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Methodenartikel

Die Generation der geschlossenen femoralen Frakturen bei Mäusen: ein Modell zur Knochenheilung

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DOI:

10.3791/58122

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16. August 2018

In diesem Artikel

Zusammenfassung

Das murine geschlossenen femoralen Fraktur-Modell ist eine leistungsfähige Plattform, Frakturheilung zu studieren und neue therapeutische Strategien zur Knochenregeneration zu beschleunigen. Das Ziel dieses chirurgischen Protokolls soll einseitige geschlossenen femorale Frakturen bei Mäusen mit einem intramedullären Stahl-Stab Femur zu stabilisieren.

Zusammenfassung

Knochenbrüchen verhängen eine enorme sozio-ökonomische Belastung für Patienten zusätzlich zu erheblichen Auswirkungen auf ihre Lebensqualität. Therapeutische Strategien, die effiziente Knochenheilung zu fördern sind nicht Existent und in der hohen Nachfrage. Effektive und reproduzierbare Tiermodellen der Heilung Frakturen sind erforderlich, zu verstehen, die komplexe biologische Prozesse Knochenregeneration zugeordnet. Im Laufe der Jahre wurden viele Tiermodellen der Frakturheilung generiert; murine Fraktur Modelle entstanden jedoch vor kurzem als leistungsfähige Werkzeuge zur Knochenheilung zu studieren. Eine Vielzahl von offenen und geschlossenen Modelle wurden entwickelt, aber das geschlossene femoralen Fraktur-Modell hebt sich als eine einfache Methode zur Erzeugung von schnelle und reproduzierbare Ergebnisse in einer physiologisch relevanten Weise. Das Ziel dieses chirurgischen Protokolls ist einseitige geschlossenen femorale Frakturen bei Mäusen zu generieren und erleichtern eine Stabilisierung nach dem Bruch des Oberschenkelknochens durch das Einfügen eines intramedullären Stahl-Stabes. Obwohl Geräte wie einen Nagel oder eine Schraube größeren Axial- und Rotations-Stabilität bieten, stellt die Verwendung von eine intramedulläre Rute eine ausreichende Stabilisierung für konsequente heilende Ergebnisse ohne produzieren neue Mängel im Knochengewebe oder Beschädigung in der Nähe soft Gewebe. Radiologische Bildgebung wird verwendet, um das Fortschreiten der Kallus-Bildung, knöchernen Union und anschließenden Umbau des knöchernen Kallus zu überwachen. Knochen Heilung Ergebnisse sind in der Regel verbunden mit der Kraft des geheilten Knochens und mit Torsions Tests gemessen. Dennoch, das Verständnis der frühen zellulären und molekularen Ereignisse im Zusammenhang mit Fraktur Reparatur ist von entscheidender Bedeutung bei der Untersuchung von Knochen Geweberegeneration. Die geschlossenen femoralen Fraktur-Modell bei Mäusen mit intramedulläre Fixierung dient als eine attraktive Plattform zu studieren, Knochen Frakturheilung und bewerten Sie therapeutische Strategien um die Heilung zu beschleunigen.

Einleitung

Frakturen gehören zu den häufigsten Verletzungen am Bewegungsapparat auftreten und sind verbunden mit einer enormen sozio-ökonomischen Belastung, einschließlich der Behandlungskosten, die projiziert werden, um die $ 25 Milliarden jährlich in den Vereinigten Staaten1übertreffen, 2. Obwohl die Mehrheit der Frakturen ohne Zwischenfälle heilen, ist die Heilung mit erheblichen Ausfallzeiten und Produktivitätsverluste verbunden. Etwa 5-10 % aller Frakturen führen eine verzögerte Heilung oder Pseudarthrose, aufgrund des Alters oder andere zugrunde liegende chronische Krankheiten wie Osteoporose und Diabetes Mellitus....

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Protokoll

Die folgende Prozedur wurde mit Genehmigung der Indiana Universität Schule von Medizin institutionelle Animal Care und Nutzung Committee (IACUC) durchgeführt. Alle überleben Operationen wurden unter sterilen Bedingungen durchgeführt, wie von den NIH-Richtlinien beschrieben. Schmerzen und Infektionsrisiko verwaltet wurden mit richtigen Schmerzmittel und Antibiotika, um ein erfolgreiches Ergebnis zu gewährleisten.

1. Anästhesie und Vorbereitung

  1. Wiegen Sie die Maus und Betäuben sie mit einer Mischung von Ketamin (100 mg/kg) und Xylazin (10 mg/kg) verabreicht über die intraperitoneal (i.p.)-Route. Platzieren Sie den Mauszeige....

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Ergebnisse

Die erfolgreiche Durchführung des chirurgischen Eingriffs wurde mit radiologischen Bildgebung überwacht. Wichtige Schritte umfassen die Einfügung eines intramedullären Nadel, die Platzierung von einem Führungsdraht, die Induktion einer quer Fraktur an der femoralen Midshaft und die richtige Stabilisierung mit einem intramedullären Rute (Abbildung 2Aich - 2Aiv). Das heilende Fortschreiten der Fraktur Kallus wurde mit wöchentli.......

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Diskussion

Dieses chirurgische Verfahren soll standardisierten geschlossenen femorale Frakturen bei Mäusen zu generieren. Ein wichtiger Vorteil dieses Modells ist, dass die interne Fixation nach der Generierung der Fraktur, wodurch eine Winkelung der intramedullären Stange stattfindet. Vielleicht ist der wichtigste Aspekt dieses Protokolls die Generation einer standardisierten quer Fraktur an der femoralen Midshaft, da die Fraktur-Geometrie ist abhängig von der angewandten Biegekraft und die Positionierung der hinteren Extremität. .......

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Offenlegungen

Die Autoren dieser Handschrift haben nichts preisgeben. Die weiteren Autoren, die es keine Beschränkungen für den vollen Zugriff auf alle Materialien, die in der Studie berichtet in diesem Manuskript verwendet gibt.

Danksagungen

Diese Arbeit wurde unterstützt durch Zuschüsse aus dem Department of Defense (DoD) uns Army Medical Research und Materiel Command (USAMRMC) vom Kongress gerichtet Medical Research Programme (CDMRP) (PR121604) und das National Institute of Arthritis und Muskel-Skelett und Hautkrankheiten (NIAMS), NIH R01 AR068332, Uma Sankar.

....

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Materialien

Liste der in diesem Artikel verwendeten Materialien
NameUnternehmenKatalognummerKommentare
Oster Minimax TrimmerAnimal World Network78049-100
POVIDON-IODThermo Fisher Scientific395516
OPHTHALMIC SALBEThermo Fisher ScientificNC0490117
Styker T/Pump Warmwasser-UmwälzpumpeKent Scientific CorporationTP-700
1ml Sub-Q SpritzeThermo Fisher Scientific
ENCORE Sensi-Touch PFMoore Medical LLC30347Latex, puderfreier OP-Handschuh
PrecisionGlide 25G InjektionsnadelnThermo Fisher Scientific14-826-49
Ultra-Hochtemperatur-Wolframdraht,McMaster-Carr3775K370,005" Durchmesser, 1/16 lb. Spule, 380' langer
304 Edelstahl, 24G dünnwandiger SchlauchMicrogroup Inc304h24tw-5ft
#15 SkalpellklingenFine Science Tools10015-00
#10 SkalpellklingenFine Science Tools10010-00
SchmalmusterpinzetteFine Science Tools11002-12gezahnt/gerade/12cm
IriszangeFine Science Tools11066-071x2 Zähne/gerade/7cm
Dissector ScissorsFine Science Tools14081-09Slim Blades/Abgewinkelt/Scharf/10cm
Feine SchereFine Science Tools14058-11ToughCut/Straight/Sharp-Sharp/11,5cm
Olsen-Hegar Nadelhalter mit NahtschneiderFine Science Tools12002-12Gerade/gezahnt/12cm/mit Lock
Crile HämostatFine Science Tools13004-14Gezackt/gerade/14cm
WolframdrahtschneiderACE Surgical Supply Co., Inc.08-051-90ACE #150 Drahtschneider, Wolframkarbidspitzen
3-0 VICRYL NahtEthicon NahtJ423H3-0 VICRYL UNGEFÄRBT 27" FS-2 CUTTING
piXarray 100 Digitales ProbenradiographiesystemBioptics, IncSchrank Röntgensystem
Einhorn 3-Punkt-BiegegerätN/AN/ASonderanfertigung
309597

Referenzen

  1. Schnell, S., Friedman, S. M., Mendelson, D. A., Bingham, K. W., Kates, S. L. The 1-Year Mortality of Patients Treated in a Hip Fracture Program for Elders. Geriatric Orthopaedic Surgery & Rehabilitation. 1 (1), 6-14 (2010).
  2. Burge, R., et al.

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Nachdrucke und Genehmigungen

Tags

Geschlossene FemurfrakturKnochenheilungsmodellintramedulläre FixationFrakturchirurgie an Mäusenradiologische BildgebungTorsionsprüfungMikro-CT-AnalyseKallusbildungKnochenregenerationchirurgisches Protokoll