Alkohol-Gebrauch-Störung (AUD) ist ein wichtiges nationales Gesundheitsproblem und die Entwicklung wirksamer Therapien ist erforderlich, um den Bedürfnissen dieser Patientengruppe zu kompensieren. Zu diesem Zweck nutzt das folgende Protokoll zwei einfache Nager trinken-Modelle um die präklinische Wirksamkeit der Anti-Alkohol Bleiverbindungen zu beurteilen.
Ein Abonnement von JoVE ist erforderlich, um diesen Inhalt anzuzeigen. Melden Sie sich an oder beginnen Sie noch heute mit einer kostenlosen Testphase.
Methodenartikel
Murine Modelle bei der Entwicklung von Pharmakotherapien für Alkoholismus zu trinken: Trinken in der dunklen und zwei Flasche Wahl
* These authors contributed equally
In diesem Artikel
Zusammenfassung
Zusammenfassung
Alkohol-Gebrauch-Störung (AUD) ist ein großes Problem mit mehr als einem geschätzten 76 Millionen Menschen weltweit die diagnostischen Kriterien erfüllen. Aktuelle Behandlungsmethoden beschränken sich auf drei FDA-zugelassene Medikamente, die weitgehend wirkungslos sind, auch in Kombination mit psychosozialer Intervention, wie deutlich die hohe Rückfall Rate. Als solche stellt die Suche nach mehr neuartige Therapien eine wichtige öffentliche Gesundheitsziel. Zu diesem Zweck das folgende Protokoll nutzt zwei einfache Nager trinken-Modelle um die präklinische Wirksamkeit der Anti-Alkohol Bleiverbindungen beurteilen: zwei-Flasche Wahl (TBC) und in der Dunkelheit (DID) trinken. Ersteres ermöglicht, dass Mäuse freiwillig trinken in Maßen, während letztere Mäuse, um freiwillige induziert eine große Menge an Alkohol in einem kurzen Zeitraum verbrauchen, die "Binge drinking" imitiert. Die einfache und hohen Durchsatz Natur beider dieser Paradigmen erlaubt für schnelle Screening pharmakologischer Substanzen oder zur Identifizierung von Stämme von Mäusen, die bestimmte freiwillige Trinkverhalten aufweisen.
Einleitung
Für die letzten 25 plus Jahre, hat erhebliche Anstrengungen zur Entwicklung von Medikamenten für die Behandlung von Alkohol-Gebrauch-Störung (AUD)1gesetzt worden. Obwohl viele Fortschritte erzielt wurden, AUD immer noch eine große Gesundheitsproblem Auswirkungen auf mehr als 18 Millionen Amerikaner, und kostet mehr als $ 220 Milliarden jährlich2,3. Derzeit gibt es nur drei FDA-zugelassene Medikamente, Disulfiram, Naltrexon und Acamprosat, die inkonsistente Ergebnisse in klinischen Studien und auch in Kombination mit psychosozialer Intervention in den Klinik-Einstellungen nur begrenzten ....
Zugriff eingeschränkt. Bitte melden Sie sich an oder starten Sie eine Testversion, um diesen Inhalt anzuzeigen.
Protokoll
Alle hier beschriebene Verfahren wurden von den institutionellen Animal Care und Nutzung Ausschüsse des Campus der University of Southern California Health Sciences genehmigt.
1. Versuchsaufbau und Montage
- Erwerben alle der folgenden Lieferungen und Chemikalien vor Beginn der Studie: Mäuse, Käfige/Metal Käfig Tops, Einstreu, Nahrung, Wasser, Ethanol, Mehrkanalpipette Sipper Tops, schrumpfen, Wrap, Cuttermesser, Kabelbinder, Klebeband, Bunsenbrenner, Skala, Scheinwerfer.
- Erhalten Sie C57BL/6J Mäuse, entweder durch eine kommerzielle Quelle oder eine eigene Kolonie, in Anbetracht, dass Mäuse Gruppe bis zum Testzeitpunkt unt....
Zugriff eingeschränkt. Bitte melden Sie sich an oder starten Sie eine Testversion, um diesen Inhalt anzuzeigen.
Ergebnisse
In den folgenden repräsentative Untersuchungen wurde trinken modelliert mit dem zwei-Flasche Wahl (TBC)-Paradigma. Kurz, Mäuse hatten Zugang zu zwei Flaschen Lösung, von denen Wasser, und die anderen 10 % (V/V) Ethanol Lösung enthielt. Themen waren anschließend aufgeteilt und gleichmäßig, Medikament Behandlungsgruppen, Moxidectin (MOX) vs. Kochsalzlösung Kontrolle zugewiesen, so dass jede Gruppe Ethanol Aufnahmemengen mit der geringsten Abweichung im Durchschnitt würde.
Zugriff eingeschränkt. Bitte melden Sie sich an oder starten Sie eine Testversion, um diesen Inhalt anzuzeigen.
Diskussion
Weltweite Schätzungen zufolge mehr als 76 Millionen Menschen die Kriterien um eine Diagnose für Alkohol Verwendung Störung (AUD) rechtfertigen. Leider derzeit verfügbaren pharmazeutische Behandlungen sind weitgehend wirkungslos und Weiterentwicklung ist notwendig, um die Bedürfnisse dieser klinischen Bevölkerung20auszugleichen. Zu diesem Zweck das folgende Protokoll zielt darauf ab, dieses Unterfangen zu erleichtern, indem exemplarisch zwei der grundlegendsten Nager trinken Paradigmen: zwei-Flasch.......
Zugriff eingeschränkt. Bitte melden Sie sich an oder starten Sie eine Testversion, um diesen Inhalt anzuzeigen.
Offenlegungen
DLD und LA sind Erfinder ein Patent für die Wiederverwendung von Ivermectin und verwandte Avermectins für die Behandlung von Alkohol-Gebrauch-Störungen. Die Autoren haben keine andere Interessenkonflikte und sind vollständig verantwortlich für den wissenschaftlichen Inhalt des Papiers.
Danksagungen
Diese Arbeit wurde unterstützt, unter anderem durch Forschung gewährt SC CTSI NIH/NCRR/NCATS--UL1TR000130 (D.L.D.), AA022448 (D.L.D.) und die USC School of Pharmacy.
....Zugriff eingeschränkt. Bitte melden Sie sich an oder starten Sie eine Testversion, um diesen Inhalt anzuzeigen.
Materialien
| Name | Unternehmen | Katalognummer | Kommentare |
|---|---|---|---|
| 1 L Messzylinder | VWR | https://us.vwr.com/store/product/20935285/marisco-single-scale-cylinder-graduates-john-m-maris-co | Zur Herstellung von Ethanollösung. |
| 1 L Glasflasche | Pyrex (Fisher Scientific) | https://www.fishersci.com/shop/products/pyrex-reusable-media-storage-bottles-12/p-42752 | Zur Herstellung von Ethanollösung. |
| 100 mL Messzylinder | Fisher Scientific | https://www.fishersci.com/shop/products/kimble-chase-kimax-class-a-to-contain-graduated-cylinders-8/p-4369311 | Zur Herstellung von Ethanollösung. |
| Analox | Eine mögliche Methode zur Analyse von DIS Blutproben ist die Verwendung der | ||
| kugelgelagerten Analox Machine Sipper-Röhrchen | Ancare Corp. | http://www.ancare.com/products/watering-equipment/open-drinking-tubes/straight-tubes-ball-point | Länge: 2,5 Zoll, Durchmesser: 5/16 Zoll, Modell: TD100 |
| C57BL / 6J Mäuse | Jackson Labor | https://www.jax.org/strain/000664 | Kann auch aus der internen Zuchtkolonie |
| serologische Einwegpipetten | VWR International (VWR) | stammenhttps://us.vwr.com/store/product/4760455/vwr-disposable-serological-pipets-polystyrene-sterile-plugged | 10 mL, 18 mL oder 25 mL |
| Ethanol, rein, 190 proof (95%), USP, KOPTEC | Decon Labs (VWR) | https://us.vwr.com/store/product/4542412/ethanol-pure-190-proof-95-usp-koptec | --- |
| Heißluftpistole | Master Appliances Corp. | http://www.masterappliance.com/master-heat-guns-kits/ | |
| Schrumpfschlauch | --- | --- | Durchmesser: 3/8 Zoll |
| industrielles Messer / Klinge | --- | --- | --- |
| Metallkäfigplatte | --- | --- | Sollte über die Universität / Institution Vivarium |
| Maus RO Wasser | --- | --- | sollte über die Universität erhältlich sein/ Institutionelle Vivarium |
| tragbare elektronische Waage | Ohaus (VWR) | https://us.vwr.com/store/product/4789377/portable-electronic-cs-series-scales-ohaus--- | |
| Rotlicht-Stirnlampe | nyteBright (Amazon) | https://www.amazon.com/LED-Headlamp-Flashlight-Red-Light/dp/B00R0LMMF8/ref=sr_1_1?ie=UTF8&qid=1499591137&sr=8-1-spons&keywords=red+lamp+headlamp&psc=1 | --- |
| Silikon-Stopfen | Fisher | --- | --- |
| Thermometer | Fisher Scientific | https://www.fishersci.com/shop/products/fisher-scientific-hygro-thermometer-clock-large-display-2/p-4077232 | --- |
| Wiegeschiff | VWR International (VWR) | https://us.vwr.com/store/product/16773534/vwr-pour-boat-weighing-dishes | Der Deckel einer Pipettenspitzendose ist eine geeignete Alternative |
Referenzen
- Litten, R. Z., Falk, D. E., Ryan, M. L., Fertig, J. B. Discovery, Development, and Adoption of Medications to Treat Alcohol Use Disorder: Goals for the Phases of Medications Development. Alcoholism: Clinical and Experimental Research. 40 (7), 1368-1379 (2016).
- Grant, B. F., Dawson, D. A., Stinson, F. S., Chou, S. P., Dufour, M. C., Pickering, R. P.
Zugriff eingeschränkt. Bitte melden Sie sich an oder starten Sie eine Testversion, um diesen Inhalt anzuzeigen.
Nachdrucke und Genehmigungen
