Dieses Video zeigt die Visualisierung des zerebralen Thrombus bei Mäusen mittels Mikro-Computertomographie (Mikro-CT). Einem zerebralen Thrombus-Mausmodell werden Fibrin-gezielte Goldnanopartikel injiziert, die als Kontrastmittel wirken. Die Maus wird auf dem Bett eines Mikro-CT-Geräts platziert, und die Bilder werden aus mehreren Blickwinkeln aufgenommen. Mit Hilfe einer entsprechenden Software werden die Bilder rekonstruiert und verarbeitet.
Alle Verfahren, an denen Tiermodelle beteiligt sind, wurden vom örtlichen institutionellen Tierpflegeausschuss und dem Tierprüfungsausschuss von JoVE überprüft.
1. Herstellung eines exogen gebildeten Gerinnsels, markiert mit Fluoreszenzmarker (Abbildung 1)
Anästhesie einer Maus in einer Induktionskammer mit 3 % Isofluran, gemischt mit 30 % Sauerstoff (1,5 l/min, 100 % Sauerstoff). Stellen Sie eine angemessene Anästhesietiefe sicher, indem Sie den Muskeltonus beobachten und das Fehlen des Zehenkneifreflexes bestätigen.
Legen Sie das Tier in Bauchlage auf ein steriles Tuch und halten Sie es unter Narkose mit einer Inhalationsmaske und 2 % Isoflura....
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Abbildung 1: Überblick über die Präparation von fluoreszenzmarkierten Blutgerinnseln. (A) Mischen von frischem Vollblut mit einer Cy5.5-Nahinfrarot-Fluoreszenzsonde (NIRF) (C15), die durch die fibrinvernetzende enzymatische Wirkung des aktiv.......
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Materials
List of materials used in this article
Name
Company
Catalog Number
Comments
Maschinen
microCT
NanoFocusRay, JeonJu, Korea
NFR Polaris-G90
Laser-Doppler-Durchflussmessgerät
Perimed, Stockholm, Schweden
PeriFlux System 5000
Operationsmikroskop
Leica Microsystems, Seoul, Korea
EZ4HD
Inhalations-Anästhesiegerät
PerkinElmer, Massachusetts, USA
XGI-8
Software
NFR-Steuerung
NanoFocusRay, JeonJu, Korea
NFR Polaris-G90
microCT-Steuerungssoftware
Lucion
Infinitt, Seoul, Korea
Lucion
3D-Rendering-Imaging-Software
Labordiagramm 7
ADInstruments, Colorado, USA
Labordiagramm 7
rCBF
Image J Software
Wanye Rasband, NIH, USA
1.49d
bildgebende Analyse
Geräte/Instrumente
Infusionspumpe
Harvard, Massachusetts, USA
Pumpe 22( 55-2226)
Homöotherme Decke
Panlab, Barcelona, Spanien
HB101
Taschenkauter
Daejong, Seoul, Korea
DJE-39
Gehirnmatratze
Ted pella, CA, USA
15003
koronaler Abschnitt
PE-50 Schlauch
Natsume, Tokio, Japan
SP-45(PE-50)
I.D. 0,58 mm AD 0,96 mm
PE-10 Schlauch
Natsume, Tokio, Japan
SP-10(PE-10)
ID 0,28 mm Außendurchmesser 0,61 mm
30 Gauge Nadel
Sungshim-medical, Seoul, Korea
Spritze
CPL-medical, Ansan, Korea
1 & 3 cc
Gaze
Panamedic, Cheonan, Korea
Tape
Scotch, Seoul, Korea
3M-810
Micro Pinzette
Fine Science Tools, Vancouver, Kanada
11253-27
Dumont #L5
Mikroschere
Fine Science Tools, Vancouver, Kanada
15000-03
Vannas
Federschere
Fine Science Tools, Vancouver, Kanada
14084-08
8,5 cm
Naht aus schwarzer Seide
Ailee, Busan, Korea
SK6071, SK728
6-0 und 7-0
Reagenzien
Meloxicam
Yuhan, Seoul, Korea
Tierarztsalbe
Novartis, Basel, Schweiz
10% Povidon-Jod (Betadin)
Firson, Cheon-an, Korea
Eisenchlorid
Sigma, Missouri, Vereinigte Staaten
157740-5G
TTC
Amresco, Ohio, USA
0765-100g
Isofluran
Hana-Pham, Gyeonggi, Korea
Ifran
100 mL
PBS
Welgene, Daegu, Korea
LB001-02
500 mL
Goldnanopartikel
Synthese
Normale Kochsalzlösung
Daihan Pham, Seoul, Korea
48N3AF3
20 mL
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