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1. Messung der Adhäsion mit lebensfähigen Zellzählungen
- Bestimmen Sie die Anzahl der lebensfähigen Bakterien, die an Pflanzen gebunden sind, die im Sand wachsen
- Nimm die Pflanze aus dem Behälter und sand. Um Pflanzen aus Behältern zu entfernen, entfernen Sie zuerst das Dichtungsmaterial an der Ober- und Unterseite des Behälters. Stellen Sie den Behälter auf ein Stück steriles Papier, entfernen Sie vorsichtig den gesamten Sand oder die Erde und pflanzen Sie den Behälter als einen großen, konisch zulaufenden Zylinder, indem Sie den Behälter sanft gegen eine Oberfläche stoßen, um das Material zu lockern.
1. Falls nötig, verwenden Sie einen Pfannenwender oder eine Stange, um das Material um die Kanten zu lockern, die durch den Boden des Behälters führen.
- Wenn der Sand- oder Erdezylinder mit der Pflanze frei auf dem Papier ist, spalten Sie ihn in der Mitte auf, um die Pflanzenwurzel freizulegen. Wenn gewünscht, entnehmen Sie Sandproben sowohl nahe dem Rand des Behälters als auch nahe der Wurzel. Dies kann nützlich sein, um die Ausbreitung (sowie die Ansammlung und das Wachstum) der Bakterien zu bestimmen.
- Messen Sie die Länge der Wurzel. Heben Sie die Wurzel auf und entfernen Sie den Sand und die Bakterien, die lose an der Wurzel haften (dem Rhizosphärenmaterial), indem Sie die Wurzel in ein gemessenes Volumen Wasser oder einen Puffer tauchen und sie sanft schütteln. Bestimmen Sie die lebensfähige Zellzahl der Bakterien in der resultierenden Suspension durch Beschichtung auf einem geeigneten Medium wie Luria-agar. Dies stellt die Anzahl der Bakterien dar, die lose mit der Wurzel verbunden sind.
- Entfernen Sie die fest gebundenen Bakterien durch Sonikation und bestimmen Sie ihre Anzahl.