Das vorliegende Protokoll beschreibt alle wesentlichen Schritte für eine erfolgreiche Uterustransplantation (UTx) bei Ratten. Das Rattenmodell hat sich als geeignet erwiesen, die klinische Implementierung von UTx zu fördern; Ratten-UTx ist jedoch ein hochkomplexes Verfahren, das sorgfältige Anweisungen erfordert.
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Methodenartikel
Chirurgischer Ansatz, Herausforderungen und Lösungen für die Uterustransplantation bei Ratten
In diesem Artikel
Zusammenfassung
Zusammenfassung
Die Uterustransplantation (UTx) ist ein neuer Ansatz zur Behandlung von Frauen mit absoluter Uterusfaktor-Infertilität (AUFI). Schätzungsweise 3%-5% der Frauen leiden an AUFI. Diesen Frauen wurde bis zum Aufkommen von UTx die Möglichkeit genommen, Kinder zu bekommen. Die klinische Anwendung von UTx wurde durch experimentelle Studien an Tieren vorangetrieben, und die erste erfolgreiche UTx wurde bei Ratten erzielt. Ratten sind aufgrund ihrer physiologischen, immunologischen, genetischen und reproduktiven Eigenschaften ein geeignetes Modellsystem für solche Transplantationen. Insbesondere die kurze Tragzeit ist ein klarer Vorteil, da der übliche Endpunkt der experimentellen UTx eine erfolgreiche Schwangerschaft mit Lebendgeburt ist. Die größte Herausforderung für Rattenmodelle bleibt die kleine Anatomie, die fortgeschrittene mikrochirurgische Fähigkeiten und Erfahrungen erfordert. Obwohl UTx in der Klinik zu einer Schwangerschaft geführt hat, ist das Verfahren nicht etabliert und bedarf einer kontinuierlichen experimentellen Optimierung. Hier wird ein detailliertes Protokoll vorgestellt, einschließlich der wesentlichen Fehlerbehebung für Ratten-UTx, von dem erwartet wird, dass das gesamte Verfahren für Personen ohne Erfahrung mit dieser Art der Mikrochirurgie leichter verständlich ist.
Einleitung
Die Uterustransplantation (UTx) ist eine neuartige Behandlung der absoluten Uterusfaktor-Unfruchtbarkeit (AUFI). AUFI resultiert aus einem Fehlen (angeboren oder erworben) oder einer Fehlbildung der Gebärmutter und betrifft 3%-5% der Frauen weltweit1. Ethische, rechtliche oder religiöse Gründe schließen eine Adoption oder Leihmutterschaft für viele Frauen aus, die den Wunsch nach Mutterschaft haben, aber unter AUFI2 leiden. Für diese Frauen bleibt UTx die einzige Möglichkeit, eine eigene Familie zu gründen. UTx wurde in der Klinik eingesetzt, wenn auch mit gemischtem Erfolg; Das Verfahren ist technisch anspruchsvoll und ....
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Protokoll
Alle Tierversuche wurden nach der schweizerischen Tierschutzverordnung durchgeführt und vom Veterinäramt Zürich (Nr. 225/2019) bewilligt, um die menschliche Versorgung zu gewährleisten. Weibliche reine Lewis-Ratten (Körpergewicht 170-200 g) und weibliche jungfräuliche Braune Norwegenratten (170-200 g) wurden als Gebärmutterspender/-empfänger verwendet, während männliche Lewis-Ratten (300-320 g) für die Paarung verwendet wurden. Die Ratten waren zwischen 12 und 15 Monate alt. Die Tiere stammten aus kommerziellen Quellen (siehe Materialtabelle) und wurden unter kontrollierten Bedingungen und in einer angereicherten Umgebung mit freiem Zugang zu Wasser u....
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Ergebnisse
Es werden Ergebnisse aus zwei Gruppen von Ratten vorgestellt. UTx wurde vor (Gruppe 1, n = 8) und nach (Gruppe 2, n = 8) Protokollanpassung (Tabelle 1) durchgeführt, um die Auswirkungen unserer Modifikationen zu demonstrieren (siehe die Diskussion für eine Erläuterung unserer Modifikationen)12,15,21.
Das Ergebnis von Ratten-UTx ist mit drei Schlüsselphasen verbunden. .......
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Diskussion
Das hier vorgestellte Protokoll bietet detaillierte Anweisungen für das chirurgische Vorgehen bei der Uterustransplantation bei Ratten. Das Protokoll wurde optimiert, um die Wahrscheinlichkeit von Lebendgeburten nach UTx und anschließender Paarung zu erhöhen. Das ursprüngliche Protokoll wurde von der Brännström-Gruppeübernommen 12,13, inspiriert von der Mausarbeit von Akouri et al.10, und auf der Grundlage der Erfahrungen der Autoren in de.......
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Offenlegungen
Die Autoren erklären, dass sie keine Interessenkonflikte haben.
Danksagungen
Diese Studie wurde vom Schweizerischen Nationalfonds unterstützt (Projektbeitrag Nr. 310030_192736). Wir danken Dr. Frauke Seehusen vom Institut für Veterinärpathologie der Universität Zürich für ihre histopathologische Unterstützung.
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Materialien
| Name | Unternehmen | Katalognummer | Kommentare |
|---|---|---|---|
| Zur Seite abgewinkelte Schere 5 mm | F.S.T | 15008-08 | |
| Große Büroklammer | Nein spezifisch | Wird als Retraktor | |
| verwendet stumpfe Biegenadel G30 | Unimed S.A. | ||
| Bupivacain 0,5% | Sintetica | ||
| Buprenorphin 0,3 mg/ml | Temgesic | ||
| Dosiernadel G25 | H.SIGRIST& PARTNER AG | ||
| Dumont #5SF Pinzette | F.S.T | 11252-00 | |
| Ethilon 10/0 | Ethicon | 2810G | |
| Ethilon 6/0 | Ethicon | 667H | |
| Ethilon 7/0 Ethicon | EH7446H | ||
| Ethilon 8/0 | Ethicon | 2808G | |
| Femal Brown Norway Rats (150-170 g) | Janvier | ||
| Femal Lewis Rats (150-170 g) | Charles River Deutschland | ||
| Feine Schere - Scharf | F.S.T | 14060-09 | Jede andere kleine Schere funktioniert auch |
| Halsey Micro Needle Holder | F.S.T | 12500-12 | Jeder andere kleine Halter funktioniert zu |
| Heparin Natrium 25000 I.E./ 5 mL | B. Braun | ||
| Institute Georges Lopez Perfusionslösung ( IGL) | Institut Georges Lopez | Lösung zur Organerhaltung | |
| Männliche Lewis-Ratten (300-320 g) | Charles River Deutschland | ||
| Micro Serrefines 13 mm | F.S.T | 18055-04 | |
| Micro Serrefines 16 mm gebogen | F.S.T | 18055-06 | |
| Micro-Serrefine Clamp Applikator mit Lock | F.S.T | 18056-14 | |
| Mö lnlyncke op towel | mö lnlyncke | 800300 | Steriltuch |
| NaCl 0.9% | B.Braun | ||
| Octenisept | Schü lke | ||
| Papierklebeband | Tesa | Zum Fixieren des Tieres | |
| Philips Avent Schneller Flaschenwä rmer SCF358/02 | Philips | 12824216 | |
| Ringerfundin | B.Braun | ||
| Rompun 2% | Bayer | Xylazine | |
| Nadelhalter mit rundem Griff | F.S.T | 12075-12 | |
| Nadelhalter mit rundem Griff | F.S.T | 12075-12 | |
| S& T-Gefäß-Dilatationszange - abgewinkelt 45°; | F.S.T | 00276-13 | |
| Sacryl Naht | KRUUSE | 152575 | |
| Scapel No 10 | Swann Morton | 201 | |
| Small Histo-Container Jeder kleine Histo-Container | eignet sich gut für die Kühllagerung des Transplantats | ||
| Kleine Plastiktüten | durchsichtigen Plastiktüten sind in Ordnung | ||
| Steril Wattestäbchen | Lohmann-Rauscher | Jedes sterile Wattestäbchen ist fein | |
| Sterile Gaze | Lohmann-Rauscher | Jede sterile Gaze ist fein | |
| Gerade Schere 8mm | F.S.T | 15024-10 | |
| Operationsmikroskop – SZX9 | Olympus | OLY-SZX9-B | |
| Sutter Non Stick GLISS 0,4 mm | Sutter | 78 01 69 SLS | |
| Nahtbindezange | F.S.T | 00272-13 | |
| ThermoLux Wärmematte | ThermoLux | ||
| Gewebezange für die Haut | Alle Gewebezangen sind fein | ||
| Vesseldilatator Pinzetten | F.S.T | 00125-11 | |
| Vicryl plus 4/0 | Ethicon | VCP292H |
Referenzen
- Richards, E. G., et al. Uterus transplantation: state of the art in 2021. Journal of Assisted Reproduction and Genetics. 38 (9), 2251-2259 (2021).
- Jones, B. P., et al. Op....
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Nachdrucke und Genehmigungen
