Wir beschreiben hier eine Methode zur Herstellung von Ti3C2 MXene Mikroelektroden-Arrays und deren Verwendung für die in vivo-neurale Aufnahme.
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Methodenartikel
Wir beschreiben hier eine Methode zur Herstellung von Ti3C2 MXene Mikroelektroden-Arrays und deren Verwendung für die in vivo-neurale Aufnahme.
Implantierbare Mikroelektrodentechnologien wurden weit verbreitet eingesetzt, um die neuronale Dynamik auf der Mikroskala aufzuklären, um ein tieferes Verständnis der neuronalen Grundlagen von Hirnerkrankungen und Verletzungen zu gewinnen. Da Elektroden auf die Skala einzelner Zellen miniaturisiert werden, begrenzt ein entsprechender Anstieg der Grenzflächenimpedanz die Qualität der aufgezeichneten Signale. Darüber hinaus sind herkömmliche Elektrodenmaterialien steif, was zu einer signifikanten mechanischen Diskrepanz zwischen der Elektrode und dem umgebenden Hirngewebe führt, was eine Entzündungsreaktion hervorruft, die schließlich zu einer Verschlechterung der Geräteleistung führt. Um diesen Herausforderungen zu begegnen, haben wir ein Verfahren zur Herstellung flexibler Mikroelektroden auf Basis von Ti3C2 MXene entwickelt, einem kürzlich entdeckten Nanomaterial, das eine bemerkenswert hohe volumetrische Kapazität, elektrische Leitfähigkeit, Oberflächenfunktionalität und Verarbeitbarkeit in wässrigen Dispersionen besitzt. Flexible Arrays von Ti3C2 MXene Mikroelektroden haben aufgrund der hohen Leitfähigkeit und der hohen spezifischen Oberfläche der Ti3C2 MXene-Folien eine bemerkenswert geringe Impedanz und haben sich als exquisit empfindlich für die Aufzeichnung neuronaler Aktivität erwiesen. In diesem Protokoll beschreiben wir eine neuartige Methode zum Mikromustern von Ti3C2 MXen e in Mikroelektroden-Arrays auf flexiblen polymeren Substraten und skizzieren deren Verwendung für die In-vivo-Mikroelektrokortikographie-Aufzeichnung. Diese Methode kann leicht erweitert werden, um MXene-Elektroden-Arrays beliebiger Größe oder Geometrie für eine Reihe anderer Anwendungen in der Bioelektronik zu erstellen und es kann auch für den Einsatz mit anderen leitfähigen Tinten neben Ti3C2 MXen angepasst werden. Dieses Protokoll ermöglicht die einfache und skalierbare Herstellung von Mikroelektroden aus lösungsbasierten leitfähigen Tinten und ermöglicht es speziell, die einzigartigen Eigenschaften von hydrophilen Ti3C2 MXene zu nutzen, um viele der Barrieren zu überwinden, die die weit verbreitete Verbreitung von kohlenstoffbasierten Nanomaterialien für hochtreue neuronale Mikroelektroden lange behindert haben.
Das Verständnis der grundlegenden Mechanismen, die neuronalen Schaltkreisen zugrunde liegen, und wie ihre Dynamik bei Krankheiten oder Verletzungen verändert wird, ist ein entscheidendes Ziel für die Entwicklung wirksamer Therapeutika für eine breite Palette von neurologischen und neuromuskulären Erkrankungen. Mikroelektrodentechnologien wurden häufig eingesetzt, um die neuronale Dynamik auf feinen räumlichen und zeitlichen Skalen aufzuklären. Die Aufnahme stabiler Aufnahmen mit hohem Signal-Rausch-Verhältnis (SNR) von Mikroelektroden hat sich jedoch als besonders anspruchsvoll erwiesen. Da die Abmessungen der Elektroden auf eine zelluläre Skala reduziert werden, vers....
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Alle In-vivo-Verfahren entsprachen dem Leitfaden der National Institutes of Health (NIH) für die Pflege und Verwendung von Labortieren und wurden vom Institutional Animal Care and Use Committee (IACUC) der University of Pennsylvania genehmigt.
1. Synthese von Ti3C2 MXene
HINWEIS: Die in diesem Abschnitt beschriebenen Reaktionsverfahren sind für den Einsatz in einer chemischen Rauchhaube bestimmt. Die in diesem Verfahren enthaltenen Waschschritte sind für die Verwendung mit ausgewogenen Zentrifugenrohren vorgesehen. Alle erzeugten Abfälle gelten als gefährliche Abfälle und sollten ents....
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Beispiel-Mikro-ECoG-Daten, die auf einem MXene-Mikroelektroden-Array aufgezeichnet wurden, sind in Abbildung 5dargestellt. Nach dem Auftragen des Elektrodenarrays auf den Kortex waren auf den Aufnahmeelektroden sofort klare physiologische Signale zu erkennen, wobei auf allen MXene-Elektroden etwa 1 mV Amplitude ECoG-Signale auftauchten. Leistungsspektren dieser Signale bestätigten das Vorhandensein von zwei Gehirnrhythmen, die häufig bei Ratten unter Ketamin-Dexmedetomidin-Anästhesie beobach.......
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Das in diesem Protokoll beschriebene MXene-Synthese- und Delaminationsverfahren (HF/HCl/LiCl) wurde aus dem MILD-Ätzansatz aufgebaut, der ein LiF/HCl (in situ HF) etchant medium26verwendete. Der MILD-Ansatz ermöglicht es, große Ti3C2-Flocken (mehrere m in seitenseitiger Größe) beim Waschen spontan zu delaminisieren, sobald der pH-Wert von 5 bis 6 erreicht wurde. Im Vergleich zur Radierung allein mit HF führt dies zu Material mit höherer Qualität und verbesserten Materialeigen.......
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Die Autoren haben nichts zu verraten.
Diese Arbeit wurde von den National Institutes of Health (Grant-Nr. R21-NS106434), der Citizens United for Research in Epilepsy Taking Flight Award, die Mirowski Family Foundation und Neil und Barbara Smit (F.V.); des National Science Foundation Graduate Research Fellowship Program (Grant-Nr. DGE-1845298 zu N.D. und B.M.); das Heeresforschungsamt (Kooperationsvereinbarungsnummer W911NF-18-2-0026 an K.M.); und von der US Army über das Surface Science Initiative Program am Edgewood Chemical Biological Center (PE 0601102A Project VR9 to Y.G. and K.M.). Diese Arbeit wurde teilweise am Singh Center for Nanotechnology durchgeführt, das vom National Science Foundation Nation....
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| Name | Unternehmen | Katalognummer | Kommentare |
|---|---|---|---|
| 00-90 Schraube | McMaster-Carr | 90910A630 | Schädelschraube, um die das Erdungskabel gewickelt ist |
| 128ch Stimulations-/Aufnahmecontroller | Intan Technologies | Eine Komponente des neuronalen Aufzeichnungssystems. | |
| Konische Zentrifugenröhrchen aus Polypropylen (PP) mit 175 mL | Falcon | REF: 352076 | Zum Waschen |
| 18-poligen ZIF-Steckverbindern mit einem Rastermaß von 0,5 mm | Molex | 505110-1892 | Wird verwendet, um das flexible Parylene-Mikroelektrodenarray mit der PCB-Adapterplatine zu verbinden. |
| 18-poliger zweireihiger männlicher Nanominiatur-Steckverbinder (.025"/.64mm) | Omnetics Connector Corporation | A79008-001 | Wird verwendet, um die PCB-Adapterplatine mit dem Aufnahmekopftisch zu verbinden. |
| 3ML Einweg-Kunststoff-Set Transfer Graduierte Pipetten | Rienar | Rienar-3ML-20PCS | Wird zum Übertragen von Ätz- oder MXene-Lösungen |
| verwendet 50 mL Polypropylen (PP) Konzial-Zentrifugenröhrchen | Falcon | REF: 352070 | Wird zum Waschen und zur Größenauswahl verwendet |
| Al-Ätzmittel Typ A | 060-0026000-QT | Zum Entfernen der Al-Ätzmaskenschicht nach dem endgültigen Parylene-C-Ätzen. | |
| Aluminiumpulver, -325 Mesh, 99,5% (Metallbasis), Partikelgröße < 44 & Mikro; m | Alfa Aesar | CAS: 7429-90-5 | Wird für die MAX-Synthese |
| AutoCAD-Software | Autodesk Inc. verwendet. | Design-Software zum Zeichnen von Fotomasken. Zu den kostenlosen Alternativen gehören DraftSight und LayoutEditor. | |
| Gepuffertes Oxidätzmittel 6:1 | JT Baker | 1178-03 | Zum Entfernen der SiO2-Schicht, um MXene-Elektrodenkontakte am Ende des Herstellungsprozesses freizulegen. |
| Buprenorphin SR | Wildlife Pharmaceuticals | Analgesie für die Rattenchirurgie | |
| Zentrifuge | Hermle | Benchmark Z 446 | Wird zum Waschen und zur Größenauswahl verwendet |
| Dexdomitor | Midwest Veterinary Supply | 193.13250.3 | Anästhesie für die Rattenchirurgie |
| Bohrgrat | Fine Science Tools | 19007-07 | Grate für |
| Bohrer Elektrische Bohrmaschine | Foredom | K.1070 | Mikromotorbohrer für Kraniotomien |
| Elektronenstrahlverdampfer | Kurt J. Lesker Company | Wird verwendet, um Ti, Au und SiO2 während der Herstellung zu verdampfen. Die meisten Reinräume der Universität verfügen über dieses oder ein ähnliches Tool. | |
| Erdungskabel | A-M Systems | 781500 | Blanker Silberdraht |
| Headspace-Fläschchen, Glas | Supelco | REF: 27298 | Wird zur Lagerung von MXene-Lösungen |
| verwendet Salzsäure (12.1N) | Fisher Scientific | CAS: 7647-01-0 | Korrosiv; Ätzmittel |
| Material Flusssäure, (48-51% Lösung in H2O) | Acros | CAS: 7664-39-3 | Ätzmittel |
| Material Jupiter II RIE-System | March Plasma Systems Inc. | Planares RIE-Ätzsystem zum Ätzen von Parylene-C mit O2Plasma. Die meisten Reinräume der Universität verfügen über ein vergleichbares planares RIE-Ätzsystem. | |
| Kapton-Standard-Polyimidband, 1/4" | DuPont | Wird verwendet, um den Au-Bonding-Pad-Bereich des flexiblen Parylene-Mikroelektrodenarrays für das Einsetzen in den ZIF-Steckverbinder dicker zu machen. | |
| Ketamin-Krankenhaus | der Universität von Penn. | Anästhesie für die Rattenchirurgie | |
| KLA P-7 Stylus Profilometer | KLA Corporation | Verwendete die Messung von 2D-Profilen, um das vollständige Ätzen durch die Opferparylene-C-Schicht in Schritt 2.4.2 zu bestätigen. Die meisten universitären Reinräume verfügen über dieses oder ein vergleichbares Stylus-Profilometer-Tool. | |
| Lithiumchlorid, 99% für die Analyse, wasserfrei | Acros | CAS: 7447-41-8 | Hygroskopisch; Delaminationsmaterial |
| MA6 Mask Aligner | Karl Süss Microtec AG | Wird verwendet, um jede Photomaske auf das Muster auf dem Wafer auszurichten und den Wafer UV-Licht auszusetzen. Die meisten Reinräume der Universität verfügen über dieses oder ein ähnliches Tool. | |
| Micro-90 Reinigungslösung | International Products Corporation | M-9050-12 | Wird als Antihaftschicht verwendet, um das Entfernen der Opferschicht Parylene-C zur Strukturierung des MXene |
| NR71-3000p Fotolacks | Futurrex Inc. | NR71-3000p | Negativer Fotolack zur Definition von Ti/Au-Leiterbahnen und MXene-Mustern in den Geräten. |
| Ophthalmic Salbe | Midwest Veterinary Supply | 193.63200.3 | Zur Verhinderung des Austrocknens der Hornhaut während der Operation |
| Parylene-Abscheidungssystem | Spezielle Beschichtungssysteme | Wird zum Verdampfen dünner konformer Schichten aus Parylene-C | |
| Parylene-C Dimer | Spezielle Beschichtungssysteme | 980130-c-01lbe | Flexibles Polymer wird als untere und obere Passivierungsschicht für die flexiblen MXene-Geräte verwendet |
| Fotomasken (Chrom auf Kalknatronglas) | University of Pennsylvania | Unsere Fotomasken wurden im Reinraum der Universität mit einem Heidelberg DWL66+ Laserschreibsystem hergestellt, jedoch stellen mehrere Anbieter Fotomasken aus bereitgestellten Designdateien her. | |
| Povidon-Jod-Lösung | Medline | MDS093901 | Zur Vorbeugung von Infektionen um den Kopfhautschnitt |
| Leiterplatte (PCB) | Fortschrittliche Schaltkreise | Wird als Schnittstelle zwischen dem MXene-Elektrodenarray und der Messelektronik wie dem Potentiostaten und dem Intan-Aufzeichnungssystem verwendet. Advanced Circuits und andere Anbieter fertigen und bestücken Leiterplatten auf der Grundlage der bereitgestellten Designdateien. | |
| RD6 Entwickler | Futurrex Inc. | RD6 Entwickler | Wird verwendet, um NR71-3000p negativen Fotolack nach UV-Exposition |
| zu entwickeln Referenz 600 Potentiostat | Gamry Instruments | Wird verwendet, um die Impedanz der Elektroden zu messen, um die Qualität der Geräte zu beurteilen | |
| Entferner PG | MicroChem Corp. | G050200 | Wird verwendet, um NR71-3000p nach der Metallabscheidung zu entfernen, um eine Lift-off-Strukturierung |
| durchzuführen RHS2000 Stim SPI-Schnittstellenkabel | Intan Technologies | Eine Komponente des neuronalen Aufzeichnungssystems. | |
| RHS2116 Verstärkerplatine | Intan Technologies | Eine Komponente des neuronalen Aufzeichnungssystems. | |
| Si-Wafer | Wafer World | 2885 | Substrat für die Herstellung |
| Spin Coater | Kostengünstige Ausrüstung | Zum Beschichten von Wafern mit Resists und zum Auftragen der Micro-90- und MXene-Schichten. Die meisten Reinräume der Universität verfügen über Schleuderbeschichtungsanlagen. | |
| Stereotaktischer Rahmen | Kopf Instruments | Modell 902 | Zur Positionierung der Ratte für die Neurochirurgie |
| Teflonbeschichteter magnetischer Rührstab | Corning | REF: 1233W95 | Wird zum Rühren während des Ätzens und Interkalierens verwendet |
| Titancarbid, 99,5% (Metallbasis), Partikelgröße ~2 &Mikro; m | Alfa Aesar | CAS: 12070-08-5 | Wird für die MAX-Synthese |
| verwendet Titanpulver, -325 mesh, 99% (Metallbasis), Partikelgröße < 44µ m | Alfa Aesar | CAS: 7440-32-6 | Wird für die MAX-Synthese |
| verwendet Ultraschallbad-Ultraschall-Ultraschall-Ultraschallgerät | Reynolds Tech | Zum Entfernen von Metall- und Fotolackpartikeln während des Lift-off-Prozesses zur Strukturierung von Metallen. | |
| UV-Vis-Spektralphotometer | ThermoScientific | Evolution 201 | Zur Bestimmung der Konzentration und zur Beobachtung des Absorptionspeaks |
| Zetasizer, Partikelgrößenanalyse | Malvern Panalytical | Nano ZS | Zur Bestimmung der lateralen Größenverteilung der Partikel |
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