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Methodenartikel

Erstellung von Verwachsungen bei Mäusen

13K Aufrufe

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DOI:

10.3791/54450

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27. August 2016

In diesem Artikel

Zusammenfassung

Abdominale Adhäsionen, die sich nach der Operation bilden, sind eine Hauptursache für Schmerzen, Unfruchtbarkeit und Krankenhausaufenthalte und erneute Operationen wegen Dünndarmobstruktion. Unser chirurgisches Verfahren zur Herstellung von abdominalen Adhäsionen bei Mäusen ist ein zuverlässiges Werkzeug, um die Mechanismen zu untersuchen, die der Bildung von Adhäsionen zugrunde liegen.

Zusammenfassung

Abdominale Adhäsionen bestehen aus fibrotischem Gewebe, das sich im Peritonealraum als Reaktion auf einen entzündlichen Insult, typischerweise eine Operation oder eine intraabdominale Infektion, bildet. Die genauen Mechanismen, die der Adhäsionsbildung zugrunde liegen, sind nur unzureichend verstanden. Viele Verbindungen und physikalische Barrieren wurden mit unterschiedlichem Erfolg auf ihre Fähigkeit getestet, Adhäsionen nach Operationen zu verhindern. Die Maus und die Ratte sind wichtige Modelle für die Untersuchung von abdominalen Adhäsionen. In der Literatur gibt es verschiedene Techniken zur Erzeugung von Adhäsionen bei Maus und Ratte. Hier beschreiben wir ein Protokoll, bei dem der Blinddarm mit Sandpapier und Nähten in der rechten Bauchseitenwand abgenutzt wird. Die Maus wird betäubt und der Bauch vorbereitet. Es wird eine Mittellinien-Laparotomie angelegt und der Blinddarm identifiziert. Schleifpapier wird verwendet, um die Oberfläche des Blindmals sanft abzuschleifen. Als nächstes werden mehrere Achternähte in das Bauchfell der rechten Bauchseitenwand gelegt. Die Bauchhöhle wird gespült, eine kleine Menge Stärke aufgetragen und der Schnitt geschlossen. Wir haben festgestellt, dass diese Technik die konsistentesten Adhäsionen mit der niedrigsten Sterblichkeitsrate erzeugt.

Einleitung

Abdominalen Adhäsionen sind eine Form von Narbengewebe, das in Reaktion auf eine Entzündung im Abdomen bilden, in der Regel nach einem chirurgischen Eingriff oder intraabdominale Infektion. Adhäsionen sind eine der Hauptursachen für chronische Bauchschmerzen und Unfruchtbarkeit, und sind die häufigste Ursache von Dünndarmobstruktion 1. Das Vorhandensein von Adhäsionen macht die Durchführung einer zweiten Bauchoperation schwieriger und erhöht die Wahrscheinlichkeit von Komplikationen 2.

Trotz jahrelanger Forschung, bleiben die Mechanismen, die die Bildung von Adhäsionen zugrunde liegenden schlecht verstanden. Es ist b....

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Protokoll

Das folgende Protokoll wurde von der Stanford University Institutional Animal Care und Use Committee (IACUC) und erfüllt alle institutionellen ethischen Richtlinien in Bezug auf die Verwendung von Versuchstieren genehmigt.

1. Schaffung von Verwachsungen

  1. Beginnen Sie mit der Maus auf Antibiotika-Chow-Diät eine Woche vor dem Eingriff.
  2. Autoclave die chirurgischen Instrumente und vorwärmen die Salz Spüllösung.
  3. Anesthetize die Maus 2% inhalativen Isofluran verwenden.
  4. Mit Hilfe einer Haarschneidemaschine durch eine schnelle Anwendung gefolgt (5 - 10 s eingestellt) von Enthaarungsmittel, entfernen Sie das....

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Ergebnisse

Um sieben Tage nach der Operation, Caecum und möglicherweise Colon ascendens, Leber und Dünndarmschlingen sollte auf die rechtsseitige Bauchwand anhaftenden sein. (Abbildung 8) Abgeschnittene Gewebe eingebettet und geschnitten werden und ausgezeichnete histologischen Schnitten ergeben. (11, 12)

Wenn das Verfahren korrekt durchgeführt wird, sollte 100% der Mäuse haben erhebliche Verwachsu.......

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Diskussion

Die kritischen Schritte in diesem Verfahren sind: gründlich den Blinddarm Abschleifen ohne Perforation verursacht, Nähte in der Bauchseitenwand und die Anwendung die richtige Menge an Stärke setzt. Nur Schleifpapier Caecum anzuwenden oder zu einem kleinen spezifischen Teil des Darms. Breiter Einsatz von Schmirgelpapier auf große Mengen von Dünndarm neigt erhebliche Ileus zu verursachen. Achten Sie darauf, den Blinddarm mit genug Kraft, um abzuschleifen, dass die Oberfläche rau wird, aber nicht so sehr, dass die Wand rei.......

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Offenlegungen

Die Autoren erklären, dass sie keine finanziellen Interessen haben.

Danksagungen

CDM wurde von der American College of Surgeons (ACS) Resident Research Stipendium unterstützt. MSH wurde vom California Institute for Regenerative Medicine (CIRM) Klinische Fellow Ausbildungsförderung TG2-01159 unterstützt. MSH, HPL und MTL wurden von der American Society of MKG-Chirurgen (ASMS) / MKG-Chirurgen Foundation (MSF) Research Grant-Award unterstützt. HPL wurde von NIH Zuschusses R01 GM087609 und ein Geschenk von Ingrid Lai und Bill Shu zu Ehren von Anthony Shu unterstützt. HPL und MTL wurden vom Hagey Labor für Pädiatrische Regenerative Medizin und der Oak Foundation unterstützt. MTL wurde von der Gunn / Olivier Fund unterstützt.

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Materialien

Liste der in diesem Artikel verwendeten Materialien
NameUnternehmenKatalognummerKommentare
Fisherbrand Absorbent Underpads, 20" x 24"Fisher Scientific14-206-62
Polylined Sterile Field, 18" x 24"Busse Krankenhaus Einwegartikel696Schneiden Sie ein rechteckiges Loch in der entsprechenden Größe
Isothesia IsofluranHenry Schein 
Fisherbrand Steriles Watte-Mull-Pad, 4" x 4"Fisher Scientific22-415-469
Puralube Vaseline Augensalbe, 1/8 oz. TubeDechra Veterinary ProductsNDC 17033-211-38
Nair EnthaarungscremeKirche & Dwight Co.22339-05
Buprenex Buprenorphin & nbsp; 0,3 mg/mlReckitt Benckiser Pharmaceuticals Inc.NDC 12496-0757-5
1 cc Insulinspritze, 27  GBecton Dickinson329412
Povidon Jod VorbereitungslösungMedlineMDS093944H
Webcol AlkoholvorbereitungstapferCovidien6818
Allzweck Labarotory BeschriftungsbandVWR89097-912
BioGel PI OP-HandschuheMö lnlycke Health CareALA42675Z
Mikrozange mit ZähnenRobozRS-5150
Feine Schere - scharfFine Science Tools14060-09
Gerade Zange mit WellenschliffFine Science Tools11050-10
Castro-Viejo NadeltreiberFine Science Tools12565-14
100 Körnung 1/4 Blatt SchleifpapierACE Hardware1010446In Streifen geschnitten
4-0 Seidennaht, 30", SH NadelEthiconK831
7-0 PDS II resorbierbares monofiles Nahtmaterial, 30", BV-1 NadelEthiconZ135Wird normalerweise doppelarmig geliefert. Schneiden Sie die Naht in der Mitte ab, um zwei brauchbare Nähte zu erzeugen.
ReisstärkeMP Biomedicals102955
0,9 % Natriumchlorid-BewässerungsbaxterBHL2F7121Warm auf 37 &°; C vor Gebrauch
10 ml SpritzeBecton Dickinson309604
6-0 Vicryl resorbierbares geflochtenes Nahtmaterial, 18", RB-1 KegelnadelEthiconJ212H
6-0 Ethilon Nylon monofil   Naht, 18", P-3 Nadel,  Ethicon1698G
Tegaderm Transparente Folie Dressing Frame Style, 6 cm x 7 cm3M1624WLängs halbiert
050033

Referenzen

  1. Ellis, H., et al. Adhesion-related hospital readmissions after abdominal and pelvic surgery: a retrospective cohort study. Lancet. 353 (9163), 1476-1480 (1999).
  2. Brochhausen, C., et al. Current strategies and fut....

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Nachdrucke und Genehmigungen

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