Hier präsentieren wir ein Protokoll, um ein großes Sichtfeld (FOV) dreidimensionale (3D) Fluoreszenz und OCT Netzhautbild mithilfe eine neuartige bildgebende multimodale Plattform abrufen. Wir werden das System-Setup, die Methode der Ausrichtung und der operativen Protokolle vorstellen. In-Vivo Bildgebung werden demonstriert und repräsentative Ergebnisse zur Verfügung gestellt werden.
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Methodenartikel
Multimodale Volumetrische Retinal Imaging von schrägen Scanning Laser Ophthalmoskopie (oSLO) und optische Kohärenztomografie (OCT)
* These authors contributed equally
In diesem Artikel
Zusammenfassung
Zusammenfassung
Während Fluoreszenz-Bildgebung in der Augenheilkunde weit verbreitet ist, ist ein großes Sichtfeld (FOV) dreidimensionale (3D) Fluoreszenz Netzhautbild nach wie vor eine große Herausforderung mit der State-of-the-Art-Retinal bildgebende Modalitäten, weil sie Z-Stapeln, erfordern würde Kompilieren Sie eine Volumetrische Dataset. Neuere optische Kohärenztomografie (OCT) und OCT angiographiesysteme (OCTA) überwinden diese Einschränkungen um dreidimensionale (3D) anatomische und vaskuläre Bilder liefern, aber die Farbstoff-freie Art der OCT kann nicht auslaufen bezeichnend für vaskuläre visualisieren Dysfunktion. Dieses Protokoll beschreibt eine neuartige schräge scanning Laser Ophthalmoskopie (oSLO) Technik, die 3D Volumetrische Fluoreszenz retinale Bildgebung. Das Setup von dem abbildenden System generiert die schräge Abtastung durch eine Taube Schweif Schieberegler und richtet die endgültige imaging-System in einem Winkel, fluoreszierende Schnittbilder zu erkennen. Das System nutzt die Laser-scanning-Methode und ermöglicht daher eine einfache Einbindung von OCT als ergänzende volumetrischen strukturellen bildgebenden Modalität. In-Vivo Bildgebung auf Ratte Netzhaut wird hier gezeigt. Fluorescein Lösung wird intravenös injiziert, um Volumetrische Fluorescein Angiographie (vFA) zu produzieren.
Einleitung
Augenheilkunde und Vision Wissenschaft profitieren von der modernen optischen bildgebenden Verfahren, da die Netzhaut mit Licht leicht erreicht werden kann. Fluoreszenz retinale Bildgebung ist ein wichtiges Instrument bei der Diagnose und Behandlung von Gefäßerkrankungen chorioretinalen wie Diabetische Retinopathie (DR) und Altersbedingte Makula-Degeneration (AMD), die Ursachen von Blindheit in den Vereinigten Staaten führen.
Jedoch ist es immer noch schwierig, ein großes Sichtfeld (FOV), dreidimensionale (3D) Retinal imaging mit Fluoreszenz-Bildgebung zu erwerben. Fundus-Fotografie verfügt nicht über die Tiefe-Lösung von Fähigkeit und diff....
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Protokoll
Alle hier beschriebene Methoden wurden von Animal Care und Nutzung Ausschuss (ACUC) von Boston Medical Center genehmigt.
1. System-Setup
- oSLO-System
- Verwenden einer Laserquelle Supercontinuum als System-Laserquelle.
- Höheren Wellenlängenbereich (650-2000 nm) Bereich des sichtbaren Lichts (450-650 nm) durch einen dichroitischen Spiegel (DM1) trennen. Erweitern Sie das Spektrum mit einem Paar dispersive Prismen nach den Strahl durch einen Strahlteiler Polarisation (PBS).
- Legen Sie einen Schlitz um die Erregung Wellenlängenbereich (475-495 nm) auszuwählen. Verwenden Sie einen reflektierenden Spiegel reflekt....
- Verwenden einer Laserquelle Supercontinuum als System-Laserquelle.
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Ergebnisse
Abbildung 4a zeigt ein Querschnitt OCT-Bild der Ratte Netzhaut. Abbildung 4 b -4 c zeigen die gleichen retinalen Schnittbilder von OCTA und oSLO vFA zur gleichen Zeit erworben. Der oSLO ermöglicht Cross-Sectional FA analog zu der OCT B-Scan. Im Vergleich zu OCTA identifiziert das oSLO vFA Cross-Sectional Bild eindeutig die Schiffe in der nervenfaserschicht (NFL) und Ganglion Zellschicht (GCL) und Kapillaren in de.......
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Diskussion
Hier haben wir beschrieben, oSLO, eine in Vivo Volumetrische fluoreszierende Retinal imaging Technik mit einem FOV über 30°. Im Vergleich zu OCT, eines aktuellen Behandlungsstandards bildgebendes Verfahren in der Augenheilkunde, oSLO bietet eine ähnliche 3D imaging-Funktion doch erlaubt Fluoreszenz-Kontrast, der OAT nicht anfällig ist. Der Vorteil von oSLO ist, dass es nur einen rasterscan erfordert und die nahtlose Kombination von OCT erlaubt, die zwei sich ergänzende Techniken für Struktur- und fluoreszierende.......
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Offenlegungen
Ji Yi hält eine ausstehende Patent für oSLO. Die anderen Autoren erklären keine konkurrierenden finanziellen Interessen.
Danksagungen
Finanzierung ist von Evans medizinische Stiftung Fördermittel aus Boston Medical Center sowie einen Untervertrag von NIH 5R01CA183101, BU-CTSI Pilot gewähren, 1UL1TR001430, BU-Joslin pilot-Programm und BU-CTSI KL2TR001411.
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Materialien
| Name | Unternehmen | Katalognummer | Kommentare |
|---|---|---|---|
| Superkontinuums-Laserquelle | NKT Photonics | SuperK EXTREME EXU-OCT6 | |
| Dichroitischer Spiegel (DM1) | Thorlabs | DMLP650R | |
| dichroitischer Spiegel (DM2) | Chroma | ZT514/1064rpc | |
| Dichroitischer Spiegel (DM3) | Thorlabs | DMLP900R | |
| Singlemode-Faser (SMF 1) | Thorlabs | P3-460B-FC-2 | |
| Singlemode-Faser (SMF 2) | Thorlabs | P3-780A-FC-2 | |
| Glasfaserkoppler | Thorlabs | TW850R5A2 | |
| 1:1 Teleskopsystem | Thorlabs | AC254-100-A&mal; | |
| 3:1 Teleskop System | Thorlabs | AC254-150-A&mal; | |
| 3:1 Teleskop System | Thorlabs | AC254-50-A&mal; | |
| Galvo-Spiegel (GM1,GM2) | Thorlabs | GVS201&mal; | |
| De-sacn Galvo Spiegel (GM3) | Thorlabs | GVS011 | |
| Objektiv | Olympus | UplanSApo 20&mal;/0.75 | |
| Final Imaging | System Olympus | UplanFL N 10&fach;/0.3 | |
| Final Imaging System | Computar | 12-36mm/1:2.8 | |
| Kamera | PCO | Pco.pixelfly USB | |
| Filter | Thorlabs | FEL0800 | |
| Montierter stufenloser ND-Filter | Thorlabs | NDC-50C-4M-A | |
| Zeilenkamera | Thorlabs | SPL2048-140K | |
| Analoge Ausgangskarte (AO1) | National Instrument | PCI-6731 | |
| Analoge Ausgangskarte (AO2) | National Instrument | PCIe-6351 | |
| Langpassfilter | Thorlabs | FEL0800 |
Referenzen
- Webb, R. H., Hughes, G. W., Delori, F. C. Confocal scanning laser ophthalmoscope. Applied Optics. 26 (8), 1492-1499 (1987).
- Roorda, A., et al. Adaptive optics scanning laser ophthalmoscopy. Optics Express. 10 (9), 405-412 (2002).
- Huang, D., et al.
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Nachdrucke und Genehmigungen
