Wir stellen ein chirurgisches Verfahren, experimentelle Ischämie / Reperfusions (I / R) Schädigung induzieren Myokardinfarkt (MI) in Mausmodellen, die für mehr Klarheit in der Positionierung der Ligation an der linken vorderen absteigenden Arterie (LAD) simulieren können, um die Reproduzierbarkeit zu erhöhen MI Experimente in Mäusen.
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Methodenartikel
Einem Mausmodell der myokardialen Ischämie-Reperfusion Injury durch Ligation des linken vorderen absteigenden Arterie
In diesem Artikel
Zusammenfassung
Zusammenfassung
Akuter oder chronischer Myokardinfarkt (MI) sind kardiovaskuläre Ereignisse zu hohen Morbidität und Mortalität. Die Festlegung der pathologischen Mechanismen bei der Arbeit während MI und die Entwicklung wirksamer Therapieansätze erfordert Methodik reproduzierbar simulieren die klinische Inzidenz und spiegeln die pathophysiologischen Veränderungen mit MI verbunden. Hier beschreiben wir eine chirurgische Methode, MI in Mausmodellen induzieren, die für Kurzzeit-Ischämie-Reperfusion (I / R)-Verletzungen sowie permanente Ligation verwendet werden kann. Der große Vorteil dieses Verfahrens ist, um den Standort des linken vorderen absteigenden Arterie (LAD) zu erleichtern, um für eine genaue Ligation dieser Arterie zu ermöglichen, Ischämie im linken Ventrikel des Herzens Maus induzieren. Genaue Positionierung der Ligatur auf LAD erhöht die Reproduzierbarkeit der Infarktgröße und erzeugt somit zuverlässigere Ergebnisse. Mehr Präzision bei der Platzierung der Ligatur wird die Standard-Operationsverfahren zu verbessern, um in Mäusen MI simulieren, thus Verringerung der Zahl der Versuchstiere, die für statistisch relevante Studien und verbessern unser Verständnis der Mechanismen, die Herstellung kardiale Dysfunktion folgenden MI. Dieses Mausmodell der MI ist auch nützlich für die präklinische Prüfung von Behandlungen Targeting myokardialen Schäden nach MI.
Einleitung
Tiermodelle von Myokardinfarkt (MI) in der Forschung der komplexen Pathophysiologie von ischämischen Herzkrankheiten 1 wichtig. Ischämie-Reperfusion (I / R) Verletzungen ist ein wesentlicher Faktor der myokardialen Schäden während MI generiert. Die durch Okklusion der Herz-Kreislauf hergestellt Anfangs Ischämie Verletzung kann in MI-Patienten durch den Einsatz der Angioplastie, um die Perfusion in einer zeitgemäßen Weise wiederherzustellen minimiert werden. Während dieser Intervention hat stark die Zahl der Todesfälle infolge akuter MI, Wiederherstellung der Blutfluss in den ischämischen Bereich Ergebnisse in I / R-Schaden, die zum Tod von Kardiomyozyten f....
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Protokoll
Dieses Tier Protokoll wurde zugelassen und ist in Übereinstimmung mit den Richtlinien und Vorschriften her von der Institutional Animal Care und Verwenden Committee (IACUC) an der Ohio State University eingestellt. Alle Richtlinien von der lokalen IACUC entwickelt werden, sind in Übereinstimmung mit dem Tierversuchs Guide von Office of Laboratory Animal Welfare an den National Institutes of Health entwickelt.
1. Anästhesie und Intubation
- Autoklav alle Instrumente und chirurgische Versorgung vor dem Gebrauch. Während des gesamten Verfahrens tragen sterile Einweg-OP-Handschuhe. Halten Sie einen sterilen Bereich während des gesamt....
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Ergebnisse
Nach 24 Stunden Reperfusion, die Analyse der Infarktgröße und der Region-at-Risk (AAR), durch Phthaloblau Farbstoff und Triphenyltetrazoliumchlorid (TTC), Ligation der LAD kann durch Beobachtung Blanchieren von Herzgewebe distal der Naht bestätigt werden sowie Störungen der vorderen Wand. Reperfusion kann durch die Rückkehr der roten Farbe des Myokards und die Demonstration von einer gewissen Erholung der Vorderwand Bewegung überprüft werden.
Infarkt Bereiche (weiß) sollten in Gefahr (rot) z.......
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Diskussion
Maus myokardialen Ischämie-Reperfusion-Modelle sind eine effektive Methode für Herz-Kreislaufforschung in die klinische akuten oder chronischen Herzerkrankungen 13,14 simulieren. Erhebliche Anstrengungen wurden angewendet zu entwickeln und zu verfeinern, chirurgische Ansätze, die ischämische Ereignisse und Reperfusionsschäden in den Herzen der verschiedenen Tierarten zu produzieren. Zwar gibt es besondere Vorteile für die Verwendung von verschiedenen Tieren Systemen hat die Maus Merkmale, die großes Interesse.......
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Offenlegungen
Dr. Noah Weisleder ist ein Gründer und Chief Scientific Officer bei der TRIM-edizin, Inc.
Danksagungen
Forschung in dieser Veröffentlichung berichtet, wurde von der National Institute of Arthritis und Muskel-Skelett-und Hautkrankheiten, Teil der National Institutes of Health, unter Verleihungsnummer R01-AR063084 unterstützt. Der Inhalt ist ausschließlich der Verantwortung der Autoren und nicht unbedingt die offizielle Meinung der National Institutes of Health.
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Materialien
| Name | Unternehmen | Katalognummer | Kommentare |
|---|---|---|---|
| PhysioSuite mit RightTemp Homöotherm Warming | Kent Scientific Corp | PS-RT | |
| Lichtquelle | Zeiss | KL 1500 LCD | |
| Maus Herzschneider Matrix | Zivic Miller | HSMS001-1 | |
| Micro Tray - Boden, Deckel & Matte (6,0 x 10 x 0,75) | Fine Science Tools | 6100A | |
| 2,3,5-Triphenyltetrazoliumchlorid | Sigma Aldrich | T8877 | |
| Buprenorphin (Buprenex injizierbar) | Reckitt Benkiser Healthcare | NDC 12496-0757-1 | |
| Bupivacain | Hospira | NDC 0409-1163-01 | |
| Isofluran | Abbott | NDC 5260-04-05 | |
| Betadine Lösung | Purdue Pharma | 25655-41-8 | |
| Maus Cardiac Troponin T(cTnT) ELISA | Kamiya Biomedical Company | KT-58997 | |
| Feine Schere | Fine Science Tools | 14040-10 | |
| Dumont # 5 Pinzetten | Fine Science Tools | 11251-30 | |
| Dumont # 3 Pinzetten | Fine Science Tools | 11231-30 | |
| Castroviejo Mikronadelhalter | Fine Science Tools | 12060-01 | |
| Schlanker länglicher Nadelhalter | Fine Science Tools | 12005-15 | |
| Nadelhalter mit rundem Griff | Fine Science Tools | 12075-12 | |
| Omano Trinokulares Stereoskop | Microscope.com | OM99-V6 | |
| SB2 Galgenstativ mit Universalarm | Microscope.com | V6 | |
| Trachealschlauch, 0,5 mm, 1/16 Zoll | Y Kent Scientific Corp | RSP05T16 | |
| Anästhesiesysteme für Nagetiere und Kleintiere | VetEquip, Inc | 901807 | |
| 4-0 Seidenkegelnaht | Sharpoint™ Produkte | DC-2515N | |
| 6-0 Seidenkegelnaht | Sharpoint™ Produkte | DC-2150N |
Referenzen
- Abarbanell, A. M., et al. Animal models of myocardial and vascular injury. J Surg Res. 162, 239-249 (2010).
- Gao, E., et al. A novel and efficient model of coronary artery ligation and myocardial infarction in the mouse. Circ Res. 107,....
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Nachdrucke und Genehmigungen
