Method Article

Längsschnitt-Mikro-Computertomographie-Bildanalyse für benutzerdefinierte Region of Interest bei Knochendefekten kritischer Größe

DOI:

10.3791/67904

June 24th, 2025

In This Article

Summary

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Wir stellen eine Methode zur Analyse einer benutzerdefinierten Region of Interest (ROI) in einem longitudinalen in vivo Ratten-Radialdefektmodell vor. Diese Methode ermöglicht eine vergleichende Analyse zwischen verschiedenen Gerüsten, die zuvor durch Schwankungen des Sichtfelds des Scans mit Mikrocomputertomographie (μCT), der Probenorientierung und der Basislinienpräsenz des Gerüsts begrenzt waren.

Abstract

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Die bildgebende Analyse des Knochenvolumens mit Mikro-Computertomographie (μCT) ist ein notwendiges quantitatives Instrument zur Untersuchung des Knochenregenerationspotenzials und der Ergebnisse im Rahmen von Längsschnitt-In-vivo-Studien . Etablierte Methoden zur Knochensegmentierung nutzen Visualisierungssoftware für die μCT-Segmentierung des gesamten Knochens und die Ausrichtung komplexer anatomischer Strukturen. Diese Segmentierungsprotokolle bieten eine robuste, hochgenaue Methode für die Segmentierung, Ausrichtung und Analyse, sind jedoch in ihren Möglichkeiten der benutzerdefinierten ROI-Analyse (Region of Interest) eingeschränkt. Wir stellen ein Protokoll vor, das diese Methoden erweitert, um eine benutzerdefinierte ROI-Knochenvolumenanalyse rund um einen Knochendefekt kritischer Größe zu ermöglichen. Der benutzerdefinierte ROI rund um den Defekt kann im Laufe der Zeit für in vivo Längsschnittstudien analysiert werden. In dieser Arbeit untersuchen wir μCT-Bilder von drei einzigartigen Rattenproben, denen jeweils ein Kontrollgerüst aus Polycaprolacton (PCL) implantiert wurde. Die Modelle werden von drei Benutzern (2 erfahrene und 1 Anfänger) zu Zeitpunkten von 0 und 6 Wochen analysiert, um die Fähigkeit zu veranschaulichen, einen ROI rund um einen Defekt kritischer Größe während einer Längsschnittstudie zu messen.

Introduction

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Knochendefekte kritischer Größe stellen erhebliche klinische Herausforderungen für das orthopädische Behandlungsmanagement dar. Gemäß ASTM F2721 ist ein Defekt kritischer Größe als ein Defekt mit einer Länge von 1,5 bis 2 mal so groß wie der Durchmesser des interessierenden Knochens1. Die Reparatur dieser Defekte erfolgte traditionell durch den Einsatz von autologen und allogenen Transplantationen, die durch die Verfahrenskosten, die damit verbundenen Risiken sekundärer Operationen und das erforderliche Knochentransplantatvolumen begrenzt waren2. Aktuelle Knochenregenerationstechniken ko....

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Protocol

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μCT-Längsschnittbilder für diese Studie wurden in den Wochen 0 und 6 von 3 mm kritischen radialen Defekten bei erwachsenen weiblichen Charles River SASCO-SD-Ratten aufgenommen, die mit einem Polycaprolacton (PCL)-basierten Gerüst behandelt wurden. Die gesamte Verwendung von Tieren erfolgte in Übereinstimmung mit den Protokollen, die vom Committee on Animal Resources (UCAR) der Universität Rochester genehmigt wurden. Die μCT-Bildaufnahme wurde mit Scanco Medical VivaCT 40 durchgeführt.

HINWEIS: Die Hauptschritte in diesem Protokoll sind unterteilt in μCT-Bildsegmentierung, Ausrichtung, ROI-Auswahl und -Zuschneiden sowie Analyse und Visualisi....

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Results

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μCT-Bilder von drei einzigartigen Rattenmodellen, die jeweils mit einem Polycaprolacton (PCL)-Gerüst behandelt wurden, wurden untersucht, um positive Ergebnisse zu veranschaulichen. Die Analyse einer Längsschnittstudie über Zeitpunkte hinweg erfordert, dass die gesammelten Volumenmodelle vor der Auswahl und dem Zuschneiden auf einen ROI ausgerichtet werden. Um diese Fähigkeit über mehrere Wochen hinweg zu veranschaulichen, wurden Volumenmodelle, die in den Wochen 0 und 6 gesammelt wurden, anhand gemeinsamer Regionen ausg.......

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Discussion

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Die Quantifizierung der Knochenvolumenveränderung ist für die Untersuchung des Knochenregenerationspotenzials und der Ergebnisse in longitudinalen In-vivo-Studien unerlässlich. Dieses Protokoll baut auf etablierten μCT-Bildsegmentierungsmethoden11 auf und bietet einen systematischen Ansatz zur Spezifizierung eines benutzerdefinierten Region of Interest (ROI). Diese Technik war entscheidend bei der Analyse der Wirksamkeit von Knochengerüstimplantaten für <.......

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Disclosures

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Die Autoren haben keinen Interessenkonflikt offenzulegen.

Acknowledgements

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Wir danken Mark Kenney für die Schulung zu aktuellen Prozessen und Diskussionen bei der Entwicklung dieses Prozesses sowie Lindsay Schnur vom Biomechanics and Multimodal Tissue Imaging Core an der University of Rochester. Diese Studie wurde durch Zuschüsse von NIH/NIAMS unterstützt: H.A.A. (R01AR07061, P50AR072000 und P30AR069655) und V.Z.Z (T32GM007356, T32GM152318 und T32AR076950).

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Materials

List of materials used in this article
NameCompanyCatalog NumberComments
Amira 3DFEI SAS, ein Teil von Thermo Fisher Scientificv2024.1Programm zur Segmentierung von microCT-Bildern.
Graph Pad PrismaGraphPad Software GmbHv10.0.3 (217)Programm, das für die Entwicklung von Graphen verwendet wird.
R Statistische SoftwareDie R Foundation für statistisches Rechnenv4.4.0 (24.04.2024)Programm zur Durchführung der ICC-Analyse.
Scanco Medical VivaCT 40Scanco MedizinNAmicroCT-Scanner zur Erfassung von microCT-Bildern.

References

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  1. ASTM Standard F-2721-09. Standard Guide for Pre-clinical in vivo Evaluation in Critical Size Segmental Bone Defects. , ASTM International. West Conshohocken, PA. (2023).
  2. Amini, A. R., Laurencin, C. T., Nukavarapu, S. P. Bone tissue engineering: recent advances and challenges. Crit Rev Biomed Eng.

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Micro Computed TomographyBone Volume AnalysisLongitudinal ImagingRegion Of InterestCritical Sized DefectBone RegenerationImage RegistrationPolycaprolactone ScaffoldVolume QuantificationRat Bone Model

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