Wiederkehrende Herpetic Stromakeratitis in Mäuse, ein Modell für das Studium der menschlichen HSK

Zusammenfassung

Die meisten Studien über Herpes Hornhauterkrankung verwenden Primärinfektion Modell. Allerdings bedeutet primäre Infektion mit HSV-1 in der Regel nicht für die menschliche Erkrankung führen. Hier beschreiben wir ein wiederkehrendes Muster von herpetischer korneale Erkrankung, die näher Verhalten menschlicher Erkrankung.

Zusammenfassung

Herpetic Augenkrankheit, genannt Herpes Stromakeratitis (HSK), ist ein potentiell blendenden Infektion der Hornhaut, die zu über 300.000 klinische Besuche pro Jahr für die Behandlung. Zwischen 1 und 2 Prozent der Patienten mit klinischer Erkrankung erleben Verlust des Sehvermögens der infizierten Hornhaut. Die überwiegende Mehrheit dieser Fälle sind die Folge der Reaktivierung einer latenten Infektion durch Herpes simplex-Virus Typ I und nicht aufgrund einer akuten Erkrankung. Interessanterweise ist die akute Infektion das Modell häufig verwendet, um diese Krankheit zu studieren. Es wurde jedoch das Gefühl, dass ein immer wiederkehrendes Modell HSK wäre reflektiert, was geschieht, während der klinischen Erkrankung. Die wiederkehrenden Tiermodelle für HSK haben beide Kaninchen und Mäuse eingesetzt. Der Vorteil von Kaninchen ist, dass sie erleben Reaktivierung aus der Latenz abwesend alle bekannten Reiz. Das heißt, es ist schwierig, die Rolle, die viele immunologische Faktoren bei rezidivierendem HSK spielen zu erforschen, weil die Kaninchen-Modell nicht die immungische und genetische Ressourcen, die Maus hat. Wir wählten das Mausmodell für wiederkehrende HSK verwenden, weil es den Vorteil davon, dass es viele Ressourcen zur Verfügung hat und auch wir wissen, wann die Reaktivierung wird auftreten, da die Reaktivierung durch Bestrahlung mit UV-B-Licht induziert wird. Bisher hat dieses Modell der Laboratorien verwenden darf es zu mehreren immunologischen Faktoren, die wichtig für diese Erkrankung sind zu definieren. Es hat uns auch die Möglichkeit, sowohl therapeutische und Wirksamkeit des Impfstoffes zu testen.

Protokoll

Animal Care Hinweis: Analgetika werden in diesem Modell nicht verwendet, da sie entzündungshemmend und sind somit würde das Modell ungültig.

Ein. Herstellung von Virus

1. Wachsen HSV-1 in Vero-Zellen (80% konfluent) mit einem ausgehend von 0,01 Verdünnung Infektionsmultiplizität (in T-150-Kolben, etwa 5 x 10 ⁵ Plaque-bildende Einheiten) für 3-4 Tage, bis alle Zellen abgerundet-up und sind leicht durch das Drücken der Flasche verdrängt.
2. Entfernen Sie das Medium in sterile Zentrifugenröhrchen und Zentrifuge Sorvall Legend RT bei 4 ° C und 3.500 rpm für 15 min. Nach dem Entfernen Überstand (siehe 1.3), resuspendiere....

Diskussion

Die wiederkehrende Modell Herpes Stromakeratitis (HSK) hier beschrieben ermöglicht die Ermittler auf die menschliche HSK in einem Modell, das mehr im Einklang mit dem, was während der Krankheit beim Menschen beobachtet wird, zu studieren. Somit sind das Modell der Stärken, die Krankheit im Zusammenhang mit einer Immunsystem, das bereits durch stimulierte während primäre Erkrankung auftritt. Da diese Mäuse bereits eine Immunantwort gegen HSV-1 hat, sind die Faktoren, die diese Immunantwort zu reaktivieren wahrscheinlich .......

Materialien

Liste der in diesem Artikel verwendeten Materialien

Name	Unternehmen	Katalognummer	Kommentare
DMEM	Sigma	D5796
Fötales Rinderserum	Atlanta Biologicals	S11150
Menschen-Serum	Sigma	S7023
L-Glutamin	Cellgro	25-005-C1
Penzillin/Streptomycin	Sigma	P4333
Fungizone	Invitrogen	15290018
Zentrifuge	Sorvall	Legend RT
Zentrifuge	Beckman	52-21
Transilluminator	UVP	95-0452-02
Sonikator	Branson	Sonifier 450
Flaschen nach Oak Ridge	Nalgene	Z 720410
Kolben – 7150	Corning	430823
Platten – 12-Loch	Corning	CLS 3513
Platten – 48-Loch	Corning	CLS 3548
Sterile kegelförmige Röhrchen – 30 ml	Corning	CLS 430828
Sterile Wattestäbchen	Fisher	23-400-125
Nadeln 30G	Becton-Dickinson	305106
Nadeln 25G	BD	305122
10-ml-Spritze	BD	309602
10-ml-Spritze	BD	309604