Chronische okulärer Hypertension wird induziert durch die Anwendung einer Circumlimbal Naht bei Ratten und Mäusen, was zu funktionellen und strukturellen Verschlechterung der retinalen Ganglienzellen, die konsistent mit Glaukom.
Ein Abonnement von JoVE ist erforderlich, um diesen Inhalt anzuzeigen. Melden Sie sich an oder beginnen Sie noch heute mit einer kostenlosen Testphase.
Methodenartikel
Ein Modell des Glaukoms induziert durch Circumlimbal Naht bei Ratten und Mäusen
In diesem Artikel
Zusammenfassung
Zusammenfassung
Die Circumlimbal Naht ist eine Technik zur Induktion experimentelle Glaukom bei Nagetieren durch chronisch hochziehen intraokulare Druck (IOP), ein bekannter Risikofaktor für Glaukom. Dieses Protokoll zeigt Schritt für Schritt diese Technik bei langen Evans Ratten und Mäusen C57BL/6. Unter Vollnarkose wird ein "tabaksbeutelnaht" auf die Bindehaut, rund um den Äquator und hinter dem Limbus des Auges angewendet. Das andere Auge dient als einer unbehandelten Kontrolle. Über die Dauer unserer Studie, die einen Zeitraum von 8 Wochen für Ratten und Mäuse 12 Wochen war, blieb IOP erhöhten, Rebound Tonometrie in bewusste Tiere ohne topische Anästhesie regelmäßig gemessen. In beiden Arten zeigte die genähten Augen Elektroretinogramm Features entsprechen bevorzugte innere retinalen Dysfunktion. Optische Kohärenztomographie zeigte selektive Ausdünnung der retinalen nervenfaserschicht. Histologie der Netzhaut Ratte im Querschnitt gefunden reduziert Zelldichte in das Ganglion Zellschicht, aber keine Änderung in anderen zellulären Ebenen. Färbung der Wohnung montiert Maus Netzhaut mit einem Ganglion Zelle spezifische Marker (RBPMS) bestätigt Ganglion Zellverlust. Die Circumlimbal Naht ist eine einfache, minimal invasive und kostengünstigen Weg zur okulären Hypertension induzieren, der zum Ganglion Zelle Verletzung bei Ratten und Mäusen führt.
Einleitung
Tiermodelle zur Verfügung stellen, eine wichtige Plattform für Laboruntersuchung der zellulären Prozesse zugrunde liegenden Glaukom-Pathogenese, sowie über mögliche therapeutische Interventionen zu bewerten. Mehreren induzierbaren Modelle wurden entwickelt, um nachhaltige intraokulare Druck (IOP) Höhe, der wichtigste Risikofaktor für Glaukom zu produzieren. Methoden, die angewendet wurden, um IOP zu erheben sind: hypertone Kochsalzlösung Injektion in Augenhaut Adern1, Laser-Photokoagulation der trabekuläre Geflecht2 oder des limbischen Adern3und intrakameraler Injektion von Substanzen wie Gespenst....
Zugriff eingeschränkt. Bitte melden Sie sich an oder starten Sie eine Testversion, um diesen Inhalt anzuzeigen.
Protokoll
Alle experimentelle Verfahren wurden nach der australischen Code of Practice für die Pflege und Nutzung von Tieren zu Forschungszwecken, festgelegt durch den National Health and Medical Research Council in Australien durchgeführt. Ethik der Genehmigung wurde von Howard Florey Institute Tier Ethikkommission (Genehmigung Nr. 13-044-UM und 13-068-UM für Ratten und Mäuse, beziehungsweise).
1. Augeninnendruck-Messung im bewussten Ratten
- Stellen Sie die Labor-Rebound-Tonometer auf die Ratte-Einstellung. Wickeln Sie die wachte Ratte in einem Stück Tuch, das Tier zu beruhigen. Aussetzen des Kopfes und Halses. Halten Sie sanft den Oberkörp....
Zugriff eingeschränkt. Bitte melden Sie sich an oder starten Sie eine Testversion, um diesen Inhalt anzuzeigen.
Ergebnisse
Die folgenden Ergebnisse in Ratten18 und Mäuse16 zuvor gemeldet wurden und werden hier zusammengefasst. Die Circumlimbal Naht erzeugt ein ähnliches Muster des IOP Höhe bei Ratten und Mäusen (Abbildung 2). Eine kurze IOP Spike, bis zu 58,1 ± 2,7 MmHg bei Ratten und 38,7 ± 2,2 MmHg bei Mäusen wurde unmittelbar nach dem Eingriff Naht gefunden. Bei Ratten IOP Größenordnung allmählich im Laufe der Zeit zu 44 ± 6 MmHg.......
Zugriff eingeschränkt. Bitte melden Sie sich an oder starten Sie eine Testversion, um diesen Inhalt anzuzeigen.
Diskussion
Die Circumlimbal Naht ist ein neues Modell der chronischen okuläre Hypertension. Zusätzlich zu den Studien, aus denen die repräsentativen Ergebnisse aus der Region16,18sind, ist dieses Tiermodell verwendet worden in einer Reihe von aktuellen Studien15,23,24,25 ,26. Vergleich über diese früheren Berich.......
Zugriff eingeschränkt. Bitte melden Sie sich an oder starten Sie eine Testversion, um diesen Inhalt anzuzeigen.
Offenlegungen
Die Autoren haben nichts preisgeben.
Danksagungen
Diese Arbeit wird von National Health und Medical Research Council of Australia Projekt Grant (1046203), Australian Research Council Zukunft Fellowship (FT130100338) finanziert.
....Zugriff eingeschränkt. Bitte melden Sie sich an oder starten Sie eine Testversion, um diesen Inhalt anzuzeigen.
Materialien
| Name | Unternehmen | Katalognummer | Kommentare |
|---|---|---|---|
| normale Kochsalzlösung | Baxter International Inc | AHB1323 | Aufrechterhaltung der Hornhautfeuchtigkeit während der Operation |
| Chlorhexadin 0,5% | Orion Laboratories | 27411, 80085 | Desinfektion von chirurgischen |
| Instrumenten Isofluran 99,9% | Abbott Australasia Pty Ltd | CAS 26675-46-7 | Proprietärer Name: Isoflo(TM) Inhalationsanaästhetikum. Inhalationsanästhetikum in pharmazeutischer Qualität, gemischt mit Sauerstoffgas für Nahteingriffe |
| Augengleitmittel | Alcon Laboratories | 1618611 | Proprietärer Name: Genteal, Augenschmiermittel, um das andere Auge feucht zu halten |
| Nadelhalter (Mikrochirurgie) | World Precision Instruments | 555419NT | Zum Halten der Nadel während einer Augenoperation |
| Proxymetacain 0,5% | Alcon Laboratories | CAS 5875-06-9 | Topische Augenanalgesie |
| Schere (Mikrochirurgie) | World Precision Instruments | 501232 | Zum Schneiden von überschüssigem Nahtstumpf während der Ligatur |
| Chirurgisches Abdecktuch | Vital Medical Supplies | GM29-612EE | Gewährleisten Sie eine sterile Umgebung während der Operation |
| Nahtnadel für Ratten (Mikrochirurgie) | Ninbo medizinische Nadeln | 151109 | 8-0 Nylonnaht mit Rundnadel befestigt, Schneide 3/8, Doppelnadel, Nahtlänge 30 cm |
| Nahtnadel für Mäuse (Mikrochirurgie) | Ninbo medizinische Nadeln | 160905 | 10-0 Nylonnaht mit Rundnadel befestigt, Schneide 3/8, Doppelnadel, Nahtlänge 30 cm |
| Pinzette (Mikrochirurgie) | World Precision Instruments | 500342 | Manipulation von Geweben während der Augenchirurgie |
| Rebound-Tonometer | TONOLAB, iCare, Helsinki, Finnland | TV02 | zur Überwachung des Augeninnendrucks |
Referenzen
- Morrison, J. C., et al. A rat model of chronic pressure-induced optic nerve damage. Experimental Eye Research. 64 (1), 85-96 (1997).
- Feng, L., Chen, H., Suyeoka, G., Liu, X. A laser-induced mouse model of chronic ocular hypertension to characterize visual defects. Journal of Visualized Experiments. (78), (2013).
- Chiu, K.,....
Zugriff eingeschränkt. Bitte melden Sie sich an oder starten Sie eine Testversion, um diesen Inhalt anzuzeigen.
Nachdrucke und Genehmigungen
