Die Kombination Peripheral Nerve Grafting und Matrix Modulation der Verletzte Rat Spinal Cord Repair

Zusammenfassung

Traumatische Verletzungen des Rückenmarks stört die Kommunikation mit dem Gehirn. Zur Wiederherstellung verloren Konnektivität nutzen wir ein peripherer Nerv Transplantat zu einem Substrat zur Regeneration von Fasern in Kombination bieten mit neurotrophen Faktoren und Matrix-modulierenden Enzyme hemmenden Moleküle zu entfernen, um Langstrecken-Wachstum zu fördern.

Zusammenfassung

Traumatische Verletzungen des Rückenmarks (SCI) führt zum Tod von Nervenzellen, Störungen der motorischen und sensorischen Nervenfaser (Axon) Wege und Störung der Kommunikation mit dem Gehirn. Eines der Ziele unserer Forschung ist es, Axonregeneration zu fördern, um die Verbindung über die Läsion Website wiederherstellen. Um dies zu erreichen haben wir ein peripherer Nerv (PN) Pfropfen Technik, bei der Segmente der Ischiasnerv entweder platziert werden direkt zwischen dem beschädigten Enden des Rückenmarks oder werden verwendet, um eine Brücke über die Läsion zu bilden. Es gibt mehrere Vorteile dieses Ansatzes im Vergleich zur Transplantation anderer Nervengewebe; regenerierenden Axone kann auf ein bestimmtes Zielgebiet gerichtet sein, die Anzahl und die Quelle der Regeneration von Axonen leicht durch Tracing-Techniken bestimmt wird, kann das Transplantat für elektrophysiologische Experimente verwendet werden, um zu messen funktionelle Erholung mit Axone im Transplantat assoziiert, und es ist möglich, eine autologe Nervenzellen benutzen, um die Möglichkeit der Abstoßung des Transplantats zu reduzieren. In unserem Labor haben wir sowohl autologe (Spender und Empfänger die gleiche Tier) und heterologe (Spender und Empfänger sind verschiedene Tiere) Transplantate mit vergleichbaren Ergebnissen durchgeführt. Dieser Ansatz wurde bereits erfolgreich bei akuten und chronischen Verletzungen Situationen verwendet. Regenerierte Axone, dass das distale Ende des PN Transplantat erreichen oft nicht reichen zurück in das Rückenmark, so verwenden wir Mikroinjektionen von Chondroitinase zu hemmenden Moleküle mit dem Narbengewebe rund um den Bereich des SCI verbundenen degradieren. Zur gleichen Zeit haben wir festgestellt, dass die Bereitstellung von exogenen Wachstums-und trophischen Molekülen fördert längere Strecke axonalen Nachwachsen in das Rückenmark. Mehrere Monate nach der Transplantation führen wir eine Vielzahl von anatomischen, Verhaltens-und elektrophysiologische Untersuchungen zur Wiederherstellung der Funktion in unserem Rückenmark verletzte Tiere zu bewerten. Dieser experimentelle Ansatz wurde bereits erfolgreich in mehreren Verletzungen des Rückenmarks Modelle verwendet, auf verschiedenen Ebenen von Verletzungen und in verschiedenen Spezies (Maus, Ratte und Katze). Wichtig ist, dass die peripheren Nerven Pfropfen Ansatz wirksam fördern die Regeneration von akuten und chronisch verletzten Neuronen.

Protokoll

1) Vorbereitung für die mikroskopische Chirurgie

1. Die chirurgischen Station muss sauber und hygienisch mit einer verdünnten Bleiche-Lösung vor von Instrumenten und Zubehör Materialien. Instruments wird autoklaviert 1 Tag vor der Operation werden und in einem sterilen Behälter. Schalten Sie den Hot Bead-Sterilisator (Fine Science Tools) eingesetzt, um Krankheitserreger und mikrobielle Verunreinigungen von Instrumenten zwischen Prozeduren auf verschiedene Tiere zu entfernen.
2. Stecken Sie in der Wärmedämmschicht verwendet werden, um die Körpertemperatur während der Operation zu erhalten. Set aus Wattestäbchen und Gazekompressen verwendet, um Blutungen....

Diskussion

1. Für die Reproduzierbarkeit der Experimente ist es wichtig, dass das Niveau der Verletzung des Rückenmarks im Einklang von Tier zu Tier. Daher ist es wichtig, dass die entsprechenden Wirbelkörper Verfahren zur Laminektomie identifiziert werden. Da wir mit einer halbseitiger oder Durchtrennung Läsion Modell für diese Studie sind, gibt es keine Unklarheit über die Größe der Läsion oder ob bestimmte Rückenmarksbahnen wurden verletzt oder nicht verschont.
2. Es ist notwendig, dass die peripheren Nerven vor der Transplantation vor deg.......

Materialien

Liste der in diesem Artikel verwendeten Materialien

Name	Unternehmen	Katalognummer	Kommentare
10-0-Seidennaht	ArosSurgical	T5A10N10
6-0-Seidennaht	McKesson	2693
Ampicillin	McKesson	483549
Antikörper gegen cFos	Sigma-Aldrich	F7799
biotinyliertes Dextranamin	Invitrogen	D7135
Buprenorphin (.3 mg/ml)	McKesson	12496075701
Chondroitinase ABC	Associates of Cape Cod	100332-1A
Euthasol	Webster Veterinary	07-805-9296
Hanks gepufferte Salzlösung	Cellgro	21-021-CV
Isofluran	Henry Schein	209-1966
Michel-Wundklammern	Feinwerktechnik	12040-02
Neurotrace-Kit	Invitrogen	N7167
True Blue	Sigma-Aldrich	T5891
Xenodine	Webster Veterinary	92201
Heißperlen-Sterilisator	Feinwerktechnik
Zwangs-Laufrad	Lafayette Instruments
TreadScan-System	Clever System
Infinite-Horizon-Impaktvorrichtung	Precision Systems and Instrumentation
Magnetstimulationsgerät	Magstim