Summary
هنا نصف بروتوكول خطوة بخطوة من إزالة ربط الشريان الأورطي الجراحي في نموذج الفئران الراسخة من انقباض الأبهر. هذا الإجراء لا يسمح فقط دراسة الآليات الكامنة وراء إعادة عرض عكس البطين الأيسر والتراجع من تضخم ولكن أيضا لاختبار الخيارات العلاجية الجديدة التي قد تسرع الانتعاش عضلة القلب.
Abstract
لفهم أفضل لإعادة عرض البطين الأيسر (LV) العكسي (RR) ، نصف نموذج القوارض حيث ، بعد إعادة عرض LV الناجم عن النطاق الأبهري ، تخضع الفئران ل RR عند إزالة الانقباض الأبهري. في هذه الورقة، نقوم بوصف إجراء خطوة بخطوة لإجراء إزالة ربط الأبهر الجراحية طفيفة التوغل في الفئران. تم استخدام تخطيط صدى القلب في وقت لاحق لتقييم درجة تضخم القلب والخلل الوظيفي أثناء إعادة عرض LV وRR وتحديد أفضل توقيت لإزالة النطاق الأبهري. وفي نهاية البروتوكول، أجري تقييم ديناميائي نهائي لوظيفة القلب، وتم جمع عينات للدراسات النسيجية. أظهرنا أن يرتبط debanding مع معدلات البقاء على قيد الحياة الجراحية من 70-80٪. وعلاوة على ذلك، بعد أسبوعين من إزالة النطاق، يؤدي الانخفاض الكبير في الحمل البطيني إلى تراجع تضخم البطين (~20٪) والتليف (~ 26٪)، واستعادة الخلل الانبساطي كما تم تقييمها من خلال تطبيع ملء البطين الأيسر والضغوط الانبساطية النهائية (E/e' وLVEDP). إزالة النطاق الأبهري هو نموذج تجريبي مفيد لدراسة LV RR في القوارض. مدى الانتعاش عضلة القلب متغير بين المواضيع, ولذلك, محاكاة تنوع RR التي تحدث في السياق السريري, مثل استبدال الصمام الأبهري. نستنتج أن نموذج النطاقات الأبهري / debanding يمثل أداة قيمة لكشف رؤى جديدة في آليات RR ، وهي تراجع تضخم القلب وانتعاش الخلل الانبساطي.
Introduction
انقباض الشريان الأورطي العرضي أو التصاعدي في الماوس هو نموذج تجريبي يستخدم على نطاق واسع لضغط تضخم القلب الناجم عن الحمل الزائد ، والخلل الانبساطي والانقباضي وفشل القلب1،2،3،4. تضيق الأبهر يؤدي في البداية إلى تضخم البطين الأيسر التعويضي (LV) متحد المركز لتطبيع الإجهادالجداري 1. ومع ذلك ، في ظل ظروف معينة ، مثل الحمل الزائد للقلب لفترات طويلة ، فإن هذا الضمور غير كاف لتقليل إجهاد الجدار ، مما يؤدي إلى خلل انبساطي وانقباضي (تضخم مرضي)5. بالتوازي، تؤدي التغيرات في المصفوفة خارج الخلية (ECM) إلى ترسب الكولاجين والربط المتقاطع في عملية تعرف باسم التليف، والتي يمكن تقسيمها إلى تليف بديل وتليف تفاعلي. التليف هو، في معظم الحالات، لا رجعة فيه والتنازلات الانتعاش عضلة القلب بعد الإغاثة الزائد6،7. ومع ذلك، كشفت دراسات التصوير بالرنين المغناطيسي القلب الأخيرة أن التليف التفاعلي قادر على التراجع على المدى الطويل8. بالإجمال، التليف، تضخم وخلل القلب هي جزء من عملية تعرف باسم إعادة عرض عضلة القلب التي تتقدم بسرعة نحو فشل القلب (HF).
أصبح فهم ميزات إعادة عرض عضلة القلب هدفا رئيسيا للحد من تطوره أو عكسه ، وهذا الأخير يعرف باسم إعادة عرض عكسي (RR). ويشمل مصطلح RR أي تغيير عضلة القلب عكس مزمن من قبل تدخل معين، مثل العلاج الدوائي (على سبيل المثال، الأدوية الخافضة للضغط)، جراحة الصمام (على سبيل المثال، تضيق الأبهر) أو أجهزة مساعدة البطين (على سبيل المثال، HF المزمن). ومع ذلك، غالبا ما تكون RR غير مكتملة بسبب تضخم السائدة أو الانقباضي / الانبساطي الخلل الوظيفي. وبالتالي ، فإن توضيح الآليات الأساسية لRR والاستراتيجيات العلاجية الجديدة لا يزال مفقودا ، ويرجع ذلك في الغالب إلى استحالة الوصول إلى أنسجة عضلة القلب البشرية ودراسةها أثناء RR في معظم هؤلاء المرضى.
للتغلب على هذا القيد ، لعبت نماذج القوارض دورا كبيرا في تعزيز فهمنا لمسارات الإشارات المشاركة في تطور HF. على وجه التحديد، يمثل إزالة ربط الأبهر للفئران مع انقباض الأبهر نموذجا مفيدا لدراسة الآليات الجزيئية الكامنة وراء LV السلبية إعادة عرض9 و RR10،11 لأنها تسمح بجمع عينات عضلة القلب في نقاط زمنية مختلفة في هاتين المرحلتين. وعلاوة على ذلك، فإنه يوفر بيئة تجريبية ممتازة لاختبار الأهداف الجديدة المحتملة التي يمكن أن تعزز / تسريع RR. على سبيل المثال، في سياق تضيق الأبهر، قد يوفر هذا النموذج معلومات حول الآليات الجزيئية المشاركة في التنوع الهائل للاستجابة عضلة القلب الكامنة وراء (في) اكتمال RR6،12، وكذلك ، التوقيت الأمثل لاستبدال الصمام ، والذي يمثل عيبا كبيرا في المعرفة الحالية. والواقع أن التوقيت الأمثل لهذا التدخل هو موضوع نقاش، ويرجع ذلك أساسا إلى أنه محدد على أساس حجم التدرجات الأبهرية. العديد من الدراسات الدعوة إلى أن هذه النقطة الزمنية قد يكون متأخرا جدا لانتعاش عضلة القلب والتليف والخلل الانبساطي وغالبا ما تكون موجودة بالفعل12.
على حد علمنا، هذا هو النموذج الحيواني الوحيد الذي يلخص عملية إعادة عرض كل من عضلة القلب وRR تجري في ظروف مثل تضيق الأبهر أو ارتفاع ضغط الدم قبل وبعد استبدال الصمام أو بداية الأدوية المضادة لارتفاع ضغط الدم، على التوالي.
سعيا إلى التصدي للتحديات الموجزة أعلاه، فإننا نصف نموذجا جراحيا للحيوانات يمكن تنفيذه في الفئران والجرذان على حد سواء، ومعالجة الاختلافات بين هذين النوعين. نحن نصف الخطوات والتفاصيل الرئيسية التي ينطوي عليها تنفيذ هذه العمليات الجراحية. وأخيرا، فإننا نبلغ عن أهم التغييرات التي تحدث في LV مباشرة قبل و طوال RR.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Protocol
وتمتثل جميع التجارب على الحيوانات لدليل رعاية واستخدام المختبرات (منشور المعاهد القومية للصحة رقم 85-23، المنقح لعام 2011) والقانون البرتغالي بشأن رعاية الحيوان (DL 129/92، DL 197/96؛ P 1131/97). ووافقت السلطات المحلية المختصة على هذا البروتوكول التجريبي (018833). تم الحفاظ على الفئران C57B1/J6 الذكور البالغ من العمر سبعة أسابيع في أقفاص مناسبة ، مع بيئة دورة خفيفة داكنة منتظمة 12/12 ساعة ، ودرجة حرارة 22 درجة مئوية ورطوبة 60٪ مع إمكانية الحصول على الماء ونسبة قياسية من الحمية الإعلانية libitum.
1. إعداد المجال الجراحي
- تطهير موقع العملية مع الكحول 70٪ ووضع غطاء طاولة غرفة العمليات المتاح على المنطقة الجراحية.
- تعقيم جميع الأدوات قبل الجراحة.
ملاحظة: يتطلب هذا الإجراء مقص جراحي صغير، 2 ملقط منحني ناعم، 3 ملقط مستقيم ناعم، مشرط، ملقط صغير، مقص تشريح الزاوية، حامل إبرة، مساعدة ربط فائق الدقة، 2 hemostats، وأخيرا، ينصح بشدة نظام سحب المثبت المغناطيسي(الشكل 1A). - منحنى غيض من إبرة 26 G حاد إلى 90 درجة لنهج أسهل إلى الشريان الأورطي. وهناك إبرة 26 G خلق تضيق الأبهر قطرها 0.45 ملم (الشكل 1B).
- ضبط درجة حرارة وسادة التدفئة إلى 37 ± 0.1 درجة مئوية.
2. إعداد الفئران والتنبيب
- تخدير الفئران C57B1/J6 الشباب (20-25 غرام) عن طريق استنشاق 8٪ sevoflurane مع 0.5 - 1.0 لتر / دقيقة 100٪ O2 في أنبوب مخروط.
- تحقق من عمق التخدير باستخدام إصبع القدم قرصة الانسحاب منعكس.
- ضع الماوس في شغل الظهر على لوحة مائلة والمضي قدما في التنبيب orotracheal.
- حرك الماوس إلى لوحة التدفئة واربط أنبوب القصبة الهوائية بجهاز التنفس الصناعي بسرعة لبدء التهوية الميكانيكية.
- ضبط معلمات جهاز التنفس الصناعي إلى تردد 160 نفسا / دقيقة وحجم المد والجزر من 10 مل / كغ.
3. التحضير لعملية جراحية (لكل من العصابات وإزالة ربط العصابات العمليات الجراحية)
- حلاقة وتطبيق كريم إزالة الشعر من خط العنق إلى مستوى منتصف الصدر من الفئران.
- ضعي جل العيون على عيون الحيوانات لمنع جفاف القرنية.
- ضع مسبار المستقيم ومقياس الأوكسيمتر في مخلب أو ذيل لرصد درجة الحرارة وأوكسجين الدم، ومعدل ضربات القلب، على التوالي.
ملاحظة: التخدير يحفز انخفاض حرارة الجسم كبيرة، لذلك، من المهم للحفاظ على درجة حرارة الجسم الطبيعية أثناء الجراحة لتجنب انخفاض سريع في معدل ضربات القلب. - الحفاظ على التخدير مع سيفوفلوران (2.0 - 3.0٪). تحقق من المستوى الصحيح للتخدير بسبب عدم وجود منعكس إصبع القدم قرصة.
- ضع الفئران في الطيات الجانبية اليمنى على وسادة التدفئة وتأمين الأطراف إلى نظام تراجع المثبت المغناطيسي بشريط للحفاظ على الحيوان في الوضع الصحيح أثناء الجراحة (الشكل 2، الشكل 3A).
- تطهير الصدر الماوس مع الكحول 70٪ تليها محلول بروفيدون اليود.
4. تصاعدي جراحة النطاقات الأبهري
ملاحظة: للحصول على وصف مفصل للبروتوكول،راجع 2و3و4و13.
- باستخدام شفرة يمكن التخلص منها، قم بإجراء شق جلدي صغير (~0.5 سم) على الجانب الأيسر أسفل مستوى المحور مباشرة وتشريح الجلد.
- تشريح بلطف وفصل عضلات الصدر وغيرها من طبقات العضلات حتى تصبح الأضلاع مرئية. استخدام ملقط ناعم وتجنب قطع العضلات.
- تحت المجهر، حدد المساحات الوربية وافتح شقا صغيرا بين المساحة الوربية الثانيةوالثلاثة مع ملقط ناعم.
- تراجع عن الأضلاع عن طريق وضع الصدر الناسح (الشكل 2A).
- استخدم ملقط صغير لتشريح الفصوص الصدغية وفصلها برفق حتى يصبح الشريان الأورطي الصاعد مرئيا.
ملاحظة: يجب أن تكون محفزات القطن مفيدة في حالة النزيف. يجب إعطاء المالحة المعقمة الدافئة تحت الجلد في حالة حدوث نزيف كبير (على سبيل المثال ، الشريان الثديي). - استخدام ملقط صغير لتشريح بلطف الشريان الأورطي.
ملاحظة: يعتبر الشريان الأورطي أن تشريح عندما لا يكون هناك الدهون أو الالتصاقات الأخرى حوله وأنه من الممكن لتطويق بسهولة السفينة مع ملقط منحنى صغير. - بعد تشريح الأبهر، ضع ربط البولي بروبلين 7-0 حول الشريان الأورطي باستخدام مساعدات الربط والملقط المنحني(الشكل 2B).
- موقف إبرة 26 G حاد موازية إلى الشريان الأورطي (تلميح وأشار نحو رأس الفئران) (الشكل 2B). للفئران وزنها 20-25 غرام، هذه الإبرة يحفز انقباض الأبهر 65-70٪ قابلة للاستنساخ.
- جعل 2 عقدة فضفاضة حول الشريان الأورطي وإبرة 26 G مع مساعدة من 2 ملقط (الشكل 2B).
- تشديد عقدة1 st و، بسرعة بعد، عقدة2. تأكد لفترة وجيزة من تحديد المواقع الصحيحة للانقباض وإزالة الإبرة بسرعة لاستعادة تدفق الدم الأبهري. وأخيرا، جعل عقدة3 rd (مجموعة BA).
- إعادة وضع الغدة الصعترية والعضلات في وضعها الأولي.
- إجراء صوري مطابق لإجراء الانقباض ولكن الحفاظ على خياطة فضفاضة حول الشريان الأورطي (مجموعة شام).
- قطع نهايات خياطة وإزالة الصدر النازل.
ملاحظة: قد تزيد نهايات الخياطة القصيرة من احتمال تخفيف العقدة مع الضغط الأبهري ، في حين أن النهايات الطويلة تجعل إجراء إزالة النطاقات أكثر خطورة حيث يمكن أن تحدث الالتصاقات بين الغرز والأذين الأيسر. - أغلق جدار الصدر باستخدام خياطة البولي بروبلين 6-0 مع خياطة بسيطة متقطعة أو مستمرة باستخدام أقل عدد ممكن من الغرز. تشديد عقدة الصدر الماضي مع الرئتين تضخم في نهاية الإلهام عن طريق مقروص قبالة تدفق جهاز التنفس الصناعي لمدة 2S لإعادة تضخيم الرئتين.
- أغلق الجلد بخياطة حرير/بولي بروبلين 6-0 في نمط خياطة مستمر.
ملاحظات: إذا تم استخدام جهاز التنفس الصناعي أحدث، فمن الممكن برمجته لوقفة في الإلهام (الإعداد المتقدمة وقفة إلهام)
5. الرعاية بعد العملية الجراحية
- تطبيق محلول بروفيدون اليود على موقع خياطة الجلد.
- للحصول على مسكن مناسب ، يمكنك إعطاء البوبرينورفين تحت الجلد 0.1 ملغ / كجم ، مرتين يوميا ، حتى يتعافى الحيوان تماما (عادة بعد 2-3 أيام من الجراحة).
- حقن المحلول الملحي المعقم intraperitoneally لمنع الجفاف في حالة حدوث نزيف كبير أثناء الجراحة.
- إيقاف التخدير (دون deintubating الماوس) والانتظار حتى الحيوان استرداد ردود الفعل (حركات شعيرات هي إشارة الصحوة) ويبدأ في التنفس تلقائيا.
- إزالة قنية القصبة الهوائية.
- دع الحيوان يتعافى في حاضنة عند 37 درجة مئوية.
- عودة الحيوان إلى غرفة دورة ضوء / الظلام 12 ساعة بعد الشفاء التام.
6. جراحة إزالة النطاق الأبهري
- بعد سبعة أسابيع ، قم بإزالة ربط الشريان الأورطي في نصف BA وإزالة الغرز الفضفاض من نصف فئران SHAM ، مما أدى إلى مجموعتين جديدتين - debanding (DEB) وdebanding SHAMA (DESHAM) ، على التوالي. يمثل DESHAM عنصر التحكم لمجموعة DEB(الشكل 4).
- كرر جميع الخطوات 2.1 إلى 3.6 المذكورة أعلاه.
- تشريح بلطف الأنسجة والالتصاقات والتليف حول الشريان الأورطي حتى يصبح انقباضه مرئية.
- تشريح بعناية الشريان الأورطي وفصل خياطة من الشريان الأورطي. قطع خياطة مع الزاوية مقص الربيع واحد بحث(الشكل 3باء).
- أغلق جدار الصدر باستخدام خياطة البولي بروبلين 6-0 مع خياطة بسيطة متقطعة أو مستمرة باستخدام الحد الأدنى من الغرز الممكنة.
ملاحظة: حاول شد آخر خياطة في الصدر عندما يتم نفخ الرئتين لتجنب استرواح الصدر. - أغلق الجلد بخياطة حرير/بولي بروبلين 6-0 في نمط خياطة مستمر.
- إجراء جميع إجراءات الرعاية بعد العملية الجراحية كما هو مذكور في 5.
- التضحية بالحيوانات بعد أسبوعين.
7. تخطيط صدى القلب لتقييم وظيفة القلب وتضخم البطين الأيسر في الجسم الحي
- إجراء فحص صدى القلب كل 2-3 أسابيع لمتابعة تطور تضخم ووظيفة القلب.
- تخدير الحيوانات ، كما هو موضح ، عن طريق استنشاق 5 ٪ من sevoflurane مع مخروط الأنف. ضبط مستوى التخدير عن طريق خفضه إلى 2.5٪.
- حلاقة وتطبيق كريم إزالة الشعر من خط العنق إلى مستوى منتصف الصدر.
- ضع الحيوان على وسادة التدفئة ووضع أقطاب تخطيط القلب. ضمان تتبع تخطيط القلب جيدة والحفاظ على معدل ضربات القلب بين 300 و 350 نبضة / دقيقة.
- مراقبة درجة الحرارة (~ 37 °C).
- تطبيق هلام صدى ووضع الحيوان في ديكوبيتوس الجانبي الأيسر.
- بدء تخطيط صدى القلب وضبط الإعدادات.
- وضع مسبار الموجات فوق الصوتية على الصدر.
- تقييم تدرج الضغط عبر النطاقات في 7 و 2 أسابيع بعد جراحة الربط وإزالة النطاقات، على التوالي. ضع المسبار في المحور الطويل LV وضع الحزمة فوق الشريان الأورطي. اضغط على زر PW لتنشيط موجة نبضية Doppler تخطيط صدى القلب. بعد سبعة أسابيع من النطاقات، سيتم >25 مم زئبق في الحيوانات النطاقات.
- سجل الصور الموجهة ثنائية الأبعاد من الشريان الأورطي تظهر وجود أو عدم وجود انقباض الشريان الأورطي الصاعد لتصور تشريحيا فعالية النطاقات وإزالة النطاقات.
ملاحظة: من الممكن تصور التدفق المضطرب عند مستوى الانقباض إذا كان وضع اللون متوفرا. - تقييم تضخم عن طريق وضع المسبار في محور قصير LV، على مستوى العضلات الحليمية، واضغط M-وضع تتبع لتصور الجدار الأمامي LV (LVAW)، قطر LV (LVD) والجدار الخلفي LV (LVPW) في دياسول (D) والسول (S) (الشكل 5).
- تقييم الدالة الانقباضية، وحساب كسر القذف وتقصير كسور كما هو موضح سابقا14،15.
- تقييم الوظيفة الانبساطية بمقدار 1) تحديد ذروة دوبلر الموجة النبضية لسرعة التدفق التاجي المبكر والمتأخر (موجات E و A، على التوالي) باستخدام منظر apical من 4 غرف فوق المنشورات التاجية مباشرة؛ 2) تسجيل السرعات التاجية الجانبية الحلقية الشغافية في وقت مبكر (E') وسرعات الانقباضي الذروة (S') باستخدام نبض-TDI وعرض apical 4-غرفة apical(الشكل 5).
- تسجيل نبضات القلب المتتالية ثلاثة على الأقل إلى كل تقييم المعلمة. سيتم حساب متوسط هذه القيم لاحقا.
8. تقييم الهمودية
- في نهاية البروتوكول(الشكل 4)،إجراء تخطيط صدى القلب النهائي، كما هو موضح في 7، قبل تقييم الديناميكا الدموية الطرفية.
- كرر الخطوات من 2.1 إلى 3.6.
- كانول الوريد الوريدي الأيمن وثقب المالحة العقيمة في 64 مل / كغ / ساعة.
- تدوير قليلا الحيوان إلى الجانب الأيسر وجعل شق الجلد على مستوى الزائدة الدودية xiphoid.
- فصل الجلد من العضلات مع ملقط أو مع مقص.
- إجراء شق الجانبي بين الأضلاع اليسرى في مستوى الزائدة الدودية xiphoid.
- إجراء استئصال الصدر الجانبي الأيسر لفضح القلب بالكامل.
ملاحظة: لتجنب النزيف وتلف الرئة، أدخل مسحة قطنية في تجويف الصدر وادفع الرئة برفق أثناء إدخال اثنين من الهموستات على الجانب الأيمن والأيسار من المكان لقطعها. - سخني مسبقا القسطرة الحلقية P-V في حمام مائي عند 37 درجة مئوية.
- معايرة القسطرة (الإعداد، إعداد القناة، اختار القناة الصحيحة للضغط والحجم، وحدات).
- أدخل قسطرة بشكل واضح في LV و تأكد من وضع مستشعرات الصوت بين الصمام الأبهري والقمة. يمكن تقييم المجلدات حسب تخطيط صدى القلب(الشكل 5). التصور من حلقات حجم الضغط يساعد على تأكيد تحديد المواقع الصحيح للقسطرة (الشكل 6).
- السماح للحيوان لتحقيق الاستقرار 20-30 دقيقة دون تغييرات كبيرة في شكل حلقات حجم الضغط.
- مع التهوية علقت في نهاية انتهاء الصلاحية، والحصول على تسجيلات خط الأساس (الشكل 6). الحصول على البيانات باستمرار في 1000 هرتز ليتم تحليلها في وقت لاحق خارج الخط من قبل البرامج المناسبة.
- حساب التوصيل المتوازي بعد بولوس المالحة فرط الطنين (10٪، 10 ميكرولتر).
- في حين تخدير، التضحية الحيوان عن طريق exsanguination، وجمع والطرد المركزي الدم.
- وأخيرا، المكوس وجمع القلب. وزن القلب واليسار والبطين الأيمن بشكل منفصل وعلى الفور تخزين العينات في النيتروجين السائل أو الفورالين للدراسات الجزيئية أو النسيجية اللاحقة، على التوالي.
9. إجراء ربط / إزالة النطاقات الأبهري في الفئران
- أداء ربط الأبهر في الشاب Wistar (70-90 غرام) باستخدام إبرة 22 G وربط البولي بروبلين 6-0 لتضييق الشريان الأورطي.
- ضمان إجراء التخدير والمسكنات المناسبة مع 3-4٪ من سيفوفلوران و 0.05 ملغم / كغ من البوبرينورفين، على التوالي.
- أثناء تخطيط صدى القلب، وضمان معدل ضربات القلب دائما فوق معدل 300 / دقيقة (من الناحية المثالية بين 300 و 350).
- قبل الخطوة 8.9، تشريح بلطف الشريان الأورطي الفئران، ووضع مسبار تدفق حوله لقياس الناتج القلبي. استخدام مسبار التدفق الأبهري هو الإجراء القياسي الذهبي للفئران.
- لتقييم الدورة الدموية، يمكن إعادة ترقيم الوريد الوداجي أو الفخذي لإدارة السوائل (32 مل/كغ/ساعة).
- استبدل القسطرة بحجم الضغط SPR-1035 ب SPR-847 أو SPR-838، والتي تناسب أحجامها الأبعاد البطينية للفئران بشكل أفضل.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Representative Results
ما بعد العملية الجراحية والبقاء على قيد الحياة في وقت متأخر
البقاء على قيد الحياة من أجل الجراحة من الإجراء النطاقات هو 80٪ والوفيات خلال الشهر الأول هو عادة <20٪. كما ذكر سابقا، نجاح جراحة إزالة النطاق يعتمد اعتمادا كبيرا على كيفية الغازية كانت الجراحة السابقة. بعد منحنى التعلم، يبلغ معدل الوفيات أثناء إجراءات إزالة النطاق حوالي 25٪. لهذا الوفيات حسابات معظمها وفيات أثناء إجراء الجراحة، بما في ذلك الشريان الأورطي أو تمزق الأذين الأيسر (في الفئران، ومعدل البقاء على قيد الحياة أعلى في كل من العمليات الجراحية).
ربط الأبهر وإعادة عرض عضلة القلب
تم التحقق من نجاح انقباض الأبهر عن طريق زيادة الضغط الانقباضي النهائي LV (LVESP) وسرعات التدفق الأبهري دوبلر >2.5 م / ثانية ، وهو ما يتوافق مع تدرج ضغط 25 مم زئبق باستخدام معادلة برنولي المعدلة(الشكل 5). بالمقارنة مع الفئران الشام، ضمور LV الناجم عن النطاقات كما تم تقييمه من خلال زيادة كتلة LV(الجدول 1 والشكل 5)وضعف الوظيفة الانبساطية واضحة من خلال ضغوط التعبئة العالية (نسبة سرعة الذروة التاجية للملء المبكر (E) والسرعة الحلقية الانبساطية المبكرة (E')، (E/e')، والضغط الانبساطي البطيني الأيسر (LVEDP) والاسترخاء المطول (t، الجدول 1 والشكل 5 والشكل 6) في غضون 7 أسابيع. كان جزء القذف لا يزال محفوظا في هذه المرحلة من المرض.
الهسطي, سبعة أسابيع من ربط الأبهر المستحث تضخم عضلة القلب كبيرة والتليف (الشكل 7).
إزالة النطاق الأبهري وإعادة عرض عكس عضلة القلب
في الفئران التي تعرضت ل debanding ، تم التحقق من إزالة ناجحة من تضيق الأبهر من قبل السرعات دوبلر صدى(الجدول 1 والشكل 5). وعموما، عزز إزالة النطاق انخفاضا كبيرا في الحمل التالي (انخفاض LVESP) وضمور LV (تم تقييمه حسب المورفوميتريا وتخطيط صدى القلب والأنسجة). وعلاوة على ذلك، لاحظنا تطبيع الوظيفة الانبساطية والسرعات الأبهرية (الجدول 1، الشكل 5، الشكل 6، والشكل 7).
الجدول 1: التغيرات المورفونية البطينية اليسرى التي تقيمها تخطيط صدى القلب والديناميكا الدموية.
| الخطوات الهامة | نصيحة |
| غزو جراحة النطاقات |
من المهم تجنب: ● انسداد طويل الأمد من الشريان الأورطي الصاعد أثناء الربط ، مما قد يؤدي إلى وذمة الرئة وتنشيط المسارات الالتهابية القادرة على التأثير على النمط الظاهري وشدة المرض15 ● نزيف الشريان الثديي الذي، إذا لم يتم التحايل عليه في الوقت المناسب، يمكن أن يؤدي إلى انخفاض ضغط الدم وتعزيز كميات أعلى من التليف عند إعادة فتح الصدر (إزالة العصابات)؛ ● إتلاف الفئران الجنبية والرئتين؛ مصغرة الصدر الجانبي الأيسر لالعصابات و debanding (نفس المكان؛ دراسة الحالية) مقابل الصدر الجانبي الأيسر لالنطاق وقص القص لجراحة debanding11: ● الأول هو أقل الغازية ولها وقت قصير الانتعاش، مما يحسن من نجاح الهيموديناميك مفتوحة الصدر التي أجريت بعد أسبوعين. ومع ذلك ، فإن استخدام نفس الوضع لإعادة فتح الصدر يمكن أن يزيد من عدد المضاعفات بسبب الالتصاقات (حول الأذين الأيسر والشريان الرئوي ، إلخ). التغلب على هذه المشكلة عن طريق وجود extracarefull أثناء إجراء النطاقات. |
| استيعاب خياطة |
يمكن منع استخدام: ● اثنين من الغرز الفرقة جنبا إلى جنب16; ● الحرير بدلا من البولي بروبلين11؛ ● مقاطع التيتانيوم أو O-حلقات حول الشريان الأورطي للحث على انقباض21; ● حلقة مزدوجة مقطع thecnique15؛ ● نفخ الكفة لتنفيذ فوق القشرية الأبهري النطاقات22. |
| المعلمات الفسيولوجية |
من المهم أثناء الجراحة مراقبة: ● معدل ضربات القلب؛ ● الأوكسجين في الدم، والحفاظ عليه فوق 90٪ (وخاصة خلال manupilation الشريان الأورطي)؛ ● التخدير، والاحتفاظ بها في أدنى جرعة ممكنة دون إلحاق الانزعاج على الحيوان. |
الجدول 2: الخطوات الحاسمة للبروتوكول.
الشكل 1: الأدوات الجراحية فائقة الدقة المستخدمة في إجراءات الربط والإزالة. (أ) 2 إبرة حاملي وشفرة مشرط؛ 2 القسطرة لتنبيب الفئران ومقص. مشرط، 2 ملقط منحني، مساعدة ربط، مقص جراحية دقيقة، 3 ملقط مستقيم. (ب) و26G-إبرة وحاد 26G-إبرة منحنية لتناسب الفئران فتحة الصدر الصغيرة بشكل صحيح. يرجى النقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الرقم.
الشكل 2: إجراء النطاقات الأبهري. (أ) النهج الصدري إلى الشريان الأورطي الصاعد يؤديها بمساعدة نظام سحب المثبت المغناطيسي (3 مسحبات مرئية). (ب)يتم تشريح الشريان الأورطي الصاعد بوضوح ومرئي. يتم وضع الإبرة الحادة وخياطة البولي بروبلين 6-0 في الوضع الصحيح لأداء النطاقات الأبهري. يرجى النقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الرقم.
الشكل 3: إجراء إزالة النطاق الأبهري. (أ) يتم وضع الماوس في نظام سحب مغناطيسي ، مما يمثل أداة مفيدة للتراجع عن العضلات والأنسجة. يتم تنبيب الماوس للتهوية الميكانيكية. يتحكم مسبار المستقيم في درجة الحرارة ويتم وضع مقياس للأكسدة على مخلب الفئران الأيمن لمراقبة أكسجة الدم أثناء الجراحة. تتم إزالة التليف والأنسجة الملتصقة بعناية حول الشريان الأورطي والغرز ، لتكون قادرة على قطع الغرز (B) و (C). يرجى النقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الرقم.
الشكل 4: تصميم البروتوكول التجريبي للفئران. تظهر إعادة عرض عضلة القلب (الأحمر) وإعادة عرض عكسي (أخضر) في الجزء السفلي مع جميع مهام التقييم. وتجدر الإشارة إلى أن جراحة إزالة النطاق يمكن أن تؤدي إلى مجموعتين من الحيوانات بدرجات متميزة من إعادة العرض العكسي. وهكذا، حصلنا على الماوس ديب مع استكمال (DEB-COMP) وغير مكتملة (DEB-INCOM) استرداد عضلة القلب. يرجى النقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الرقم.
الشكل 5: التقييم صدى القلب لهيكل القلب ووظيفته. (أ) سرعات التدفق الأبهري; (ب) كتلة LV; (ج)أبعاد البطين (قطر LV، LVD) وسماكة الجدار (الجدار الخلفي LV، LVPW والجدار الأمامي LV، LVAW)؛ (د)التدفق الإرسالي (ذروة نبض موجة دوبلر من سرعة التدفق التاجي المتأخر، A، وذروة موجة دوبلر النابضة من سرعة التدفق التاجي المبكر، E) و(E)سرعات عضلة القلب (سرعة الأنسجة الحلقية الانبساطية المتأخرة، A'؛ سرعة الأنسجة الحلقية الانبساطية المبكرة، E' وسرعة الأنسجة الحلقية التاجية الانقباضية، S'). يرجى النقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الرقم.
الشكل 6: حلقات حجم الضغط التمثيلي لمجموعات SHAM وBA و DEB. تم الحصول على البيانات باستمرار في 1000 هرتز وتحليلها في وقت لاحق خارج الخط من قبل برنامج PVAN. يرجى النقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الرقم.
الشكل 7:تضخم عضلة القلب والتليف تقييم الهسهسة. (أ) تضخم البطين الأيسر تقييمها من قبل منطقة أقسام خلايا القلب من hematoxylin-eosin (HE) الملون أقسام (5 ميكرومتر) من SHAM (ن = 17), BA (ن = 14) وD DEB المجموعة (ن = 12). (ب)التليف الخلالي البطيني الأيسر والصور التمثيلية للأقسام الملطخة بالأحمر سيريوس (5 ميكرومتر) من SHAM (ن = 17) ، BA (n = 13) و DEB (n = 12). يرجى النقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الرقم.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Discussion
النموذج المقترح هنا يحاكي عملية إعادة عرض LV وRR بعد النطاقات الأبهري وإزالة النطاقات ، على التوالي. لذلك ، فإنه يمثل نموذجا تجريبيا ممتازا لتعزيز معرفتنا بالآليات الجزيئية المشاركة في إعادة عرض LV السلبية واختبار استراتيجيات علاجية جديدة قادرة على تحفيز تعافي عضلة القلب لهؤلاء المرضى. هذا البروتوكول تفاصيل الخطوات حول كيفية إنشاء نموذج القوارض من النطاقات الأبهري وإزالة النطاقات مع تقنية جراحية طفيفة التوغل ومحافظة للغاية للحد من الصدمة الجراحية.
وتتعلق الخطوة الأكثر أهمية في البروتوكول بدرجة العدوان الجراحي أثناء النطاقات الأبهرية. نجاح جراحة إزالة النطاق الأبهري اللاحقة يعتمد بشكل كبير على إجراء ربط الحد الأدنى من التوغل الذي يتجنب عدوان الأنسجة والتليف حول الشريان الأبهري ، وبالتالي ، فإن اتباع نهج أقل توغلا إلزامي(الجدول 2). ويرتبط استيعاب خياطة مع تضخم أقل LV وأفضل وظيفة القلب16 (الجدول 2) ويجعل الإجراء debanding المستحيل لأداء دون التسبب في تمزق الأبهر. في هذه الدراسة، حاولنا استخدام الحرير، لأنه يخلق المزيد من ندبا في موقع النطاقات، مما أدى إلى درجة أكثر استقرارا من الحمل الزائد الضغط. ومع ذلك ، في أيدينا ، كانت جراحة إزالة النطاق أكثر تطلبا عندما تم استخدام الحرير لأنه سلك متعدد الفلترة مما يجعله إزالة كاملة من الشريان الأورطي أكثر صعوبة. ومع ذلك، فهذه مسائل تقنية تعتمد على نطاق واسع على البروتوكول والمشغل، وهذه الاختلافات، ونوع الخياطة، لا تتعارض مع الممارسات التقنية الجيدة والنتائج الإنجابية. رصد المعلمات الفسيولوجية أثناء العصابات وخصوصا أثناء إزالة النطاقات إلزامي لنجاح تنفيذ النموذج (الجدول 2).
في عام 1991، روكمان وآخرون، وصف انقباض الشريان الأورطي العرضي (TAC) في الماوس للمرة الأولى4. ومنذ ذلك الحين خرج كمية كبيرة من الأوراق التي توفر العديد من الإصدارات من هذا الإجراء مع الاختلافات فيما يتعلق بعمر الحيوان / حجم17، الفئران الخلفية الوراثية18، قطر الإبرة / انقباض19، المادة المستخدمة في النطاقات ، والموقع الأبهري للنطاق ، ومدةالنطاقات 19 وإزالةالنطاقات 11. كل هذه البدائل المنهجية صالحة طالما أنها تحقق أهداف كل دراسة. ومع ذلك ، يجب أن نؤكد أن تطور المرض نحو فشل القلب أسرع وبالتالي RR غير مكتملة أكثر عند الاختيار: 1) فترات أطول النطاقات ، 2) أثقل / أقدم الفئران20 و 3) أصغر قطر إبرة المستخدمة في انقباض الأبهر (نسبة أعلى من انقباض الأبهر)16.
مدة النطاقات وإزالة النطاقات تؤثر بشكل كبير على مرحلة المرض ، وبالتالي ، الانتعاش أثناء RR. وبالمثل، فإن اختيار التوقيت المناسب لإزالة النطاقات إلزامي للتكيف مع شدة المرض المتوخى. النتائج التي لوحظت في دراستنا تتفق مع ما قبل وجود الحيوان11،21 والدراسات البشرية22، باستثناء تضخم خلايا القلب ، حيث أظهرت بعض الدراسات تطبيعه10،21 وغيرها تراجعه الجزئي23. وعلاوة على ذلك، أظهرت الدراسات أن، يمكن أن يحدث تراجع التليف على المدى الطويل (70 شهرا للمرضى الإنسان)24. النتائج ويبدو أن تعتمد على تقنية تستخدم لمعالجة التليف25. في الآونة الأخيرة، Treibel وآخرون كانوا قادرين على التفريق بين الخلوية (الخلايا العضلية، الليفية، البطانية، خلايا الدم الحمراء) ومقصورات خارج الخلية (ECM، بلازما الدم) في المرضى الذين يعانون من تضيق الأبهر بعد استبدال الصمام الأبهري (AVR) باستخدام الرنين المغناطيسي القلب والأوعية الدموية مع رسم خرائط T122. ووصفوا أن انحدار كتلة LV بعد AVR يمكن أن يكون مدفوعا ب 1) انحدار المصفوفة وحده ، حيث يقلل الحجم خارج الخلية ؛ 2) الانحدار الخلوي وحده، حيث يزيد حجم خارج الخلية؛ 3) أو عن طريق الانحدار النسبي في مقصورات الخلوية والمصفوفة، حيث حجم خارج الخلية هو دون تغيير22. وخلص هؤلاء المؤلفون إلى أنه بعد AVR ، في حين أن التليف المنتشر وتضخم عضلة القلب الخلوي يتراجع ، فإن التليف البؤري لا يحل. وهكذا ، فإن التليف الخلالي المنتشر ، كما تم تقييمه حسب حجم المصفوفة ، هو هدف علاجي محتمل. في دراستنا، والحد من التليف ويبدو أن يحدث في غضون 2 أسابيع من RR وقبل تطبيع تضخم عضلة القلب. أيضا ، التضحية بالحيوانات بعد أسبوعين من إزالة النطاق كان التوقيت المثالي للحصول على تنوع البطين بين مجموعة DEB ، وهي الحيوانات ذات الثبات الانبساطي (DEB-INCOM) وغيرها مع انعكاس كتلة LV الكامل وتحسين الوظيفة الانبساطية (DEB-COM). وعلاوة على ذلك، في أقرب وقت 2 أسابيع بعد debanding، أظهرنا سابقا تغييرات البطين الأيمن كبيرة في مجموعة النطاقات التي تتعافى جزئيا بعد debanding26،في حين بيورنستاد وآخرون ذكرت تطبيع التعبير الجينات الجنينية، مما يدل على إعادة عرض عضلة القلب ضمن نفس الإطار الزمني11.
يمكن أيضا إجراء العملية الجراحية للنطاق / إزالة النطاقات في الفئران26، ومع ذلك ، يجب تسليط الضوء على بعض الاختلافات. نظرا لحجمها الأكبر ، تحتوي الفئران على طبقات عضلات أكثر من الفئران مما يقلل من التصور الأبهري ويعوق وضع الرباط حول الشريان الأبهري. من ناحية أخرى ، يتم تقليل خطر إتلاف الأنسجة والأعضاء المجاورة ، مثل الأذين أو الرئتين. للتغلب على مسألة استيعاب خياطة استخدمنا أكبر ربط البولي بروبلين في الفئران لعقد ضيق الشريان الأورطي (6.0 بدلا من 7.0 البولي بروبلين).
بسبب التلاعب الشريان الأورطي، جراحة إزالة النطاقات قد يقلل من إنتاج القلب عن طريق فرض حمولة إضافية على LV وبالتالي إضعاف الدورة الدموية والجهاز التنفسي. بالمقارنة مع الفئران ، يبدو أن الفئران أكثر مقاومة لفترة تخدير أكثر تمديدا ، وبالتالي فهي أسهل للحفاظ على المعلمات التنفسية الفسيولوجية التي يتم التحكم فيها أثناء جراحة إزالة النطاق الطويلة. في الفئران ، يكون تطور تضخم LV أسرع من الفئران ، ولكن الأمر يستغرق وقتا أطول للتقدم إلى قصور القلب. وهكذا، يمكن إجراء جراحة إزالة النطاقات بين 5-9 أسابيع بعد إجراء الربط دون المساس بكسر القذف26.
القيد الرئيسي لنموذج الحيوانات النطاقات / debanding هو المهارات الجراحية الدقيقة الصعبة وتقنية المشغل ، وعادة ما تتطلب منحنى التعلم الطويل لإنجاز جراحة إزالة النطاقات. وهناك قيد آخر هو استحالة إجراء الديناميكا الدموية الصدرية القريبة في الماوس والفأر ، والتي ستكون أكثر فسيولوجيا. ومع ذلك، باستخدام هذه الطريقة إلزامية لإدخال القسطرة من الشريان السباتي الأيمن إلى LV وهو، في هذه الحالة بالذات غير ممكن منذ في ربط الحيوانات تصاعدي الشريان الأورطي هو ضيق قبل الفروع السباتية. وعلاوة على ذلك، في الماوس، لم نتمكن من قياس انكماش الحمل المستقلة (ESPVR) والمعلمات الانبساطية (المنحدر من EDPVR) من خلال أداء مناورة انسداد فينا كافا، معلمة هامة لتوصيف كاف لوظيفة عضلة القلب. وجدنا هذه المناورة من الصعب القيام بها في الفئران مع انقباض الشريان الأورطي الصاعد بسبب صغر حجمها (20-25g).
ويشمل التطبيق المستقبلي لنموذج الحيوانات النطاقات / debanding تطوير نهج علاجية جديدة لأمراض عضلة القلب وتوصيف المسارات التي تقوم عليها عملية إعادة عرض LV وRR.
في الختام، يسمح هذا النموذج ذو الصلة سريريا بالتوصيف الزمني والميكاني للتقدم نحو HF، وكذلك تعافيه لأنه يسمح بجمع عينات عضلة القلب في مراحل مختلفة من إعادة عرض عضلة القلب وRR. وعلاوة على ذلك، فإنه يثبت أن يكون نموذجا تجريبيا مفيدا لاختبار الاستراتيجيات العلاجية التي تهدف إلى استعادة القلب الفاشل.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Disclosures
ولا يوجد تضارب في المصالح بين صاحبي البلاغ.
Acknowledgments
يشكر المؤلفون المؤسسة البرتغالية للعلوم والتكنولوجيا والاتحاد الأوروبي وكوادرو دي Referência Estratégico Nacional (QREN) و Fundo Europeu de Desenvolvimento Regional (FEDER) و Programa Operacional Factores de Competitividade (COMPETE) لتمويل وحدة البحوث UnIC (UID/IC/00051/2013). ويدعم هذا المشروع من قبل فيدر من خلال المنافسة 2020 - Programa أوبراسيونال Competitividade E Internacionalização (POCI)، مشروع DOCNET (NORTE-01-0145-FEDER-000003)، بدعم من برنامج نورتي البرتغال التشغيلي الإقليمي (NORTE 2020)، بموجب اتفاقية الشراكة البرتغالية لعام 2020، من خلال الصندوق الأوروبي للتنمية الإقليمية (ERDF)، مشروع NETDIAMOND (POCI-01-0145-FEDER-016385)، بدعم من الصناديق الهيكلية والاستثمارية الأوروبية، وهو البرنامج التشغيلي الإقليمي في لشبونة 2020. دانييلا ميراندا سيلفا وباتريشيا رودريغز ممولتان من صندوق الفقرة A Ciência e Tecnologia (FCT) من منح الزمالة (SFRH/BD/87556/2012 وSFRH/BD/96026/2013 على التوالي).
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Absorption Spears | F.S.T | 18105-03 | To absorb fluids during the surgery |
| Blades | F.S.T | 10011-00 | To perform the skin incision |
| Buprenorphine | Buprelieve | Analgesia drug | |
| Catutery | F.S.T | 18010-00 | To prevent exsanguination |
| Catutery tips | F.S.T | 18010-01 | To prevent exsanguination |
| cotton swab | Johnson's | To absorb fluids during the surgery | |
| Depilatory cream | Veet | To delipate the animal | |
| Disposable operating room table cover | MEDKINE | DYND4030SB | To cover the surgical area |
| Echo probe | Siemens | Sequoia 15L8W | Ultrasound signal aquisition |
| Echocardiograph | Siemens | Acuson Sequoia C512 | Ultrasound signal aquisition |
| End-tidal CO2 monitor | Kent Scientific | CapnoStat | To control expiration gas saturation |
| Forcep/Tweezers | F.S.T | 11255-20 | To dissect the tissues and aorta |
| Forcep/Tweezers | F.S.T | 11272-30 | To dissect the tissues and aorta |
| Forcep/Tweezers | F.S.T | 11151-10 | To dissect the tissues and aorta |
| Forcep/Tweezers | F.S.T | 11152-10 | To dissect the tissues and aorta |
| Gas system | Penlon Sigma Delta | To anesthesia and mechanical ventilation | |
| Hemostats | F.S.T | 13010-12 | To hold the suture before tight the aorta |
| Hemostats | F.S.T | 13011-12 | To hold the suture before tight the aorta |
| Ligation aids | F.S.T | 18062-12 | To place a suture around the aorta |
| Magnetic retractor | F.S.T | 18200-20 | To help keep the animal in a proper position |
| Needle holder | F.S.T | 12503-15 | To suture the animal |
| Needle 26G | B-BRAUN | 4665457 | To serve as a molde of aortic constriction diameter |
| Oxygen | Air Liquide | To anesthesia and mechanical ventilation | |
| Polipropilene suture | Vycril | W8304/W8597 | To suture the animal and to do the constriction |
| Povidone-iodine solution | Betadine® | Skin antiseptic | |
| PowerLab | Millar instruments | ML880 PowerLab 16/30 | PV loop Signal Aquisition |
| Pulse oximeter | Kent Scientific | MouseStat | To control heart rate and blood saturation |
| PVAN software | Millar Instruments | To analyse the haemodynamic data | |
| PV loop cathether | Millar instruments | SPR-1035. 1.4 F | PV loop Signal Aquisition |
| Retractor | F.S.T | 17000-01 | To provide a better overview of the aorta |
| Scalpet handle | F.S.T | 10003-12 | To perform the skin incision |
| Scissors | F.S.T | 15070-08 | To cut the suture in debanding surgery |
| Scissors | F.S.T | 14084-09 | To cut other material during the surgery e.g. suture, papper |
| Sevoflurane | Baxter | 533-CA2L9117 | |
| Temperature control module | Kent Scientific | RightTemp | To control animal corporal temperature |
| Ventilator | Kent Scientific | PhysioSuite | To ventilate the animal |
| Water-bath | Thermo Scientific™ | TSGP02 | To maintain water temperature adequate to heat the P-V loop catethers |
References
- Arany, Z., et al. Transverse aortic constriction leads to accelerated heart failure in mice lacking PPAR-gamma coactivator 1alpha. Proceedings of the National Academy of Science U. S. A. 103 (26), 10086-10091 (2006).
- Tavakoli, R., Nemska, S., Jamshidi, P., Gassmann, M., Frossard, N. Technique of Minimally Invasive Transverse Aortic Constriction in Mice for Induction of Left Ventricular Hypertrophy. Journal of Visualized Experiment. (127), e56231 (2017).
- Zaw, A. M., Williams, C. M., Law, H. K., Chow, B. K. Minimally Invasive Transverse Aortic Constriction in Mice. Journal of Visualized Experiment. (121), e55293 (2017).
- Rockman, H. A., et al. Segregation of atrial-specific and inducible expression of an atrial natriuretic factor transgene in an in vivo murine model of cardiac hypertrophy. Proceedings of the National Academy of Science. 88 (18), 8277-8281 (1991).
- Koide, M., et al. Premorbid determinants of left ventricular dysfunction in a novel model of gradually induced pressure overload in the adult canine. Circulation. 95 (6), 1601-1610 (1997).
- Rodrigues, P. G., Leite-Moreira, A. F., Falcao-Pires, I. Myocardial reverse remodeling: how far can we rewind. American Journal of Physiology-Heart and Circulatory Physiology. 310 (11), 1402-1422 (2016).
- Weidemann, F., et al. Impact of myocardial fibrosis in patients with symptomatic severe aortic stenosis. Circulation. 120 (7), 577-584 (2009).
- Bing, R., et al. Imaging and Impact of Myocardial Fibrosis in Aortic Stenosis. JACC Cardiovascular Imaging. 12 (2), 283-296 (2019).
- Conceicao, G., Heinonen, I., Lourenco, A. P., Duncker, D. J., Falcao-Pires, I. Animal models of heart failure with preserved ejection fraction. Netherlands Heart Journal. 24 (4), 275-286 (2016).
- Weinheimer, C. J., et al. Load-Dependent Changes in Left Ventricular Structure and Function in a Pathophysiologically Relevant Murine Model of Reversible Heart Failure. Circulation Heart Failure. 11 (5), 004351 (2018).
- Bjornstad, J. L., et al. A mouse model of reverse cardiac remodelling following banding-debanding of the ascending aorta. Acta Physiologica (Oxford). 205 (1), 92-102 (2012).
- Yarbrough, W. M., Mukherjee, R., Ikonomidis, J. S., Zile, M. R., Spinale, F. G. Myocardial remodeling with aortic stenosis and after aortic valve replacement: mechanisms and future prognostic implications. Journal of Thoracic and Cardiovascular Surgery. 143 (3), 656-664 (2012).
- deAlmeida, A. C., van Oort, R. J., Wehrens, X. H.
- Hamdani, N., et al. Myocardial titin hypophosphorylation importantly contributes to heart failure with preserved ejection fraction in a rat metabolic risk model. Circulation: Heart Failure. 6 (6), 1239-1249 (2013).
- Li, L., et al. Assessment of Cardiac Morphological and Functional Changes in Mouse Model of Transverse Aortic Constriction by Echocardiographic Imaging. Journal of Visualized Experiment. (112), e54101 (2016).
- Lygate, C. A., et al. Serial high resolution 3D-MRI after aortic banding in mice: band internalization is a source of variability in the hypertrophic response. Basic Research in Cardiology. 101 (1), 8-16 (2006).
- Platt, M. J., Huber, J. S., Romanova, N., Brunt, K. R., Simpson, J. A. Pathophysiological Mapping of Experimental Heart Failure: Left and Right Ventricular Remodeling in Transverse Aortic Constriction Is Temporally, Kinetically and Structurally Distinct. Frontiers in Physiology. 9, 472 (2018).
- Garcia-Menendez, L., Karamanlidis, G., Kolwicz, S., Tian, R. Substrain specific response to cardiac pressure overload in C57BL/6 mice. American Journal of Physiology-Heart and Circulation Physiology. 305 (3), 397-402 (2013).
- Melleby, A. O., et al. A novel method for high precision aortic constriction that allows for generation of specific cardiac phenotypes in mice. Cardiovascular Research. 114 (12), 1680-1690 (2018).
- Li, Y. H., et al. Effect of age on peripheral vascular response to transverse aortic banding in mice. The Journal of Gerontology. Series A, Biological Sciences and Medical Sciences. 58 (10), 895-899 (2003).
- Ruppert, M., et al. Myocardial reverse remodeling after pressure unloading is associated with maintained cardiac mechanoenergetics in a rat model of left ventricular hypertrophy. American Journal of Physiology-Heart and Circulation Physiology. 311 (3), 592-603 (2016).
- Treibel, T. A., et al. Reverse Myocardial Remodeling Following Valve Replacement in Patients With Aortic Stenosis. Journal of the American College of Cardiology. 71 (8), 860-871 (2018).
- Dadson, K., et al. Cellular, structural and functional cardiac remodelling following pressure overload and unloading. International Journal of Cardiology. 216, 32-42 (2016).
- Krayenbuehl, H. P., et al. Left ventricular myocardial structure in aortic valve disease before, intermediate, and late after aortic valve replacement. Circulation. 79 (4), 744-755 (1989).
- McCann, G. P., Singh, A. Revisiting Reverse Remodeling After Aortic Valve Replacement for Aortic Stenosis. Journal of the American College of Cardiology. 71 (8), 872-874 (2018).
- Miranda-Silva, D., et al. Characterization of biventricular alterations in myocardial (reverse) remodelling in aortic banding-induced chronic pressure overload. Science Reports. 9 (1), 2956 (2019).
