Herstellung eines adjuvanten Nanoemulsionsimpfstoffs

Zusammenfassung

Quelle: Zhang, Z. et al., Preparation, Characteristics, Toxicity, and Efficacy Evaluation of the Nasal Self-Assembled Nanoemulsion Tumor Vaccine In Vitro und In Vivo.J. Vis. Exp. (2022)

Dieses Video zeigt die Herstellung von Nanoemulsions-Tumorimpfstoffen. Die stabilen Ölreservoir-Depots, die synthetische Peptide und Adjuvantien enthalten, werden durch niederenergetische Nanoemulsionen hergestellt, was für die Tumorimmuntherapie vielversprechend ist.

Protokoll

>1. Vorbereitung der I-OVA NE

1. Mischen Sie 1 mg Monophosphoryllipid A (MPLA) mit 100 μl Dimethylsulfoxid (DMSO), ziehen Sie es 5 Minuten lang vor und lassen Sie es 4 h bei Raumtemperatur (RT) stehen, um sich vollständig aufzulösen.
2. Tween 80 und IKVAV-OVA_257-264 (I-OVA) quantitativ zugeben und mischen.
   Anmerkung: Tween 80 und I-OVA wurden mit einem Massenverhältnis von 25:1 gemischt.
3. Squalen in die in Schritt 1.2 zubereitete Mischung geben (7:3, Smix: Squalen).
4. 100 μl MPLA-Lösung (10 mg/ml) werden zu der in Schritt 1.3 hergestellten Mischung gegeben.
5. Bereiten Sie den Nanoemulsionsimpfstoff mit niederenergetischen Emulgiermethoden vor: Geben Sie die gemischte Lösung mit etwa 70 % des Gesamtvolumens zu Wassertröpfchen und rühren Sie vorsichtig um, um eine transparente und leicht fließende Mischung zu erhalten.
   Anmerkung: Die BNE-Kontrolle (Blindemulsion) wurde nach dem gleichen Verfahren hergestellt, wobei Wasser durch I-OVA ersetzt wurde.

Materialien

Liste der in diesem Artikel verwendeten Materialien

Name	Unternehmen	Katalognummer	Kommentare
MPLA	Invivogen Lit. Co.	tlrl-mpla
OVA257–264	Shanghai Botai Verifizierter Lieferant - Biotechnologie Co., Ltd.	Na
Konjugation von IKVAV-PA mit synthetischem Peptid (I-OVA)	Shanghai Botai Verifizierter Lieferant - Biotechnologie Co., Ltd.	Na