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Chemistry

Um eletrodo de Nanopore sem fio fechado-tipo de análise de nanopartículas única

Published: March 20, 2019 doi: 10.3791/59003
* These authors contributed equally

Summary

Aqui, apresentamos um protocolo para a fabricação de um eléctrodo de tipo fechado sem fio nanopore e subsequente medida eletroquímica de nanopartículas único colisões.

Abstract

Medir as características intrínsecas de nanopartículas única por nanoelectrochemistry detém importância fundamental profunda e tem impactos potenciais em Nanociência. No entanto, analisar eletroquimicamente nanopartículas única é um desafio, como o sensoriamento nanointerface é incontrolável. Para responder a este desafio, descrevemos aqui a fabricação e caracterização de um eléctrodo de tipo fechado sem fio nanopore (WNE) que apresenta uma morfologia altamente controlável e excelente reprodutibilidade. Facile fabricação de WNE permite a preparação de nanoelectrodes bem definidas em um laboratório de química geral sem o uso de um equipamento caro e sala limpa. Uma aplicação de 30 nm WNE tipo fechado na análise de nanopartículas de ouro única na mistura também é destacada, que mostra uma alta resolução atual do pA 0,6 e alta resolução temporal de 0.01 MS. acompanhado por sua excelente morfologia e pequenas diâmetros, mais potenciais aplicações de WNEs fechado-tipo podem ser expandidos de caracterização de nanopartículas para detecção de única molécula/íon e sondagem de célula única.

Introduction

Nanopartículas têm atraído grande atenção devido a diversas características tais como a sua capacidade catalítica, características ópticas, electroactivity e elevados rácios de superfície e o volume1,2,3, 4. Análise Eletroquímica de nanopartículas única é um método direto para compreender os processos químicos e eletroquímicos intrínsecos a nível de escala nanométrica. Para obter medições altamente sensíveis de nanopartículas única, duas abordagens eletroquímicas foram aplicadas anteriormente para ler informações de nanopartículas de atual respostas5,6,7. Dentre essas abordagens envolve imobilizando ou capturar uma nanopartícula individual na interface do nanoelectrode para o estudo de electrocatalysis8,9. A outra estratégia é impulsionada por nanopartículas única colisão com a superfície de um eletrodo, que gera uma flutuação transitória atual do processo dinâmico de redox.

Ambos os métodos requerem uma interface sensor ultra-sensível nanoescala que coincide com o diâmetro de nanopartículas único. No entanto, fabricação tradicional de nanoelectrodes principalmente incorporou os sistemas microeletromecânicos (MEMS) ou laser puxando técnicas, que são entediantes e undisciplinable10,11,12, 13. Por exemplo, fabricação de MEMS-baseado de nanoelectrodes é cara e exige o uso de uma sala limpa, restringindo a produção em massa e popularização do nanoelectrodes. Por outro lado, laser puxando a fabricação de nanoelectrodes baseia-se fortemente na experiência dos operadores durante a selagem e puxar um fio de metal dentro do capilar. Se não bem fechado no capilar, o fio de metal a lacuna entre a parede interna do nanopipette e o fio pode introduzir ruído de fundo em excesso atual dramaticamente e ampliar o eletroativos Detetando a área. Estas desvantagens principalmente diminuem a sensibilidade do nanoelectrode. Por outro lado, a existência de uma lacuna pode aumentar a área do eletrodo e reduzir a sensibilidade do nanoelectrode. Como consequência, é difícil garantir um desempenho reprodutível devido as morfologias incontrolável eléctrodo em cada processo de fabricação14,15. Portanto, um método de fabricação geral de nanoelectrodes com excelente reprodutibilidade é urgentemente necessária para facilitar a exploração eletroquímica das características intrínsecas de nanopartículas única.

Recentemente, a técnica de nanopore foi desenvolvida como uma abordagem elegante e livre de rótulo para única molécula análise16,17,18,19,20. Devido à sua fabricação controlável, o nanopipette fornece um confinamento de escala nanométrica, com um diâmetro uniforme, variando de 30-200 nm por um laser capilar extrator21,22,23,24 . Além disso, este procedimento de fabricação simples e reprodutível garante a generalização da nanopipette. Recentemente, propusemos um eletrodo de nanopore sem fio (WNE), que não exige a selagem de um fio de metal dentro do nanopipette. Através de um processo de fabricação facile e reprodutível, o WNE possui um depósito de metal de nanoescala dentro do nanopipette para formar um eletroativos interface25,26,27,28 . Desde que o WNE possui uma estrutura bem definida e morfologia uniforme de seu confinamento, alcança alta resolução atual, bem como a constante de tempo de baixa resistência-capacitância (RC) para a realização de alta resolução temporal. Nós relatamos anteriormente dois tipos de WNEs, tipo aberto e fechado-tipo, para a realização de análise de entidade única. O tipo aberto WNE emprega uma camada nanometal depositada na parede interna de uma nanopipette, que converte a corrente farádica de uma única entidade para o iônico de resposta atual26. Geralmente, o diâmetro de um tipo aberto WNE é cerca de 100 nm. Para diminuir ainda mais o diâmetro do WNE, apresentamos o WNE de tipo fechado, em que um nanotip de metal sólido ocupa totalmente a ponta de nanopipette através de uma abordagem química-eletroquímica. Esse método pode rapidamente gerar um 30 nm ouro nanotip dentro de um confinamento de nanopore. A interface bem definida na área da ponta de um tipo fechado WNE garante uma relação sinal-ruído elevada para medições eletroquímicas de nanopartículas única. Como uma nanopartículas de ouro carregada colide com o WNE de tipo fechado, um processo de carga-descarga ultra rápido na interface ponta induz uma resposta de feedback capacitivo (CFR) no rastreamento atual iônica. Comparado a um anterior nanopartículas única colisão estudo através de um nanoelectrode com metal fio dentro de29, o tipo fechado WNE mostrou uma maior resolução atual do pA de ± 0,1 0,6 pA (RMS) e a maior resolução temporal de 0,01 ms.

Aqui, descrevemos um procedimento de fabricação detalhada para um tipo fechado WNE que controlou altamente dimensões e excelente reprodutibilidade. No presente protocolo, uma reação simples entre AuCl4 e BH4é projetado para gerar um nanotip de ouro que bloqueia completamente o orifício de um nanopipette. Então, bipolar eletroquímica é adotada para o crescimento contínuo de uma nanotip de ouro que atinge o comprimento de vários micrômetros dentro do nanopipette. Este procedimento simples permite a implementação desta fabricação de nanoelectrode, que pode ser realizada em qualquer laboratório de química geral sem um equipamento caro e sala limpa. Para determinar o tamanho, morfologia e estrutura interna de um tipo fechado WNE, este protocolo fornece um procedimento de caracterização detalhada com o uso de um microscópio eletrônico de varredura (MEV) e espectroscopia de fluorescência. Um exemplo recente é destacado, que mede diretamente as interações intrínsecas e dinâmicas de nanopartículas de ouro (AuNPs) colidindo em direção a nanointerface de um tipo fechado WNE. Acreditamos que o tipo fechado WNE pode abrir um novo caminho para futuros estudos eletroquímicos de células vivas, nanomateriais e sensores de nível único-entidade.

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Protocol

1. preparação de soluções

Nota: Preste atenção às precauções gerais de segurança para todos os produtos químicos. Descarte de produtos químicos em uma coifa e usar luvas, óculos e um jaleco. Manter líquidos inflamáveis, longe do fogo ou faíscas. Todas as soluções aquosas foram preparadas com água ultrapura (18,2 MΩ cm a 25 ° C). As soluções preparadas foram filtradas usando um filtro de tamanho de poros de 0,22 μm.

  1. Preparação da solução de KCl
    1. Dissolva 0,074 g de cloreto de potássio em 100 mL de água desionizada.
  2. Preparação da solução de4 NaBH
    1. Dissolva 0,018 g de borohidreto de sódio em 10 mL de etanol.
  3. Preparação da solução de4 HAuCl
    1. Dissolva 0,010 g de cloreto de potássio em 1 mL de solução de Ácido cloroáurico 1%.
  4. Preparação de borracha de silicone
    1. Misture a borracha de silicone, que contém a parte A e parte B (ver Tabela de materiais) na proporção de 1:1 em volume.
    2. Use a borracha de silicone misturadas para pintar uma área de reação no slide imediatamente durante o tempo de pote de 1 min.
    3. Cure a borracha do silicone preparado no slide por 5 min.
  5. Preparação de nanopartículas de ouro30
    1. Adicione 4,8 mL Ácido cloroáurico com uma fração em massa de 1% a 40 mL de água desionizada com agitação vigorosa.
    2. Aqueça a solução à ebulição.
    3. Adicione 10 mL de uma solução de citrato trissódico com uma fração em massa de 1% na solução.
    4. Aquece a solução para um adicional 15 min até a solução final é vermelha na cor.
      Nota: No nosso caso, a solução de Ácido cloroáurico foi rapidamente reduzida em citrato trissódico, e observou-se que a solução rapidamente mudou de amarelo-claro a escuro-preto.

2. preparação da instalação Experimental

  1. Preparação do atual sistema de medição
    1. Ligue o sistema de medição atual contendo o amplificador atual (consulte a Tabela de materiais) e sistema de aquisição de dados de baixo ruído (ver Tabela de materiais)
    2. Ligue o modo de tensão-braçadeira.
    3. Defina a largura de banda do filtro à taxa de 10 kHz e amostragem de 100 kHz.
    4. Montar uma gaiola cobre caseira específica concebida para proteger o ruído externo para células experimentais e o pré-amplificador no microscópio invertido (ver Tabela de materiais).
    5. Aterre o shell da gaiola de Faraday, conchas do amplificador e sistema de microscópio invertido.
  2. Instalação do sistema de detecção de campo escuro
    1. Geração do ouro nanotip dentro do nanopipette é monitorada pelo microscópio de campo escuro –.
      Nota: Um sistema de microscópio invertido (ver Tabela de materiais) é usado para tirar imagens e espectros de dispersão. Uma câmera de CCD digital verdadeiro-cor é empregada para tirar fotos do eletrodo nanopipette e nanopore. Um condensador de campo escuro [abertura numérica (NA) = 0,8 – 0,95)] é utilizado para formar uma iluminação de campo escuro. 10 X (at = 0.3), 20 X (at = 0,45) e 40 X (at = 0.6) objectivos são usados para coletar imagens de WNE o tipo fechado. Detecção de fluorescência é usada mais, verificar se existem lacunas entre a nanotip e a parede interna do nanopipette. Esta experiência é realizada por outro EMCCD (ver Tabela de materiais) também integrado no microscópio invertido, e a luz de excitação é uma lâmpada de mercúrio incorporado com um filtro passa-faixa de 450-490 nm.

3. fabricação de tipo fechado WNE

  1. Fabricação de nanopipettes
    1. Colocar os capilares de quartzo (ver Tabela de materiais) em um tubo de centrífuga de 15 mL cheio com acetona por 10 min de limpeza ultra-sônica.
    2. Decantar a acetona e, em seguida, adicionar etanol no tubo de centrífuga mesmo.
    3. Colocar o tubo de centrifugação em um líquido de limpeza ultra-sônico para 10 min de limpeza.
    4. Colocar os capilares no outro tubo de centrífuga de 15 mL com água desionizada para remoção do etanol, com 10 min de limpeza ultra-sônica.
    5. Ultra-sônico continuamente limpo os capilares três vezes com água desionizada para remover o etanol residual.
    6. Seque os capilares usando um fluxo de gás nitrogênio.
    7. Manter os capilares num tubo de centrífuga, limpa e nova.
    8. Ligue o extrator de laser CO2 (ver Tabela de materiais)
    9. Pré-aqueça o extrator para 15-20 min garantir uma potência constante do laser.
    10. Instale o capilar limpo no puxador.
    11. Defina os parâmetros puxando de calor do filamento, velocidade, atraso e força de tracção no painel do extrator de laser CO2 para um diâmetro específico. O parâmetro detalhado para puxar um 30 nm de diâmetro nanopipette neste protocolo é mostrado na tabela 1 (Figura 1).
    12. Corrigir o nanopipette preparado em uma placa de Petri com o adesivo reutilizável (veja a Tabela de materiais) para a caracterização mais.
  2. Fabricação de fechado-tipo WNE
    1. Injecte 10 μL da solução preparada de4 HAuCl do nanopipette com um microloader.
    2. Centrifugue a nanopipette por 5 min a cerca de 1878 x g para a remoção de bolhas de ar na nanopipette.
      Nota: Para este passo, colocamos o nanopipette com a ponta virada para baixo em um suporte caseiro dentro de um tubo de centrífuga de 2 mL.
    3. Corrigir o nanopipette em uma lamela com a borracha de silicone preparado (consulte a etapa 1.4) e definir a área dentro do nanopipette como o lado "cis" e como o "trans" do lado de fora.
    4. Espere 5 minutos até que a borracha seja curada.
    5. Coloca o conjunto integrado na tabela objetiva do microscópio invertido.
    6. Ativar e ajustar a iluminação de campo escuro para focalizar a ponta nanopipette sob um objectivo de microscópio X 10.
    7. Alterar para 20 X e 40 X objetivos, para uma maior resolução espacial.
    8. Coloque um eletrodo de Ag/AgCl dentro do nanopipette.
    9. Coloque o eletrodo de Ag/AgCl outros aterrado para o lado de trans .
    10. Conecte um par de eletrodos de Ag/AgCl o pré-amplificador.
    11. Ligue o sistema de medição atual e o software correspondente (ver Tabela de materiais) para a gravação de corrente iônica.
    12. Definir o potencial aplicado a 300 mV.
    13. Adicione lentamente 150 μL de solução de4 NaBH no lado trans para desencadear a reação entre HAuCl4 e NaBH4 (Figura 2).
      Nota: A redução de NaBH4 em solução aquosa ocorre a uma taxa de reação violenta. Portanto, a geração de H2 o redução da NaBH4 pode induzir a uma estrutura defeituosa da nanotip pela geração de cáries durante o crescimento de ouro nanotip.
    14. Simultaneamente, eletricamente e opticamente gravar o rastreamento atual e o campo escuro imagem/dispersão espectros usando os atuais medição e campo escuro sistemas de detecção (Figura 3).
      Nota: A solução de etanol é volátil sob iluminação de campo escuro. Preste atenção para o volume de etanol durante o processo de fabricação.
    15. Desligue o potencial aplicado após iônica atual rastreamento volta a 0 PA.
    16. Lave o preparado WNE tipo fechado com fluindo deionizada do fundo para a ponta.
  3. Caracterização de fechado-tipo WNE
    1. Caracterizar o tipo fechado WNE com um microscópio eletrônico de varredura (MEV), que é um método geral para a caracterização da nanopipettes22,31,32,33,34 .
    2. Use um experimento fluorescente de íons cálcio para verificar a condição da selagem do ouro nanotip dentro do nanopipette.
      1. Injecte 10 μL de solução de CaCl2 lado cis da solução WNE e Fluo-8 tipo fechado no lado de trans .
      2. Conecte os eletrodos de Ag/AgCl o headstage.
    3. Aplique um viés de 400 mV potencial e usar o EMCCD (consulte a Tabela de materiais) para monitorar a resposta de fluorescência na área de ponta. Use o feixe de íons de foco (FIB) para esculpir o tipo fechado WNE da ponta ao fundo e, em seguida, determinar o comprimento da camada interior metálica ou nanotip com caracterização de SEM.
  4. Nanopartículas única colisão com WNE tipo fechado
    1. Altere a solução nas laterais trans e cis para uma solução de KCl após a fabricação de WNE o tipo fechado.
    2. Transferi 50 μL de solução de nanopartículas de ouro 30 nm para o lado de trans . Gravar o sinal da corrente de eventos de colisão de nanopartículas único em um potencial de 300 mV (Figura 5).
    3. Altere a tensão aplicada para monitorar a frequência, amplitude e mudança de forma do sinal atual.

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Representative Results

Vamos demonstrar uma abordagem superficial para fabricar um bem definido 30 nm nanopore sem fio eléctrodo com base em um nanopipette cônico de quartzo. A fabricação de um nanopipette é demonstrada na Figura 1, que inclui três etapas principais. Uma conta com um diâmetro interno de 0,5 mm e diâmetro externo de 1,0 mm é fixada no puxador e, em seguida, um laser é focado no centro do capilar para derreter o quartzo. Aplicando forças aos terminais do capilar, ele finalmente separa e forma duas partes com pontas cônicas nanoescala. Os parâmetros puxando são fornecidos na tabela 1 para fabricar 30 nm nanopipettes em nosso laboratório. Note-se que os parâmetros podem variar de extratores diferentes do laser. Experimentadores devem ajustar os parâmetros de acordo com a potência do laser, temperatura e umidade. Após a fabricação, caracterização SEM é necessário para verificar o verdadeiro diâmetro do nanopipette.

A Figura 2 mostra o processo de gerar um nanotip de ouro dentro da ponta de nanopipette após o processo de puxar. Primeiro, o AuCl4 dentro do nanopipette é consistentemente reduzido em BH4 para gerar um nanotip de ouro até a abertura do nanopipettes é totalmente bloqueada. Em seguida, a eletroquímica bipolar promove o crescimento do nanotip de ouro. Usamos um sistema de caracterização in situ para monitorar o processo de fabricação de WNE o tipo fechado por gravação simultânea das imagens atuais de resposta e campo escuro (Figura 3). Quanto a caracterização de SEM, a Figura 4 mostra imagens de vista superior SEM de nanopipette nua e WNE tipo fechado. Após a separação de FIB, um lado ver SEM imagem fornece a morfologia do nanotip de ouro dentro do tipo fechado WNE. Nas experiências de colisão de single-nanopartículas, as nanopartículas de ouro são adicionadas ao lado do WNE trans . O desempenho proeminente ruído deste CNE revela os ocultos sinais com uma frequência de sinal elevado (Figura 5).

Figure 1
Figura 1: fabricação de nanopipettes. O processo de fabricação é a seguinte: passo 1) instalar uma conta em um extrator do laser; Passo 2) aqueça no meio do capilar com laser CO2 e aplicar força nas extremidades do capilar para puxá-lo; e o passo 3) capilar afila-se para baixo e separa em dois nanopipettes simétricas em vários segundos. Clique aqui para ver uma versão maior desta figura.

Figure 2
Figura 2: fabricação do tipo fechado WNE. Passo 1) HAuCl4 e NaBH4 soluções são adicionadas para os lados de cis e trans da nanopipette, respectivamente. AuCl4 é reduzido em BH4 para gerar o ouro no orifício nanopipette. Passo 2) depois que o orifício é bloqueado por ouro gerado, a reação eletroquímica bipolar ocorre com potencial para crescimento do nanotip de ouro aplicado. Passo 3) A tipo fechado WNE finalmente é fabricada com um micrômetro de comprimento nanotip de ouro. Esta figura foi modificada com a permissão do anterior trabalho25. Clique aqui para ver uma versão maior desta figura.

Figure 3
Figura 3: simultânea elétrica monitoramento e gravação de dispersão durante a fabricação de WNE tipo fechado. (A) após adição de NaBH4 no lado trans da nanopipette, a corrente cai imediatamente de 0 PA. Em seguida, o rastreamento atual experimenta uma transição rápida devido a geração de ouro. Após 150 ~ s, a corrente retorna a 0 pA, demonstrando o bloqueio completo do nanopipette. Imagens de campo escuro (B) durante a fabricação WNE em momentos correspondentes de 0 s, 10 s, 100 s e 150 s. Esta figura foi modificada com a permissão do anterior trabalho25. Clique aqui para ver uma versão maior desta figura.

Figure 4
Figura 4: caracterizações SEM do tipo fechado WNE e nanopipette. (A) imagem de SEM vista superior de uma nanopipette puxada com um diâmetro de 30 nm. (B) vista superior SEM imagem WNE um tipo fechado com um diâmetro de 30 nm. (C) imagem de exibição SEM lado de um tipo fechado WNE após a FIB divisão da ponta na parte de trás do nanopipette. Clique aqui para ver uma versão maior desta figura.

Figure 5
Figura 5: simples detecção de colisão de nanopartículas com WNE um tipo fechado. (A) 30 nm ouro nanopartículas são adicionadas à solução lado trans . Um par de eletrodos de Ag/AgCl são empregados para aplicar um potencial viés de 300 mV. Inserção: um sinal típico de pico de uma colisão de nanopartículas de ouro 30 nm. (B) um traço atual sem nanopartículas e depois da adição de nanopartículas de ouro nm 30 no lado trans de WNE o tipo fechado. Esta figura foi modificada com a permissão do anterior trabalho25. Clique aqui para ver uma versão maior desta figura.

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Discussion

Fabricação de um nanopipette bem definido é o primeiro passo no processo de fabricação WNE tipo fechado. Centrando-se um laser de CO2 para o centro do capilar, um capilar separa em dois nanopipettes simétricos com pontas cônicas nanoescala. O diâmetro é facilmente controlado, variando de 30-200 nm, ajustando os parâmetros do extrator a laser. É de notar que os parâmetros para puxar podem variar para extratores de pipeta diferente. A temperatura ambiental e umidade também podem influenciar o diâmetro final do nanopipette.

Após a fabricação da nanopipette, uma reação química gera o sólido nanotip dentro do nanopipette. Neste protocolo, um nanotip de ouro é formado pela redução de HAuCl4; outros nanotips de metal podem ser fabricados através da concepção de reações correspondentes. Depois de completo bloqueio da ponta de nanopipette, a polarização eletroquímica do nanotip gerado ouro promove seu crescimento de acordo com bipolar eletroquímica. Um sistema de caracterização electro-ópticos in situ é então construído para conseguir gravações simultâneas dos traços atuais e ópticas informações durante o processo de crescimento do nanotip de ouro.

Para a caracterização, deteção de fluorescência de íons de cálcio ajuda a verificar se a lacuna é gerada entre a parede interna da pipeta e o nanotip de ouro. Para um WNE bem definido do tipo fechado, a área de ponta deve ser invariavelmente escura da imagem de fluorescência. Além disso, SEM pode ser usado para caracterizar o nanopipette e o WNE tipo fechado. FIB pode ser empregada para esculpir ao longo da parede do tipo fechado WNE para expor o metal interno para a geração de imagens SEM subsequente. Portanto, a estrutura de perto-tipo WNE comprimento e interior pode ser determinada. Após sua caracterização, o WNE tipo fechado bem preparado é capaz de ser usado para outras aplicações.

Este protocolo de tipo fechado WNE abre um novo caminho para medições eletroquímicas de nanopartículas única com alta reprodutibilidade. No entanto, ainda existem alguns desafios e limitações neste processo de fabricação. A primeira limitação envolve o diâmetro da ponta do nanopipette. Teoricamente, quando o diâmetro da ponta diminui para um tamanho único-molécula, a resolução atual pode ser drasticamente melhorada. No entanto, é um desafio para puxar um nanopipette com um diâmetro de menos de 30 nm, com a estratégia de puxar existente.

O potencial deste protocolo de WNE tipo fechado pode ser expandido para aplicações práticas em nanosensing. Incorporando o nanoelectrodes tradicional com um microscópio eletroquímico, o tipo fechado WNE pode revelar mapeamento dinâmico de eletroquímico para algum especiais 2-D/3-D nanomateriais. Além disso, a dispersão de ressonância plasmônico de nanotip o ouro pode ser usada para detectar simultaneamente o processo de transferência de elétrons por tanto elétrica leitura e gravação óptica. Em virtude de suas propriedades geométricas, o WNE tipo fechado com um nanotip cônico é adequado para análise celular com baixo dano mecânico.

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Disclosures

Os autores declaram não há conflitos de interesses.

Acknowledgments

Esta pesquisa foi apoiada pela Fundação Nacional de ciências naturais da China (61871183,21834001), inovação programa de Shanghai Municipal educação Comissão (2017-01-07-00-02-E00023), o projeto "Chen Guang" da educação Municipal Xangai Comissão e Fundação de desenvolvimento de educação de Shanghai (17CG 27).

Materials

Name Company Catalog Number Comments
Acetone Sigma-Aldrich 650501 Highly flammable and volatile
Analytical balance Mettler Toledo ME104E
Axopatch 200B amplifier Molecular Devices
Blu-Tack reusable adhesive Bostik
Centrifuge tube Corning Inc. Centrifuge Tubes with CentriStar Cap, 15 ml
Chloroauric acid Energy Chemical E0601760010 HAuCl4
Clampfit 10.4 software Molecular Devices
Digidata 1550A digitizer Molecular Devices
DS Fi1c true-color CCD camera Nikon
Ecoflex 5 Addtion cure silicone rubber Smooth-On 17050377
Eppendorf Reference 2 pipettes Eppendorf 492000904 10, 100 and 1000 µL
Ethanol Sigma-Aldrich 24102 Highly flammable and volatile
Faraday cage Copper
iXon 888 EMCCD Andor
Microcentrifuge tubes Axygen Scientific 0.6, 1.5 and 2.0 mL
Microloader Eppendorf 5242 956.003 20 µL
Microscope Cover Glass Fisher Scientific LOT 16938 20 mm*60 mm-1 mm thick
Milli-Q water purifier Millipore SIMS00000 Denton Electron Beam Evaporator
P-2000 laser puller Sutter Instrument
Pipette tips Axygen Scientific 10, 200 and 1,000 µL
Potassium chloride,+D25+A2:F2+A2:F25 Sigma Aldrich P9333-500G KCl
Quartz pipettes Sutter QF100-50-7.5 O.D.:1.0 mm, I.D.:0.5 mm, 75 mm length
Refrigerator Siemens
Silicone thinner Smooth-On 1506330
Silver wire Alfa Aesar 11466
Sodium borohydride, Tianlian Chem. Tech. 71320 NaBH4
Ti-U inverted dark-field microscope Nikon

DOWNLOAD MATERIALS LIST

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Gao, R., Cui, L. F., Ruan, L. Q., Ying, Y. L., Long, Y. T. A Closed-Type Wireless Nanopore Electrode for Analyzing Single Nanoparticles. J. Vis. Exp. (145), e59003, doi:10.3791/59003 (2019).

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