制中同时分离所有主要中枢神经系统驻留细胞类型的方案提供了分析复杂神经元网络和新的炎症途径的可能性,离体来自一个单细胞悬浮液,适用于健康小鼠和实验性自身免疫性脑脊髓炎患者。
此外,小鼠数量减少 我们在健康和EAE小鼠中同时分离所有四种主要CNS驻留细胞类型的方案可以用作研究新炎症途径的研究小组的有用工具,从而可以更准确地分析复杂的生物分子机制和离体细胞网络。在我们的协议的帮助下可以回答的新科学问题是在疾病过程的不同阶段(如神经炎症、神经退行性变和缓解)对 EAE 的动态研究。此外,可以在个体水平上研究细胞间相互作用和生化途径。
同样,可以用培养的细胞进行功能测定。我们打算专注于 EAE 课程的动态研究,用于从每个 EAE 时间点的单个 CNS 匀浆进行多组学分析。
本研究提出了一种从单只小鼠中同时分离所有主要中枢神经系统(CNS)常驻细胞类型的全新方案,适用于正常状态及实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)模型。该方法旨在克服现有细胞分离技术的局限性,使研究人员能够在神经炎症过程中研究复杂的细胞间相互作用,同时最大限度减少实验所用小鼠数量。
从成年EAE小鼠中同时分离所有主要的中枢神经系统常驻细胞类型,可在单次实验中全面探究神经炎症机制。该方法支持高通量、多组学分析,同时减少动物使用量,直接推动神经免疫学研究领域中的早期发现和靶点验证。本方案可提高在自身免疫性中枢神经系统疾病模型中通路去风险化及转化生物标志物开发的预测可信度。
该方案通过实现对实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)小鼠和健康小鼠的多种细胞类型进行同步分析,融入从发现到临床前研究的连续过程,支持以假设为导向和探索性的研究。