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Methodenartikel
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30. April 2023
Quelle: Davies, A. G. et al. Ein Assay zur Messung der Auswirkungen von Ethanol auf die Fortbewegungsgeschwindigkeit von Caenorhabditis elegans.J. Vis. Exp.(2015).
Dieses Video beschreibt die Verwendung von Video- und Tracking-Software zur Aufzeichnung von Wurmbewegungen in einer Arena. Das Beispielprotokoll misst die Wirkung der Ethanolexposition auf die Fortbewegung von Würmern.
Das folgende Protokoll ist ein Auszug aus Davies et al., Ein Assay zur Messung der Auswirkungen von Ethanol auf die Fortbewegungsgeschwindigkeit von Caenorhabditis elegans, J. Vis. Exp. (2015).
Schritte, die am Tag vor dem Assay durchzuführen sind
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| Name | Unternehmen | Katalognummer | Kommentare |
|---|---|---|---|
| C. elegans stämmt | Caenorhabditis Genetics Center | ||
| 60 x 15 mm Petriplatten, dreifach belüftet | Greiner Bio-One | 628161 | Andere Tellermarken reichen aus. |
| NGM Agar | verschieden | NaCl (3 g/L), Agar (17 g/L), Pepton (2,5 g/L), 1 ml Cholesterin (5 mg/ml in Ethanol), 1 ml (1 M) MgSO4, 1 ml (1 M) CaCl2, 25 ml (1 M) KPO4, pH=6, 975 ml H2O | |
| Pinzette | verschieden | z.B. Fisher Scientific #10300 | |
| 37 °C Inkubator | verschieden | Zum Trocknen von Agar | |
| Kupferringe | Klempnermeister | STK#35583 (Dichtung mit 48 Kappengewinden) | 1,6 cm Innendurchmesser, 1,8 cm Außendurchmesser Kupferringe |
| 100% Ethanol | verschieden | ||
| Parafilm M | Bemis | PM996 | |
| CCD-Kamera | QImaging | RET-4000R-F-M-12 | Diese Kamera hat ein großes Sichtfeld. |
| Stereomikroskop mit C-Mount und 0,5X Objektiv | Leica | MZ6 | Auslaufmodell, M60 ist das aktuelle Äquivalent. |
| Lichtquelle | Schott | Nr. A08923 | 3" x3" Hintergrundbeleuchtung für gleichmäßige Ausleuchtung über das gesamte Sichtfeld |
| Bildgebungs- und Tracking-Software | Medienkybernetik | ImagePro-Plus v6.0-6.3 | Neuere Versionen der Software verfügen über Tracking-Funktionen. |
