Name: 动静脉代谢组学测量棕色脂肪组织 中的体内 代谢物交换 (视频) | JoVE Journal
Uploaded: 2023-10-06T12:40:00.000+00:00
Duration: 2 min 55 s
Description: 了解棕色脂肪组织动静脉代谢组学方法，使用小鼠模型和GC-MS技术进行代谢物交换分析。该方案为研究能量平衡及肥胖、糖尿病等代谢疾病提供了可靠的实验手段。

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

我们感谢Choi和Jung实验室的所有成员参与方法学讨论。感谢C. Jang和D. Guertin提供的建议与反馈。感谢M.S. Choi对稿件的审阅。本研究由NRF-2022R1C1C1012034（授予S.M.J.）、NRF-2022R1C1C1007023（授予D.W.C）以及NRF-2022R1A4A3024551（授予S.M.J.和D.W.C）资助。W.T.K.的研究得到了忠南国立大学的支持。图1和图2使用BioRender（http://biorender.com/）制作。

所有实验均经成均馆大学机构动物护理和使用委员会（IACUC）批准。小鼠饲养在洁净室内的IACUC认证动物设施中，环境温度为22 °C，湿度为45%，并维持每日12小时光照/12小时黑暗的循环周期。小鼠置于通风笼架中，可自由摄取标准颗粒饲料（含60%碳水化合物、16%蛋白质和3%脂肪）。垫料和筑巢材料每周更换一次。本研究使用12周龄、体重在25 g至30 g之间的雄性C57BL/6J小鼠，动物来源于商业供应商（见材料表）。
1. 通过温度适应和药物刺激调节棕色脂肪组织的代谢活性
注意：通常采用数天至数周的温度适应，或使用β-肾上腺素能受体激动剂进行药物刺激，以调节棕色脂肪组织（BAT）的活性1。因此，下文提供了该方法的简要概述，以便读者根据需要选择合适的方法。为获得代谢不活跃（产热较低）的BAT，应选择C57BL/6J小鼠的热中性区基础温暖温度（28–30 °C）。该温度范围可确保小鼠无需额外消耗能量以维持恒定的体温。为获得代谢中度或高度活跃（产热）的BAT，可分别选择轻度低温（20–22 °C）或严重低温（6 °C）。本实验中，小鼠在22 °C的标准饲养条件下培育，该温度对小鼠而言虽属轻度低温，但未采用任何药物刺激。
<ol>
	<li>温度适应
	<ol>
		<li>在开始温度适应前至少一周，将小鼠单独或每笼1至2只进行分笼饲养。准备配备通风、温度和湿度控制系统的啮齿类动物培养箱，并设置所需的环境条件。</li>
		<li>根据所选的温度适应类型，在相应日期将小鼠笼转移至对应的啮齿类动物培养箱中。</li>
		<li>确保各组间小鼠数量分布均匀，每笼1或2只。优先选择单只饲养，因其对温度诱导的生理变化比群养更敏感43。各组具体饲养条件如下：
		<ol>
			<li>热中性（30 °C）组：将该组小鼠持续置于30 °C环境中，最长可达四周。</li>
			<li>重度寒冷组：初始时将该组小鼠饲养于18 °C环境中，不提供任何筑巢材料。随后每周逐步降低温度，至第四周达到6 °C。温度递减过程如下：18 °C → 14 °C → 10 °C → 6 °C。</li>
			<li>轻度寒冷组（20–22 °C）：将该组小鼠饲养于啮齿类动物培养箱中，条件与前述标准饲养条件相同。</li>
			<li>急性寒冷刺激：进行急性寒冷刺激时，每笼放置1–2只小鼠，不提供任何筑巢材料，并将其暴露于设定为6 °C的啮齿类动物培养箱中，最长8小时。 
			NOTE: 这些饲养条件和温度变化对于研究不同温度环境对棕色脂肪组织（BAT）活性和代谢的影响至关重要。</li>
		</ol>
		</li>
		<li>每周更换笼具并补充食物和水。在补充前至少24小时，将新笼具预先放置于相应温度的啮齿类动物培养箱中进行预适应。 
		NOTE: 为避免干扰适当的温度刺激，不应提供可能导致筑巢行为的小鼠环境丰富化物品。在重度寒冷条件下，小鼠为维持体温会消耗更多能量，导致食物摄入量增加和排泄率升高。因此，必须每周至少检查笼具两到三次（遵循当地机构指南），以确保小鼠有充足的食物和饮水供应，且笼具不会过度潮湿。此项监测对于保障实验期间小鼠的健康与福利至关重要。</li>
	</ol>
	</li>
	<li>使用β3-肾上腺素能受体激动剂CL316,243进行药理学刺激1
	<ol>
		<li>为最大化刺激效果，在注射前将小鼠预先饲养于热中性环境（30 °C）中2–4周。</li>
		<li>适应期结束后，通过腹腔注射给予1 mg/kg剂量的CL316,243。 
		&#8203;NOTE: 若需长期使用β3-肾上腺素能受体激动剂进行刺激（例如持续3天至数周1,44,45），由于药物稳定性限制，需每日注射。CL316,243稀释液应在注射当天配制，以保证其稳定性。</li>
	</ol>
	</li>
</ol>
2. 动静脉血液采样
注意：进行动静脉采血时，建议使用 12-14 周龄以上的小鼠。较年幼的小鼠其苏尔策静脉（Sulzer's vein）可能尚未充分发育，该血管是专门引流肩胛间棕色脂肪组织（BAT）静脉血的特定血管46。
<ol>
	<li>使用校准的挥发器，以3%异氟烷（在205 x 265 x 200 mm大小的诱导室中）进行诱导麻醉，以2%异氟烷（通过气体麻醉面罩）维持麻醉。 
	注意：整个动静脉采血操作应在麻醉后立即进行。麻醉期间可使用水加热垫以维持动物核心体温。 
	警告：异氟烷具有高度挥发性，吸入后有毒。因此，初始麻醉操作必须在通风橱内进行。</li>
	<li>通过检查动物的反射（如足爪回缩）来确认麻醉深度是否已达到适当水平。</li>
	<li>从苏尔策静脉（Sulzer's vein）采集静脉血
	<ol>
		<li>将小鼠摆成适当体位以暴露背部皮肤，在切口前通过脚趾夹捏法确认麻醉深度。用足量70%乙醇润湿背部皮肤，防止毛发脱落，并从胸下部沿背部向上至颈部做一纵向切口。 
		注意：肩胛间棕色脂肪组织（interscapular BAT）位于皮肤正下方，由两团脂肪垫组成，表面覆盖有薄层白色脂肪组织。需确保小鼠在整个过程中通过气体麻醉面罩持续维持麻醉状态。</li>
		<li>用弯头镊子轻轻提起肩胛间棕色脂肪组织，小心剪除附着组织（主要为肌肉组织）。将脂肪垫向上（朝向头部）提起，继续剪开周围附着组织，谨慎分离直至暴露苏尔策静脉（一条连接两侧肩胛间棕色脂肪组织的大型“Y”形深红色血管）。 
		注意：应避免剪断与肩胛间棕色脂肪组织前部及侧区相连的肌肉毛细血管，否则会显著减少从苏尔策静脉流出的血液量并影响其质量。</li>
		<li>小心剪断苏尔策静脉，使用底部切开的200 µL移液枪头和P100移液器收集约40 µL血液。将血液存入采血管中，并将管子置于冰上直至进行血清分离。 
		注意：应从苏尔策静脉“Y”形分叉点下方开始采血，以避免来自上腔静脉的血液污染47。采血量过多会削弱苏尔策静脉血液的特征性。因此，务必仅采集分析所需的最小血量。选择采血管时应谨慎，因为血清和血浆会产生不同的代谢物谱型48,49,50。若采集血浆，必须使用肝素涂层管。本实验中选用含凝血活化剂涂层的采血管以获取血清。严禁使用EDTA涂层管，因为EDTA会显著干扰质谱信号51,52。</li>
	</ol>
	</li>
	<li>从左心室采集动脉血
	<ol>
		<li>在不脱离鼻罩的情况下将小鼠翻转，暴露腹侧皮肤。在切口前通过脚趾夹捏法确认麻醉深度。用足量70%乙醇润湿腹侧皮肤，防止毛发脱落，然后用剪刀小心打开胸腔，暴露心脏，避免损伤任何内部结构。</li>
		<li>使用带有29 G（1/2&#34;）针头的1 mL注射器准确穿刺左心室心尖部位。将1/2''针头的三分之二插入至心尖右侧水平方向3-5 mm处（图1B），缓慢回抽注射器以从左心室采集血液（50–100 µL）。左心室血液为富含氧气的动脉血，呈鲜红色。将采集的血液存入采血管中，并将管子置于冰上直至进行血清分离。 
		注意：胸腔切口应尽可能小，以便接近心脏。过大的切口可能导致局部出血，进而引起低血压，影响从左心室采集的动脉血质量。避免旋转或翻转心脏，否则将难以准确定位左心室位置。</li>
		<li>根据当地机构指南，采用适当方法实施安乐死并确认其完成。例如，可通过颈椎脱位实施安乐死，并通过心跳停止确认死亡。</li>
	</ol>
	</li>
	<li>将血液样本在4 °C条件下以10,000 x g离心10分钟。使用移液器小心收集上清液。上清液成分取决于所用采血管类型，可能为血清或血浆。此时可暂停操作，将样本储存于-20 °C，待后续进行GC-MS分析前再处理血清。 
	&#8203;注意：若观察到上清液呈红色，可能已发生溶血。为避免溶血，应在血液凝固完成前对样本进行涡旋混匀。尽管大多数代谢物受溶血影响较小，但某些富集于红细胞的代谢物（如谷氨酰胺和乳酸）可能导致数据分析误判。建议在一周内完成血清/血浆的分析。</li>
</ol>
3. 血清代谢物提取与化学衍生化
<ol>
	<li>提取前准备 
	注意：所有方法，包括代谢物提取、衍生化和数据分析，均为先前描述方法的略微修改版本53,54。
	<ol>
		<li>通过将内标物DL-正缬氨酸（100 µM溶液，见材料表）加入质谱级甲醇中，制备提取缓冲液。</li>
		<li>确保所有实验操作均在冰上进行。</li>
	</ol>
	</li>
	<li>将从小鼠Sulzer静脉或左心室提取的10 µL血清转移至含有40 µL提取缓冲液的1.5 mL微量离心管中。</li>
	<li>为去除细胞碎片和蛋白质，短暂涡旋血清样品，随后在4 °C下以最大速度（18,000 × g）离心30分钟。</li>
	<li>离心后，小心转移40 µL上清液至玻璃小瓶中，并在4 °C下于真空离心浓缩仪中干燥3小时。 
	注意：由于后续衍生化步骤中使用的试剂会与塑料发生反应，建议使用玻璃插件（见材料表）而非塑料管。</li>
	<li>对干燥后的样品进行连续两次衍生化处理，用于血清代谢物的气相色谱-质谱（GC-MS）分析。 
	注意：由于所用溶剂具有刺激性，以下步骤应在通风橱中操作。
	<ol>
		<li>将干燥的血清提取物重悬于30 µL吡啶中含10 mg/mL盐酸甲氧胺（见材料表）的溶液中，在37 °C孵育30分钟。</li>
		<li>加入70 µL N-甲基-N-叔丁基二甲基硅烷三氟乙酰胺（MTBSTFA，见材料表），在70 °C下反应1小时，以实现代谢物的硅烷化衍生化。 
		&#8203;注意：由于衍生化溶剂会与塑料发生反应，后续步骤建议使用玻璃注射器而非塑料吸头。</li>
	</ol>
	</li>
</ol>
4. 采用气相色谱-质谱法进行代谢组学分析
注意：采用单四极杆气相色谱-质谱联用仪（见材料表）检测经衍生化处理的样本中来自苏尔泽静脉和左心室的多种血清代谢物，包括碳水化合物、氨基酸以及三羧酸循环中间产物。也可使用其他色谱柱，但实验条件（包括程序升温设置）可能因所用色谱柱类型不同而有所变化。
<ol>
	<li>将衍生化后的样品1 µL以不分流模式注入气相色谱仪，进样口温度为280 °C，载气为氦气，流速设定为1.500 mL/min。</li>
	<li>将四极杆温度设为200 °C，气相色谱-质谱接口温度设为300 °C。 
	注意：所有代谢物分析的程序升温起始温度为60 °C，保持1分钟，随后以10 °C/min的速率升温至320 °C。</li>
	<li>采用电子轰击电离（EI）方式采集数据，电离能量设为70 eV，以全扫描模式（50–550 m/z）获取样品数据53。本研究中使用的所有代谢物均通过标准品预先验证，以确认其质谱图和保留时间。</li>
	<li>使用 commercially available 分析软件进行峰面积积分（参见材料表）。</li>
	<li>将化合物与各TBMDS衍生物的产物离子进行匹配。然后，通过积分相应峰区域内碎片离子的m/z值获得提取离子色谱图（EIC），并导出结果。碎片离子信息见表1。 
	注意：每个化合物的EIC均以各样品中DL-正缬氨酸的EIC进行归一化处理。数据以Log2 Sulzer静脉至左心室比值（Log2(SV/LV)）表示，计算时采用各归一化后的EIC值。</li>
</ol>

Exploring Metabolite Exchange in Brown Adipose Tissue

作者声明不存在任何利益冲突需要报告。

理解棕色脂肪组织（BAT）在全身能量平衡中代谢潜力的关键步骤，是明确其消耗的营养物质种类、这些物质的代谢途径，以及释放到循环系统中的代谢产物。本方案介绍了一种专门的动静脉采样技术，可获取C57BL/6J小鼠肩胛间棕色脂肪组织的静脉血管及全身动脉血管，该技术由Park等42近期开发并验证。以下是执行该方案时需重点考虑的关键事项。
在进行产热刺激时，一个关键的考虑因素是为实验条件选择最合适的产热刺激类型。例如，在使用实验组时（与对照）并旨在观察棕色脂肪组织代谢适应能力（对其最大非颤抖性产热潜力至关重要）的差异时，适合采用长期冷适应或β-肾上腺素能受体刺激（持续时间超过3天至4周）1,45当棕色脂肪组织（BAT）暴露于急性冷刺激（数小时，少于24小时）时，其并不会发生代谢适应，而是消耗自身内在储存的燃料，并在代谢上与颤抖的肌肉进行交流，以实现最佳的产热效果1β...

棕色脂肪组织（BAT）具有一种独特的能量消耗特性，称为非颤抖性产热（NST），该过程涉及线粒体解偶联蛋白1（UCP1）依赖性和非依赖性机制1,2,3,4,5。这些独特特性表明，BAT在系统性代谢调控以及包括肥胖、2型糖尿病、心血管疾病和癌症恶病质在内的代谢性疾病发病机制中发挥重要作用6,7,8。近期的回顾性研究显示，在人类中，BAT的质量和/或其代谢活性与肥胖、高血糖及心脏代谢健康呈负相关9,10,11。
近年来，棕色脂肪组织（BAT）被认为是一种参与维持非颤抖性产热（NST）的代谢库，因其产热过程需要大量循环营养物质作为燃料6,7。此外，BAT能够生成并释放具有生物活性的因子，被称为棕色脂肪因子（brown adipokines）或BATokines，这些因子可作为内分泌和/或旁分泌信号，表明BAT积极参与机体系统水平的代谢稳态调节12,13,14,15。因此，深入了解BAT的营养物质代谢将有助于阐明其在人体中的病理生理学意义，超越其传统上作为体温调节器官的认知。
利用稳定同位素示踪剂的代谢组学研究，结合使用非代谢性放射性示踪剂的经典营养物质吸收研究，显著加深了我们对棕色脂肪组织（BAT）优先摄取哪些营养物质及其利用方式的理解16,17,18,19,20,21,22,23,24,25,26,27。例如，放射性示踪剂研究表明，寒冷激活的BAT可摄取葡萄糖、脂蛋白结合的脂肪酸以及支链氨基酸16,17,18,19,20,21,22,23,27。近年来，同位素示踪与代谢组学研究的结合使我们能够测量这些营养物质在组织和培养细胞内的代谢去向与通量24,25,26,28,29,30。然而，这些分析主要集中在营养物质的独立利用上，导致我们对BAT在器官间代谢物交换中的系统性作用仍知之甚少。关于BAT消耗的循环营养物质的具体序列，以及它们在碳和氮层面的定量贡献等问题，目前仍不明确。此外，探索BAT是否能够利用营养物质生成并释放代谢物衍生的BATokines（例如脂质因子，lipokines）才刚刚起步12,13,14,15,31,32。
动静脉血分析是一种经典的生理学方法，用于评估器官或组织对循环分子的特异性摄取或释放。该技术此前已被应用于大鼠肩胛间棕色脂肪组织（BAT），以测量氧气和多种代谢物，从而确立了BAT作为适应性产热主要部位及其分解代谢潜力的地位33,34,35,36,37。最近，一项利用大鼠肩胛间BAT进行的动静脉研究结合了跨组学方法，成功鉴定出由产热激活的BAT释放的 ранее未被发现的BATokines38。
近年来，高灵敏度气相色谱-质谱联用（GC-MS）和液相色谱-质谱联用（LC-MS）代谢组学技术的进步，重新激发了人们对动静脉研究在定量分析器官特异性代谢物交换方面的兴趣39,40,41。这些技术凭借高分辨能力和高质量精度，能够利用微量样品对多种代谢物进行全面分析。
随着这些技术进步，最近一项研究成功将动静脉代谢组学应用于小鼠水平的棕色脂肪组织（BAT）研究，从而能够在不同条件下对BAT中的代谢物交换活性进行定量分析42。本文介绍了一种以BAT为靶向、采用气相色谱-质谱法（GC-MS）在C57BL/6J小鼠模型中开展的动静脉代谢组学实验方案。

<table><tbody><tr><td>0.5-20 &amp;micro;L 滤芯吸头</td><td>Axygen</td><td>AX.TF-20-R-S</td><td></td></tr><tr><td>带针头的 1 mL 注射器 - 26 G 5/8&quot;</td><td>BD Biosciences</td><td>309597</td><td></td></tr><tr><td>Agilent 5977B 气相色谱/质谱仪（质量选择性检测器）</td><td>Agilent</td><td>G7077B</td><td></td></tr><tr><td>Agilent 7693A 自动进样器</td><td>Agilent</td><td>G4513A</td><td></td></tr><tr><td>Agilent 8890 气相色谱系统</td><td>Agilent</td><td>G3542A</td><td></td></tr><tr><td>Agilent J&amp;W 气相色谱柱（毛细管柱）HP-5MS UI</td><td>Agilent</td><td>19091S-433UI</td><td></td></tr><tr><td>Agilent MassHunter 工作站软件_质谱定量分析（Quant-My-way）</td><td>Agilent</td><td>G3335-90240</td><td></td></tr><tr><td>C57BL/6J 小鼠</td><td>DBL</td><td>C57BL/6JBomTac</td><td></td></tr><tr><td>CentriVap -50 &amp;deg;C 冷阱（带不锈钢盖）</td><td>LABCONCO&amp;nbsp;</td><td>7811041</td><td></td></tr><tr><td>DL-正缬氨酸</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>N7502-25G</td><td></td></tr><tr><td>Eppendorf 离心机 5430R</td><td>Eppendorf</td><td>5428000210</td><td></td></tr><tr><td>Eppendorf Safe-Lock 管 1.5 mL</td><td>Eppendorf</td><td>30120086</td><td></td></tr><tr><td>玻璃衬管 250 &amp;mu;L&amp;nbsp;</td><td>Agilent</td><td>5181-1270</td><td></td></tr><tr><td>甲醇（LC-MS 级）</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>Q34966-1L</td><td></td></tr><tr><td>甲氧胺盐酸盐</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>226904-5G</td><td></td></tr><tr><td>Microvette&amp;nbsp;200 血清管，200 &amp;micro;L，红色帽，平底</td><td>Sarstedt</td><td>20.1290.100</td><td></td></tr><tr><td>MTBSTFA</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>394882-100ML</td><td></td></tr><tr><td>吡啶（无水，99.8%）</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>270970-100ML</td><td></td></tr><tr><td>制冷式 CentriVap 完整真空浓缩仪</td><td>LABCONCO&amp;nbsp;</td><td>7310041</td><td></td></tr><tr><td>啮齿类动物饲料</td><td>SAFE</td><td>SAFE R+40-10</td><td></td></tr><tr><td>啮齿类动物培养箱</td><td>Power scientific</td><td>RIT33SD</td><td></td></tr><tr><td>超细笔式针头 - 29 G 1/2&quot;</td><td>BD Biosciences</td><td>328203</td><td></td></tr><tr><td>9 mm 瓶盖</td><td>Agilent</td><td>5190-9067</td><td></td></tr><tr><td>2 mL 棕色螺纹口小瓶</td><td>Agilent</td><td>5190-9063</td><td></td></tr><tr><td>2 mL 棕色螺纹口小瓶 + A2:C40</td><td>Axygen</td><td>PCR-02-C</td><td></td></tr></tbody></table>

动静脉代谢组学用于测量棕色脂肪组织中的体内代谢物交换

Arteriovenous Metabolomics to Measure In Vivo Metabolite Exchange in Brown Adipose Tissue

棕色脂肪组织（BAT）通过一种称为非颤抖性产热的独特能量消耗过程，在调节代谢稳态中发挥关键作用。为实现这一功能，BAT利用多种循环营养物质以满足其高代谢需求。此外，BAT分泌由代谢物衍生的生物活性因子，这些因子可作为代谢燃料或信号分子，介导BAT内部和/或组织间的通讯。这表明BAT主动参与全身性的代谢物交换，这一特性正逐渐受到关注。本文介绍一种 体内 小鼠水平优化的棕色脂肪组织动静脉代谢组学。该方案重点介绍产热刺激的相关方法，以及利用苏尔泽静脉进行动静脉采血的技术，该静脉选择性引流肩胛间棕色脂肪组织来源的静脉血和全身动脉血。随后展示了利用这些血液样本进行基于气相色谱的代谢组学分析的实验流程。通过测量棕色脂肪组织对代谢物的净摄取与释放，该技术的应用有望加深对棕色脂肪组织调控的器官间代谢物交换的理解。

图1 展示了经 BAT 优化的 AV 代谢组学实验方案。如实验方案部分所述，为获得差异性激活的棕色脂肪组织，小鼠需通过啮齿类动物培养箱进行温度适应，或接受药物干预，如 β-肾上腺素能受体激动剂。随后，对小鼠实施麻醉，并采集血液样本用于代谢组学分析图1A）。采集血液时，专门收集来自肩胛间棕色脂肪组织（BAT）的静脉血 通过 Sulzer静脉，而动脉血则直接从心脏的左心室采集（图1B).
图2展示了采用气相色谱-质谱法（GC-MS）进行血清代谢组学分析的示意图（图2）。简而言之，向血清样本中加入甲醇溶液，随后进行离心以去除血清蛋白。含有代谢物的上清液在真空浓缩仪（SpeedVac）中干燥，干燥后的样本经由两步衍生化反应处理，所用试剂分别为甲氧胺（MOX）和MTBSTFA（N...

本方案概述了在小鼠模型中利用气相色谱-质谱法（GC-MS）进行棕色脂肪组织优化的动静脉代谢组学研究的相关方法。这些方法有助于获取关于棕色脂肪组织介导的代谢物交换在整体机体水平上的宝贵信息。

棕色脂肪组织（BAT）通过一种称为非颤抖性产热的独特能量消耗过程，在调节代谢稳态中发挥关键作用……

我们的实验室致力于研究信号通路与代谢通路协同调控脂肪组织代谢和生理功能的机制。通过这一研究方向，我们旨在寻找预防或干预由能量失衡引起的代谢性疾病（如肥胖症和糖尿病）的方法。本实验方案的主要优势在于，我们已从传统的使用大鼠模型转变为采用小鼠模型进行动静脉采血及代谢组学分析。我们认为，这一转变将使我们能够利用黄金标准的遗传模型，更快速地验证在棕色脂肪研究中的发现。

arteriovenous-metabolomics-to-measure-vivo-metabolite-exchange-brown

Research

科研

JoVE Journal

Biochemistry

生物化学

动静脉代谢组学测量棕色脂肪组织 中的体内 代谢物交换

本文所述方法采用18F-氟代脱氧葡萄糖（18F-FDG）正电子发射断层扫描/计算机断层扫描（PET-CT）以及脂肪-水分离磁共振成像（MRI），在成年受试者分别暴露于热中性（24 °C）和寒冷（17...

通过正电子发射断层扫描/计算机断层扫描及配准磁共振图像自动分割的人类棕色脂肪组织库

利用免费的开源软件，我们开发了一种分析方法，通过18F-FDG...

使用18F-FDG PET/CT对活性人类棕色脂肪组织进行全身及局部定量分析

本技术描述了利用细胞外通量分析仪对小鼠离体视网膜组织的耗氧量和细胞外酸化速率进行实时记录的方法。...

利用细胞外通量分析法测量离体视网膜组织中的能量代谢

利用微型PET/MR成像方法对小鼠产热性脂肪组织库进行功能成像与定量分析。...

使用[18F]FDG微正电子发射断层扫描/磁共振成像对小鼠棕色和米色脂肪组织进行可视化与定量分析

本文描述了一种用于测量肥胖小鼠产热性脂肪细胞基础代谢率和氧化能力的实验方案。...

测定肥胖小鼠的基础能量消耗及产热型脂肪细胞的能量消耗能力

本文介绍了一种用于量化棕色脂肪组织（BAT）活性对人类代谢生理学意义的实验方案。该方法通过结合碳水化合物负荷、间接热量测定法以及锁骨上区域温度变化的测量来实现。这种新颖的方法有助于开发针对人类棕色脂肪组织产热作用的药物靶点。...

结合间接热量测定法、红外热成像和血糖水平检测来测量人体棕色脂肪组织产热活性

本文介绍了一种从人皮下脂肪组织中分离、培养和表型鉴定微血管内皮细胞（hSATMVECs）的实验方案。此外，还描述了一种hSATMVECs与脂肪细胞相互作用的实验模型。...

研究人类皮下脂肪组织中脂肪内皮细胞与脂肪细胞的相互作用

本文描述了如何筛选热稳定突变体、纯化人源5-羟色胺转运蛋白、制备高亲和力抗体，以及对结合抗抑郁药物...

人5-羟色胺转运蛋白与配体结合的热稳定化、表达、纯化及结晶 S西酞普兰

构象柔性在蛋白质功能中起着关键作用。本文介绍了将时间分辨电喷雾电离质谱与氢-氘交换相结合，用于研究有序和无序蛋白质中驱动功能的快速结构变化。...

时间分辨电喷雾电离氢氘交换质谱法用于研究蛋白质结构与动力学

本实验方案的目的是通过碱酶法水解鸡羽毛制备角蛋白水解物，并检测将角蛋白水解物添加至化妆品软膏基质中是否能够改善皮肤屏障功能（提高皮肤水合程度并减少经皮水分流失）。实验在男性和女性志愿者中进行。...

从鸡毛中制备角蛋白水解物及其在化妆品中的应用

了解棕色脂肪组织动静脉代谢组学方法，使用小鼠模型和GC-MS技术进行代谢物交换分析。该方案为研究能量平衡及肥胖、糖尿病等代谢疾病提供了可靠的实验手段。

动静脉代谢组学用于测量棕色脂肪组织中的体内代谢物交换

探索更多视频