Dextransulfat-Natrium (DSS) im Trinkwasser verabreicht wird eine etablierte murine entzündlichen Verletzungen Modell der akuten Colitis. Dieses Protokoll beschreibt die Methode für die DSS-Behandlung und der Aufbereitung der Gewebe.
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Methodenartikel
Murine Colitis Modeling mit Dextransulfat Sodium (DSS)
In diesem Artikel
Zusammenfassung
Zusammenfassung
- Morbus Crohn Colitis vor allem Colitis ulcerosa und die Kolon-Variante des Morbus Crohn, Colitis können von viralen oder bakteriellen Infektionen, ischämischen Insult oder Autoimmunerkrankungen auftreten. Akute Kolitis kann mit Bauchschmerzen und Blähungen, Malabsorption, Durchfall, Hämatochezie und Schleim im Stuhl zu präsentieren. Wir sind dabei, die komplexen Wechselwirkungen zwischen Umwelt, Genetik und epithelialen Barriere Dysfunktion bei chronisch entzündlichen Darmerkrankungen und Tiermodellen der Colitis wurden wesentliche Fortschritte in unserem Verständnis dieser Krankheit zu verstehen. Ein beliebtes Modell beinhaltet Ergänzung des Trinkwassers von Mäusen mit niedermolekularen Dextran Natriumsulfat (DSS), die sich in epithelialen Schäden und eine robuste entzündliche Reaktion in den Dickdarm mehrtägigen
Protokoll
Teil 1: Injury-Repair Colitis Modell
- Baseline Gewicht sollte für jede Maus vor Beginn der DSS-Behandlung erzielt werden.
- Für eine 3% (w / v) Dextransulfat Natriumsalz-Lösung in Wasser und Filter mit einem 0,45 um Celluloseacetat-Filter.
- Ersetzen Sie Trinkwasser in der Maus Käfig mit 3% DSS-Lösung für 4 Tage. Die Mäuse sollten keinen Zugang zu einer anderen Quelle von Wasser (dh Ausschluss Tipps automatisierte Bewässerungssysteme angelegt).
- Am vierten Tag, ersetzen Sie die DSS-Lösung mit Wasser für weitere drei Tage, so dass einige Kolon Epithelzellen Erholung. Die Mäuse sollten am vierten Tag gewogen werden, um systemische Aus....
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Diskussion
Dieses Protokoll kann geändert werden, um akute Verletzungen, Verletzungen zu reparieren, oder chronische Dickdarm-Verletzung Prozesse zu modellieren.
Akute Verletzungen Änderung:
DSS-Behandlung ad lib für 4-6 Tage durch sofortige Opfer gefolgt
Injury-Repair Änderung:
Injury mit 4-6 Tagen DSS Behandlung durch Erholungsphase von 3-4 Tagen und Opfer (wie in oben beschriebenen Protokoll) gefolgt.
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Offenlegungen
Tierversuche wurden in Übereinstimmung mit den Richtlinien und Vorschriften her von Vanderbilt IACUC gesetzt durchgeführt.
Danksagungen
Eine Förderung von NIH (1 K08 DK080221-01) und Vanderbilt institutionellen Fonds für die Entwicklung.
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Materialien
| Name | Unternehmen | Katalognummer | Kommentare |
|---|---|---|---|
| Dextran-Sulfat-Natriumsalz | USB Corp., Affymetrix | 9011-18-1 | molares Gewicht 40.000–50.000 |
| 10 % gepuffertes Formalinphosphat | Fisher Scientific | SF100-4 | |
| Isofluran, USP | Phoenix Pharmaceuticals, Inc. | NDC 57319-474-06 | |
| TISSUE PATH Macrosette-Kassetten | Fisher Scientific | 15182706 | |
| BD 10-ml-Spritze | BD Biosciences | 309604 | |
| Äthylalkohol | Pharmco-AAPER | E190 | Mit destilliertem Wasser auf 70 % verdünnen |
| 20G-gerades Fütterungs-Needle | VWR international | 20068-612 | |
| 27G1/2 PrecisionGlide-Nadel | BD Biosciences | 305109 | |
| Präzisionsscheren, scharfe/stumpfe Spitze | VWR international | 82027-588 | |
| Waugh-Stopfer | VWR international | 82027-428 | |
| Nicht resorbierbare Naht | LOOK Surgical | SP116 | |
| Whatman-Blottingpapier | VWR international | 28298-020 | Nach Bedarf zuschneiden |
| Nalgene-Surfactant-freier Celluloseacetat-(SFCA)-Filter | Cole-Parmer | EW-06731-2 | |
| Digitaler Messschieber aus Kohlefaserverbund | Fisher Scientific | 15-007-958 |
Referenzen
- Okayasu, I. A novel method in the induction of reliable experimental acute and chronic ulcerative colitis in mice. Gastroenterology. 98 (3), 694-702 (1990).
- Martinez, J. A. Deletion of Mtgr1 sensitizes the colonic e....
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Nachdrucke und Genehmigungen
