Die Messung der 50% Hämolytische Complement (CH 50) Aktivität von Serum

Zusammenfassung

Der klassische Weg wird durch Antikörper aktiviert und gipfelt in Ziel-Zell-Lyse. Die CH ₅₀ Test liefert ein Maß für die Komplement-Aktivität einer Serumprobe. Dieses Video zeigt die Schritte bei der Bestimmung der CH beteiligt ₅₀ Einer Serumprobe, die Berechnungen und Interpretation der Ergebnisse.

Zusammenfassung

Das Komplementsystem ist eine Gruppe von Proteinen, die bei Aktivierung führen zu Zelllyse Ziel und erleichtert die Phagozytose durch Opsonisierung. Individuelle Komplement-Komponenten quantifiziert Dies bedeutet jedoch keine Auskunft über die Aktivität der Weg sein. Die CH

Protokoll

Vorbereitung von 5x Veronal Buffered Saline (VBS)

1. Zur Vorbereitung der Veronal-gepufferte Kochsalzlösung (VBS), müssen drei separate Lösungen vorbereitet werden.
2. Bereiten Sie die Lösung 1 durch Auflösen 21.25gm von NaCl und 0.94gm von Sodium barbiturathaltiges Mittel in 350ml destilliertem Wasser. Die Endkonzentrationen von NaCl und Natrium barbiturathaltiges Mittel sind 1,02 M und 13mm bzw..
3. Bereiten Sie die Lösung 2 durch Lösen 1.44gm von barbiturathaltiges Mittel in 125ml destilliertem Wasser heiß. Die Endkonzentration der barbiturathaltiges Mittel ist 62.5mm.
4. Bereiten Lösung 3 durch Auflösen 20.33gm von MgCl ₂ u....

Diskussion

Die CH _50-Test unterliegt vielen Störungen. Einige SRBC sind empfindlicher als andere, was zu spontanen Hämolyse, die nicht mit Aktivitäten zu ergänzen ist. Die Affinität der Kaninchen-Antikörper variiert von Charge zu Charge und von einem Hersteller zum anderen, dies beeinflusst die Höhe des Antikörper, der an der SRBC bindet. Auch der Prozess der Sensibilisierung SRBC mit Antikörper Ergebnisse in Zellen mit unterschiedlichen Mengen der Antikörper-Beschichtung der SRBC. Gewinnung und Lagerung sind ein wichti.......

Materialien

Liste der in diesem Artikel verwendeten Materialien

Name	Unternehmen	Katalognummer	Kommentare
Schafe rote Blutkörperchen	CSL	2490201	1 % endgültige Konzentration verwenden
Serum			Menschliches Serum
Kaninchen-Anti-Schaf-hämolytisches Serum (RBCs), unkonjugiert	AbD Serotec	C12HSB
96-Loch-Platte mit flachem Boden	Sarstedt Ltd	83.1839
Veronalpufferlösung			1x endgültige Konzentration verwenden
Wasserbad
Plattenreader
37°C Raum/Inkubator