Die STA-PUT Verfahren ermöglicht die Trennung der verschiedenen Populationen von Zellen spermatogenic basierend auf Größe und Dichte.
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| Name | Company | Catalog Number | Comments |
|---|---|---|---|
| BSA | Affymetrix/USB | 10857 100MG | Alternate kann verwendet werden. |
| 0,5 %, 2 % und 4 % BSA-Lösungen | Lösen Sie 0,25 g, 11 g bzw. 22 g in einem Gesamtvolumen von 50 ml, 550 ml bzw. 550 ml 1x KREBS. | Wird noch zum Tag des STA-PUT-Verfahrens gemacht. Filter sterilisieren. | |
| KREBS (10x) | 3,26 g KH2PO4 + 139,5 g NaCl +5,89 g MgSO4/7H20 + 40 g Dextrose + 3,78 g CaCl2/2H20 + 7,12 g KCl, mit ddH20 | Autoklav/Filter auf 2 L bringen und bei 4 lagern; C für mehrere Monate zu halten. | |
| KREBS (1x) | 4,24 g NaHCO3 in 100 ml ddH20 auflösen. 200 ml 10x KREBS zugeben. Mit ddH20 auf 2 L bringen. | Wird noch zum Tag des STA-PUT-Verfahrens gemacht. Filter sterilisieren. | |
| Kollagenase | Sigma | C9891-1G | |
| DNAse | Sigma | DNEP-5MG | |
| Trypsin | Sigma | T9201-1G | |
| DAPI | Präferenz des Forschers | ||
| Triton-X100 | Präferenz des Forschers | ||
| Formaldehyd (~37%) | Präferenz des Forschers | ||
| TABELLE 2: AUSRÜSTUNG | |||
| Ausrüstung | Firmenkatalog | # | Kommentare |
| Komplettes STA-PUT Gerät | ProScience Glass Shop | STA-PUT (bei diesem Verfahren wird die Standard-Sedimentationskammer verwendet: Kat. Nr. 56700-500) | Enthält alle Glaswaren und Geräte für das Gerät. Alternative Glaswaren sind für die Durchführung von STA-PUT mit kleineren Zellzahlen erhältlich. |
| 10 μ m Maschenfilter | Fisherbrand | 22363549 | |
| Maus-Sezierwerkzeuge | Präferenz des Forschers | ||
| 14 ml Sammelröhrchen mit rundem Boden und Kappen | Präferenz des Forschers | ||
| Benötigt ca. 100 Röhrchen | |||
| Fraktionssammler | GE Healthcare Life Sciences | Modell: Frac-920, Produktcode: 18-1177-40 | Alternative kann verwendet werden. |
| Objektträger, Deckglas | Präferenz des Forschers | ||
| Licht-/Fluoreszenzmikroskop | Präferenz des Forschers |
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