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Fluoreszenz in situ Hybridisierung (FISH) ist eine Technik, die spezifische DNA-Sequenzen auf Metaphase oder Interphase-Chromosomen in Zelle Kerne 1 nachgewiesen werden können. Die Technik verwendet DNA-Sonden mit einzigartigen Sequenzen, die auf ganzer Chromosomen oder spezifische chromosomale Regionen hybridisieren, und dient als leistungsfähige Ergänzung zur klassischen Zytogenetik. So berichteten viele frühere Studien der häufige Nachweis von erhöhten Chromosomenaberrationen bei Leukämie-Patienten mit Benzol-Exposition, Benzol-Vergiftung Patienten und gesunde Arbeitnehmer, die Benzol verwandt mit klassischen zytogenetischen Analyse 2. Mit FISH, haben Leukämie-spezifische chromosomale Veränderungen beobachtet worden, um in scheinbar gesunden Arbeitnehmer, die Benzol 3-6 erhöht sein, was auf die kritische Rolle von cytogentic Veränderungen in Benzol-induzierten Leukämogenese.
Generell prüft ein einziger FISH-Test nur eine oder wenige ganze Chromosomenoder spezifische Loci pro Objektträger, so müssen mehrere Hybridisierungen auf mehrere Folien durchgeführt werden, um alle menschlichen Chromosomen bedecken. Spektrale Karyotypisierung (SKY) ermöglicht die Visualisierung des gesamten Genoms gleichzeitig, aber die Forderung nach einer speziellen Software und Ausrüstung Grenzen ihrer Anwendung 7. Hier beschreiben wir eine neuartige FISH-Test, OctoChrome-Fisch, der für Chromosomics angewendet werden können, die wir hier definieren, wie die gleichzeitige Analyse aller 24 menschlichen Chromosomen auf einer Folie in Studien am Menschen, wie Chromosom-weiten Studie Aneuploidie (CWA) 8. Die Grundlage des Verfahrens, von Cytocell als Chromoprobe Multiprobe System vermarktet, ist ein OctoChrome Gerät, das in 8 Quadrate, von denen jede drei verschiedenen ganzen Chromosomen Sonden (Abbildung 1) mit sich führt wird. Jede der drei Sonden wird direkt mit einem anderen farbigen Fluorophor, grün (FITC), rote (Texas Red) und Blau (Cumarin) markiert. Die Anordnung von Chromosom Kombinationen auf dem OctoChromE-Gerät wurde entwickelt, um die Identifizierung der nicht-zufällige strukturelle Chromosomenanomalie, Veränderungen (Translokationen) in den gängigsten Leukämien und Lymphomen gefunden zu erleichtern, z. B. t (9; 22), t (15; 17), t (8; 21 ), t (14; 18) 9. Darüber hinaus können numerische Veränderungen (Aneuploidie) bei gleichzeitig Chromosomen erkannt werden. Die entsprechende Matrizenobjektträger wird auch in 8-Quadraten auf denen Metaphasespreitungen gebunden ist (Abbildung 2) sind, und wird über den OctoChrome Vorrichtung positioniert unterteilt. Die Sonden und Ziel-DNA sind bei hoher Temperatur und hybridisiert in einer feuchten Kammer denaturiert, und dann alle 24 menschlichen Chromosomen können visualisiert.
OctoChrome FISH ist eine vielversprechende Technik für die klinische Diagnostik von Leukämien und Lymphomen und zur Detektion von Aneuploidien in allen Chromosomen. Wir haben dieses neue chromosomale Ansatz in einer Studie CWAs von Benzol-exponierten chinesischen Arbeitern 8,10 angewandt.