1. Geführte Kultur<ol><li>Salmonella-spp . PCR-positive Probe<ol style='list-style-type:decimal;'><li>Selektive Kultur im Medium<ol style='list-style-type:decimal;'><li>Geben Sie 100 μL Voranreicherungskultur in 5 ml Selenit-Cystinmedium in einem Reagenzglas ein. Inkubieren Sie bei 36 °C für 18–24 Stunden in einem Inkubator.</li></ol></li><li>Kultur auf einer Platte trennen<ol style='list-style-type:decimal;'><li>Sammeln Sie eine Schleife der Kultur mit einer Mikro-Schleife und verteilen Sie sie auf einer XLD-Platte oder einer Salmonella-chromogenen Agarplatte. Inkubieren Sie bei 36 °C für 18–24 Stunden in einem Inkubator.</li></ol></li></ol></li></ol>

<figure class='table'><table class='ck-table-resized'><colgroup><col style='width:25%;'><col style='width:25%;'><col style='width:25%;'><col style='width:25%;'></colgroup><tbody><tr><td>Selenit-Cystinmedium</td><td>LandBridge</td><td>CM225</td><td> </td></tr><tr><td>XLD</td><td>LandBridge</td><td>CM219</td><td> </td></tr><tr><td>Salmonella-chromogener Agar</td><td>CHROMagar</td><td>SA130</td><td> </td></tr><tr><td>Mikroschleife</td><td>Weierkang</td><td>W511</td><td> </td></tr><tr><td>Brutkasten</td><td>Jinghong</td><td>DNP-9082</td><td> </td></tr></tbody></table></figure>

selektive anreicherung und identifikation von salmonellenarten mit xyloselysin-desoxycholat und chromogenem agar

Quelle: <a href='https://app.jove.com/v/58200/a-high-throughput-platform-for-screening-salmonella-sppshigella'>Yang, Z., et al. Eine Hochdurchsatzplattform für die Screening von Salmonella-Arten /Shigella-Arten . J. Vis. Exp. (2018)</a>Dieses Video demonstriert die selektive Anreicherung und Identifikation von Salmonellen mit Xyloselysin-Desoxycholat (XLD) und chromogenem Agar. Selenitbrühe fördert das Wachstum von Salmonellen , während XLD-Agar durch die Produktion von Schwefelwasserstoff schwarzzentrierte Kolonien offenbart. Chromogener Agar bestätigt die Identität durch enzymvermittelte Pigmentbildung, was eine Artenidentifikation ermöglicht.

Selektive Anreicherung und Identifikation von Salmonellenarten mit Xyloselysin-Desoxycholat und chromogenem Agar

Source: Yang, Z., et al. A High-throughput Platform for the Screening of Salmonella spp./Shigella spp.. J. Vis. Exp. (2018)This video demonstrates the ...

Inokulieren Sie eine Kultur, die sowohl Salmonellen - als auch Nicht-Salmonellenarten enthält, in ein Selenit-Cystinmedium und inkubieren.Selenit hemmt das Wachstum selenempfindlicher Bakterien, indem es deren Stoffwechselprozesse stört.Selentolerante Bakterien, einschließlich Salmonellen, können jedoch Selenit metabolisieren und wachsen.Die Kultur auf Xyloselysin-Desoxycholat oder XLD-Agar streichen und inkubieren.Salmonellen reduziert Natriumthiosulfat im XLD-Agar zu Schwefelwasserstoff, das mit Eisenionen im Medium reagiert und schwarzes Eisensulfid bildet, wodurch Kolonien mit schwarzen Zentren entstehen.Im Gegensatz dazu bilden Nicht-Salmonellen-Arten , die kein Schwefelwasserstoff produzieren, Kolonien ohne schwarze Zentren, was eine visuelle Unterscheidung von Salmonellen ermöglicht.Wählen Sie eine schwarz zentrierte Kolonie aus und streifen Sie sie auf Salmonella-chromogenes Agar für eine erhöhte Spezifität.Chromogener Agar enthält salmonellenspezifische Enzymsubstrate, die mit Chromophoren verknüpft sind.Salmonellenenzyme spalten diese Substrate, setzen die Chromophoren frei und bilden pigmentierte Kolonien.Wählen Sie diese Kolonien zur weiteren Analyse aus.Fügen Sie 100 Mikroliter der Voranreicherungskultur zu fünf Millilitern Selenitkristallmedium hinzu. Anschließend wird die Kultur bei 36 Grad Celsius für 18 bis 24 Stunden inkubiert. Als Nächstes sammeln Sie eine Schleife der Kultur und verteilen Sie sie auf einem Teller.Dann wird die Platte bei 36 Grad Celsius für 18 bis 24 Stunden inkubiert. Nach der Brutzeit wählen Sie verdächtige Kolonien aus und übertragen Sie sie auf eine Platte. Inkubieren Sie die Platte bei 36 Grad Celsius für 18 bis 24 Stunden.

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Research

Forschung

JoVE Encyclopedia of Experiments

Microbiology

Mikrobiologie

Bacterial Growth and Techniques

Bakterienwachstum und Techniken

Cultivation and Growth Techniques

Anbau- und Wachstumstechniken

Selective Enrichment and Identification of Salmonella spp. Using Xylose Lysine Deoxycholate and Chromogenic Agar

648 Aufrufe. Inokulieren Sie eine Kultur, die sowohl Salmonellen - als auch Nicht-Salmonellenarten enthält, in ein Selenit-Cystinmedium und inkubieren.Selenit hemmt das Wachstum selenempfindlicher Bakterien, indem es deren Stoffwechselprozesse stört.Selentolerante Bakterien, einschließlich Salmonellen, können jedoch Selenit metabolisieren und wachsen.Die Kultur auf Xyloselysin-Desoxycholat oder XLD-Agar streichen und inkubieren.Salmonellen reduzi...

Selektive Anreicherung und Identifikation von Salmonellenarten mit Xyloselysin-Desoxycholat und chromogenem Agar

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Name	Unternehmen	Katalognummer
Selenit-Cystinmedium	LandBridge	CM225
XLD	LandBridge	CM219
Salmonella-chromogener Agar	CHROMagar	SA130
Mikroschleife	Weierkang	W511
Brutkasten	Jinghong	DNP-9082