2008年5月12日
我们提出了两个过程的三维细胞培养的微细多孔聚合物芯片。第一个是与溶剂蒸气的焊接工艺相结合的热压。第二个使用最近开发microthermoforming过程中,结合离子跟踪技术,导致生产的一个显着简化。
大家好,我叫 Stefan Re.我在生物界面研究所工作,在下面的文章中,您将看到一种称为 ship 的微结构支架的制造过程,我们正在使用两种不同的方法来生产这种芯片。目前,心形压花工艺与某些后续工艺和微热成型工艺相结合,这是最近在名为 Squi 的研究中心开发的,现在我们在一个无尘室帐篷里,您可以在右侧看到的是典型的真空加热装箱机,我们正在使用该设备制造微结构电池芯片。首先,我们引入了一种微结构模式。
它安装在这样的板中,你可以在这里看到两个模具。这个模具是通过微加工制造的,它是用呼吸制成的。现在,我将微结构模具安装到机器中。
对于热装箱工艺,我们使用像这里这样的聚合物板,通常我们使用聚碳酸酯或 PMA 来生产电池芯片。现在我们将聚合物板插入机器中,插入板的中心,关闭工具。关闭机器后,抽空腔室,然后是极模,或者将整个工具加热到成型温度,然后将温热的聚合物压入具有微观结构的模具中。
然后在这个成型程序之后,整个模具被冷却下来,我们在这台机器内有一个自动演示过程。您在这里看到的是这样一个模制电池芯片,其中包含模制零件、两个电池芯片和一个典型的残余层,这是热和总线工艺产生的。在热和总线步骤之后,零件的残留层必须变薄并最终完全消除。
因此,为此,零件被修剪,模具零件,然后冷冻在这个安装板上。安装后,我们将残余层铣削至零件的一定厚度,以便在背面打开微观结构网格。在研磨过程中,微型容器壁被冻结的水稳定。
最后,我们获得两个模制电池芯片,这些芯片带有独立的 MicroCon 容器网格,顶部两侧开放,底部我们进行粘合。然后在研磨过程之后,在这些开放的 MicroCon 容器阵列的背面形成多孔膜。我们正在将市售的多孔聚碳酸酯膜粘合到开孔飞船的背面,以获得微孔容器阵列。
为此,我们将薄聚合物轨道边缘膜插入该腔室。膜的厚度范围约为 10 微米,然后我们将细胞芯片放在这些膜的顶部。然后我们关闭这个腔,第一步将腔室抽空。
然后我们注入汽化溶剂以解决聚合物表面,通过对该堆栈施加力,膜被粘合到细胞船上。在最后一步中,对腔室进行评级,我们取出最终确定的细胞船。最近,我们开发了一种基于热成型工艺的 sechi 新制造技术,它适用于微尺度,因此我们称之为微热成型。
为了制造多孔 sechi,我们使用了用加速重离子照射的 polyfils。这是在 Unilog 的一家公司中完成的,这些重离子通过完全穿透聚合物薄膜在薄膜中产生拉丁轨迹。在热成型过程中,这些拉丁痕迹被保留并产生这些孔隙。
然后在成型过程之后,将这些拉丁轨道蚀刻到具有规定大小的孔隙中。在这里,您可以在右侧看到经过调整的机器。适用于这种微热成型工艺的热压花机。
该工具主要由上板和下板三部分组成。它们与用于气体压力和抽真空的连接器保持在一起,第三部分在这里,例如天花板。第一步,我们放入大约 50 到 100 微米和厚度范围内的薄膜。
然后我们关闭该工具,然后进行第二步。由这两个板建造的腔室和天花板被抽空。抽真空后,聚合物薄膜被压在这两块板之间,我们将其加热到成型温度。成形。
这里的温度在玻璃化转变温度的范围内,这意味着聚合物没有熔化,但聚合物处于白色弹性状态或橡胶弹性状态。在后续步骤中,我们施加气体压力。在这里,我们使用氮气作为气体,然后通过这种气体,橡胶弹性聚合物薄膜被拉伸到先前抽真空的微模具中。
在这个成型步骤之后,整个模具冷却并打开模具。最后,然后手动对微结构聚合物泡沫进行脱模。这种新工艺的优势在于,与标准的微型注塑成型工艺或热压花工艺相比,可以大大减少工艺步骤的数量。
在对重铁聚合物薄膜进行热成型后,我们将这些拉丁轨道选择性地蚀刻到具有规定尺寸的孔隙中。为此,我们使用了一个简单的玻璃扬声器设置,拉丁音轨用氢氧化钠蚀刻,轻轻转向并加热到大约 60 度的温度。茅草制作过程持续大约一到几个小时,并获得具有不同孔径的毛孔。
现在我们有了两个成品,热电池芯片和总线电池芯片,模制电池芯片背面有微孔膜。在我的左手里,热成型的薄壁柔性电池芯片。在我们将它们用于细胞培养之前,它们会通过胶质辐照进行清洁和消毒。
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本文讨论了用于三维细胞培养的多孔聚合物芯片的微加工技术。文中介绍了两种不同的方法:热压印结合溶剂蒸气焊接,以及一种与离子径迹技术相结合的新型微热成型工艺。
微加工的芯片级支架可实现可重复的三维细胞培养,为早期发现和临床前研究提供先进的体外模型。精确控制支架的几何结构和孔隙率可增强营养物质扩散和细胞活力,直接影响与疾病相关系统的预测可靠性。这些可扩展的制造方法使微结构支架成为生物制药研发中转化研究和高内涵筛选的基础工具。
微加工支架通过实现标准化的三维细胞培养平台,推动从靶点验证、筛选到转化研究的发现至临床前研究的连续进程。