Dissektionstechniken und histologische Probenahme des Herzens in Großtiermodellen für Herz-Kreislauf-Erkrankungen

Zusammenfassung

Aufgrund der komplexen Anatomie kann ein konsistent reproduzierbares Dissektions- und Entnahmeprotokoll für Herzproben schwierig umzusetzen sein. Dieses Manuskript präsentiert die Schlüsselelemente einiger Standardprotokolle zur kardialen Dissektion und hebt sowohl die groben Untersuchungsansätze als auch die üblicherweise für histopathologische Untersuchungen verwendeten Probenahmestellen hervor.

Zusammenfassung

Die Standard-Bruttountersuchung und Probenahme sind Schlüsselelemente für die Reproduzierbarkeit und den Erfolg experimenteller Studien zu Herz-Kreislauf-Erkrankungen an Großtieren. In Anbetracht der komplexen Anatomie des Herzens, der Unterschiede zwischen den Arten und der Arten von kompensatorischen und pathologischen Reaktionen sind konsistente Protokolle schwierig zu implementieren. Die Verwendung mehrerer Dissektionsprotokolle wird in der Regel an die Erfahrung des Prosektors angepasst, und persönliche Präferenzen sind weiterhin eine Quelle experimenteller und interobserver-Variabilität. Ziel ist es, die wichtigsten anatomischen Merkmale und Orientierungspunkte, Sezierprotokolle und histologischen Probenahmestandards des Herzens bei einigen häufig verwendeten Arten (einschließlich Hunden, Schweinen, Wiederkäuern und Katzen) als Modelle für Herz-Kreislauf-Erkrankungen darzustellen.

Zwei Standard-Bruttoprüfungsprotokolle werden hier vorgestellt. Erstens die Zufluss-Abfluss-Methode, die der physiologischen Blutflussrichtung durch das Herz und große Gefäße folgt (häufig bei Hunden, Wiederkäuern und Schweinen verwendet), und zweitens die Vierkammer-Dissektionstechnik (am Beispiel bei Katzen). Beide Techniken können unter bestimmten experimentellen Bedingungen an jede Art angepasst werden. Die Probenahmeprotokolle umfassen alle relevanten Bereiche (Sinusknoten, Ventrikel, interventrikuläres Septum, Vorhöfe, Klappen und Aorta) und verbessern bei ordnungsgemäßer Durchführung sowohl die Reproduzierbarkeit als auch die Zuverlässigkeit experimenteller Studien.

Einleitung

Aufgrund der komplexen Anatomie und frühen Strenge, die die Beurteilung der Herzwanddicke beeinträchtigen können, ist die grobe Untersuchung des Herzens anspruchsvoll und anfällig für mehrere Technik- oder Interpretationsfehler. Dies wird durch die interspezifischen morphologischen Variationen und durch die Tatsache verstärkt, dass viele klinische, schwere Herzpathologien (einschließlich früher Fälle von koronaren Herzkrankheiten, Fibrose, Arteriitis und Amyloidose) nicht mit groben Veränderungen verbunden sind, sondern im Wesentlichen histologische Pathologien sind. Ein standardisiertes Dissektions- und histologisches Probenentnahmeprotokoll kann Konsistenz zwischen ....

Protokoll

Das Versuchsprotokoll erhielt eine bioethische Vereinbarung (Nr. 311 von 2022) und wurde von der Bioethikkommission der Universität für Agrarwissenschaften und Veterinärmedizin Cluj-Napoca in Übereinstimmung mit den nationalen (Gesetz Nr. 43 von 2014) und europäischen (EU-Richtlinie Nr. 63 von 2010) Gesetzgebung genehmigt. Einzelheiten zu allen in diesem Protokoll verwendeten Materialien und Instrumenten finden Sie in der Materialtabelle .

1. Nekropsie-Protokoll

HINWEIS: Es wird empfohlen, für alle vorgestellten Arten dasselbe Nekropsieprotokoll zu verwenden, da der Zugang erleicht....

Ergebnisse

Dieses Protokoll wurde verwendet, um anatomische Merkmale zu visualisieren und Proben für die histologische Untersuchung des Herzens in vier verschiedenen Arten (Hund, Katze, Schwein und Kuh) zu sammeln. Das Nekropsieprotokoll wurde bei jeder der oben genannten Arten wiederholt, aber nur bei Hunden veranschaulicht. Das Nekropsieprotokoll beginnt mit einer umfassenden externen Untersuchung des Körpers (Abbildung 1A) (einschließlich der Haut, der erforschbaren Lymphknoten und der äußeren Schle.......

Diskussion

Bei der Durchführung des aktuellen Protokolls sollten mehrere kritische Schritte sorgfältig berücksichtigt werden, um konsistente Ergebnisse zu erzielen. Bei jungen Tieren unterscheiden sich die Herzmessungen von denen bei Erwachsenen (einschließlich der ventrikulären Wanddicke), und im Allgemeinen macht das Herz einen größeren Anteil des Körpergewichts aus^11,12. Der Grad der ventrikulären Hypertrophie kann durch Anwendung einer allgemeinen Gewichtsformel quantif.......

Materialien

Liste der in diesem Artikel verwendeten Materialien

Name	Unternehmen	Katalognummer	Kommentare
0,9%ige Kochsalzlösung	B. BRAUN MELSUNGEN AG		Zum Waschen des gesamten Blutes und der Blutgerinnsel aus dem Herzen.
10% neutral gepuffertes Formalin (NBF)	Q Path	11699404	Materialien für die Entnahme histopathologischer Proben.
Knochenschneidezange	HELEN SRL	LS109HV	Robustes Instrument zum Schneiden von Knochen.
Schneidebrett	Ambition	86304	Für eine einfachere Handhabung und das Schneiden der Organe.
Entkalkungslösung	Thermo Scientific TBD-2	6764004	1:1 Mischung aus 8%iger Ameisensäure und Salzsäure.
Digitalkamera	Canon Inc.	PowerShot SX540 HS	Für fotografische und videografische Dokumentationen.
Pinzette	MKD-Medicale	15-430	Instrumente zum Sezieren.
Histologische Kassetten	Q Path	720-2215	Materialien für die Entnahme histopathologischer Proben. Abmessungen: 3 & x 2,5 x 0,4 cm
Messer	TEHNO FOOD COM SERV SRL	D2006/15	Scharfe Klinge zum Schneiden von Weichgewebe.
Latexhandschuhe	MKD-Medicale	SANTEX-S	Schutzausrüstung.
Maske	MKD-Medicale	21221	Schutzausrüstung.
Petrischalen	MKD-Medicale	0598-1V	Materialien zur Entnahme von Zusatzproben.
Kunststoffbehälter	Corning Gosselin	TP200-02	Materialien für die Entnahme histopathologischer Proben.
Waage	ESPERANZA	MEEKS008	Zum Wiegen der Organe.
Waage	White Deals	72	Zum Wiegen der Probanden.
Skalpell	MKD-Medicale	10322E	Scharfe Klinge zum Schneiden von Weichgewebe.
Schere	MKD-Medicale	13-260	Sezierinstrumente.
Scrub	MKD-Medicale	410100-52	Schutzausrüstung.
Spritzen	MKD-Medicale	10573EU	Materialien zur Entnahme von Zusatzproben.