Methodenartikel

Herstellung einer erweiterbaren Gehirnmatrix, die über Entwicklungsstadien hinweg anpassbar ist

DOI:

10.3791/68638

⸱

20. Februar 2026

 ,  ,  ,  ,  ,  , 
1Spinal Cord and Brain Injury Research Center, Department of Physiology, College of Medicine, University of Kentucky, 2Department of Biomedical Engineering, College of Engineering, University of Kentucky, 3Department of Neurosurgery, University of Kentucky

In diesem Artikel

Zusammenfassung

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Eine innovative Methode, um dehnbare Gehirnmatrizen zu bauen, um entweder koronale oder sagittale Schnitte zu schneiden, wird für die Anwendung bei Neugeborenenferkeln beschrieben. Dieser preisgünstige Ansatz verwendet Acrylplatten, die mit Vorlagen aus Agarose-Gel-Gehirnformen geschnitzt wurden, trägt mehrere Arten an und ermöglicht eine Erweiterung, um das Gehirnwachstum zu ermöglichen.

Zusammenfassung

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Das zunehmende Interesse daran, neugeborene Ferkel als Studienmodell für die neonatale Entwicklung und Pathologie zu verwenden, hat den Bedarf an einer Gehirnmatrix erhöht, um histologische Schnitte genau zu erfassen. Das schnelle Wachstum des Neugeborenenhirns begrenzt jedoch den Nutzen kommerziell verfügbarer Matrizen auf ein enges Entwicklungsfenster. Daher wurde eine verstellbare Methode zur Konstruktion der Gehirnmatrix entwickelt. Zuerst wurde ein Glasbehälter auf nasses Eis gestellt, und eine Schicht 4%iges Agarose-Gel wurde am Boden aufgelegt. Anschließend wurde ein formalinfixiertes Gehirn auf diese Schicht gelegt und mit 4%-Agarose-Gel eingebettet. Nachdem das Gel verfestigt war, wurde das Gel über dem Gehirn vorsichtig entfernt und das Gehirn entnommen. Die Höhlung wurde mit 4 % Agarose-Gel und 2 % Indian Ink gefüllt. Nach der Verfestigung wurde der Gelblock entfernt und in die gewünschte Dicke (2 mm oder 5 mm) und Orientierung (koronal oder sagittal) geschnitten, um die Gehirnvorlagen auf Skalenpapier zu drucken. Die Schablonen wurden auf eine Reihe transparenter Acrylplatten (2 mm oder 5 mm Dicke) kopiert und entsprechend auf einer Bandsäge ausgeschnitten. Schließlich wurden die Platten zusammengebaut und mit drei Schrauben und Muttern durch vorgebohrte Ausrichtungslöcher gesichert, um eine individuell angepasste Gehirnmatrix zu erstellen. Der Aufbau sowohl der koronalen als auch der sagittalen Matrizen ist für ein neonatales Ferkel am 5. Tag mit Schritten von 2 mm und eine koronale Matrix für das Gehirn am postnatalen Tag 32–38 mit Schritten von 5 mm dargestellt. Durch das Hinzufügen oder Entfernen geeigneter Acrylplatten wurde die Matrix angepasst, um sich an die verschiedenen Größen der Ferkelhirne anzupassen. Daher wird der neurologischen Forschungsgemeinschaft eine einfache und kostengünstige Methode zur Anpassung von Gehirnmatrizen für verschiedene Größen großer Tiere vorgestellt.

Einleitung

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Die Gehirnentwicklung des Ferkels ähnelt stark der des Menschen 1,2,3,4. Daher wächst das Interesse daran, Ferkel für präklinische Studien zu neuroentwicklungsbedingten Störungen, neonatalen und pädiatrischen Erkrankungen sowie Verletzungen einzusetzen (Abbildung 1A,B)5,6,7,8,9,10. Wie in Abbildung 1 zu sehen ist, hat das neonatale Ferkel als großes Tiermodell eine Schädel- und Gehirngröße, die näher an die eines frühgeborenen menschlichen Fötus liegt (Abbildung 1A,B), während die Schädel der erwachsenen Maus und der Ratten mindestens zwei Größenordnungen kleiner sind.

Es gibt jedoch Herausforderungen bei der Verwendung größerer Säugetiere in der biomedizinischen Forschung im Vergleich zu den weiter verbreiteten Mausmodellen. Neugeborene Ferkelhirne wachsen in den ersten drei Monaten nach der Geburt schnell. In den ersten 5 Lebenswochen verdoppelt sich das Gehirn des Ferkels fast im Gewicht und verdreifacht sich im Volumen (Abbildung 1C)4,11,12,13. Im Zeitraum von p5 bis p38 waren das Gehirnwachstum und die Entwicklung von Gyri und Sulci bemerkenswert (Abbildung 1C). Das Gewicht und Volumen des P5-Ferkels betrug 29,5 g und 18,9 ml, während die beiden P32-Gehirne 51,4 bzw. 52,6 g sowie 49,6 und 53,5 ml wogen. Nach 38 Tagen wuchs das Gehirn auf 53,7 g und 52,5 mL, was einer Gewichtszunahme von 80 % und einem Volumenzuwachs von 170 % gegenüber p5 entspricht. Dieses schnelle Wachstum des neonatalen Schweinehirns stellt eine Herausforderung dar, die histologische Schnittweise von Ferkeln unterschiedlichen Alters, Stämmen oder Geschlechter mit einer einzigen Matrix zu bestimmen.

Kommerzielle Gehirnmatrizen für Ferkel kosten ungefähr zwischen 1.000 und 3.600 US-Dollar und sind nur in einer Größenvariante erhältlich, die für Ferkel ab 2 Wochen entwickelt wurde. Obwohl es einige Publikationen gibt, die die 3D-Scan- und 3D-Drucktechnik genutzt haben, um verschiedene Gehirnmatrizen für Zebrafische, Mäuse und Vögelzu erstellen, sind diese Matrizen in relativ kleinem Maßstab. Es gibt keine etablierte MRT-Bildgebende Serie oder detaillierte Wachstumskurve für die Gehirne von Neugeborenenferkeln, insbesondere für Kinder ab zwei Wochen. Deshalb erstellten wir mehrere Hirnschnitt-Vorlagen mit Gehirnen, die zwischen Tag 5 und Tag 38 gesammelt wurden, auf deren Grundlage ein verstellbares Gehirnmatrixsystem etabliert wurde.

Dieses Protokoll beschreibt eine innovative Methode zur Etablierung von Neugeborenen-Ferkel-Gehirnvorlagen und zur Entwicklung von Acrylplatten-basierten, anpassbaren Gehirnmatrix-Konstruktionen, die für koronale oder sagittale Schnitte von Gehirnen über ein Größenspektrum verwendet werden können.

Zugriff eingeschränkt. Bitte melden Sie sich an oder starten Sie eine Testversion, um diesen Inhalt anzuzeigen.

Protokoll

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

In diesem Artikel wurden die vier Ferkelhirne entnommen und nach humaner Euthanasie für die histologische Färbung vorbereitet, gemäß einem vom Institutional Animal Care and Use Committee (IACUC) der University of Kentucky genehmigten Protokoll für eine separate Studie. Alle Verfahren an Tierprobanden wurden genehmigt, und es wurde eine angemessene Pflege der Tiere durchgeführt, um den Stress oder die Schmerzen im Zusammenhang mit Behandlungen oder Euthanasie zu minimieren.

1. Tiere

  1. Beschaffen Sie vier naive männliche neonatale (postnatale Tag 4, p4) Ferkel (Körpergewicht 1,5–1,8 kg) mit einem genetischen Hintergrund von 62,5 % Landrace, 25 % Large White und 12,5 % Yorkshire.
  2. Halten Sie die Tiere zusammen in einem eigenen Raum in einem Schweinestall, unterstützt von einer Wärmelampe und einem mit Handtuch bedeckten Boden. Füttere sie in der ersten Woche ad libitum mit Milchersatz und gehe nach 2-3 Wochen allmählich auf Pelletfutter um.
  3. Überwachen Sie die physiologische Aktivität und das Körpergewicht und führen Sie wöchentliche MRT-Scans unter Isofluoran-Anästhesie durch.
  4. Euthanasierung mit einer Pentobarbital-Überdosis und transkardiale Perfusierung mit heparinisierter Kochsalzlösung, gefolgt von 10 % neutralem gepuffertem Formalin.
  5. Seziere das Gehirn aus demSchädel 17, fixiere es über Nacht mit Formalin und gib dann 30 % Saccharose in PBS für 3 Tage zur Kryokonservierung ein.

2. Agarose-Gelformung

  1. Tauchen Sie einen Glasbehälter in einen Eimer mit nassem Eis auf halbe Höhe (Abbildung 2A).
  2. Verwenden Sie einen robusten Kunststoffstreifen als Futter für den Behälter und achten Sie darauf, dass Boden und Seitenwände vollständig abgedeckt sind, während beide Enden mindestens 5 cm über der oberen Kante stehen.
  3. Erhitze 150 ml PBS in einem Glasbecher auf 90 °C auf einer Rührplatte mit einem Magnetrührer und gib nach und nach 6 g Agarose hinzu und löse sie auf, um ein 4%iges Agarose-Gel in PBS herzustellen.
  4. Gieße eine 0,5–1 cm dicke Schicht in den Glasbehälter (Abbildung 2B) und warte, bis sie erstarrt ist.
  5. Tragen Sie eine dünne Schicht Mineralöl topisch auf das Gehirn auf (Abbildung 2C) und legen Sie das Gehirn auf die Gelschicht (Abbildung 2D).
  6. Lassen Sie die Agaroselösung auf 50 °C abkühlen. Das Gehirn mit abgekühltem Agarosegel einbetten (Abbildung 2E) und erstarren lassen (Abbildung 2F), was in der Regel ~10 Minuten auf nassem Eis dauert.
  7. Entfernen Sie vorsichtig die oberste Schicht des Agarose-Gels über dem Gehirn (Abbildung 2G) mit einer chirurgischen Sonde und entnehmen Sie das Gehirn aus dem erstarrten Schimmel (Abbildung 2H,I).
  8. Erhitze 98 ml PBS in einem anderen Glasbecher auf 90 °C auf einer Rührplatte mit einem Magnetrührer, gib 4 g Agarose und 2 ml India Ink hinzu und lasse das Rühren und Verrühren gut. Gießen Sie 4 % Agarose mit 2 % India Ink in die vom entfernten Gehirn entstandene Höhlung (Abbildung 2J), bis sie voll ist, und lassen Sie sie 15 Minuten auf nassem Eis erstarren (Abbildung 2K).
  9. Mit den überhängenden Teilen des Kunststoffstreifens heben Sie den Plastikstreifen an, um den gesamten Agaroseblock aus dem Behälter zu entfernen (Abbildung 2L).

3. Agarose-Blockschnitt und Vorlagenkopierung auf maßstabsbasiertes Papier

  1. Um das Papier während des Schneidvorgangs vor Feuchtigkeit zu schützen, legen Sie ein Stück Skalapapier zwischen zwei 0,76 mm (0,03") dicke transparente Acrylplatten (Abbildung 3A) und legen Sie die laminierte Papier-Acrylplatte nahe dem Rand der Werkbank.
  2. Sichern Sie die Eckquadrate mit Klemmen an der Werkbank in einer geeigneten Position, um zwei 5 mm dicke Acrylplatten stehen zu lassen und den Gelblock mit der gewünschten Orientierung (Sagittal in Abbildung 3) fest dazwischen zu halten. Stellen Sie sicher, dass die Kante jeder vertikalen Acrylplatte auf derselben Linie auf dem Skalapapier ausgerichtet ist, um sie als Referenz für das Schneiden des Gelblocks zu verwenden. Verwenden Sie ein Gewicht, um den Gelblock am gegenüberliegenden Ende zu befestigen, wo das Schneiden stattfindet (Abbildung 3B).
  3. Mit dem darunterliegenden Skalapapier als Orientierung bewegen Sie den Gelblock von zwischen den Acrylplatten im gewünschten Schritt (2 mm oder 5 mm) nach vorne, halten Sie die Mikrotome-Klinge mit beiden Händen und schneiden Sie den Teil jenseits der vorderen Kante der Acrylplatte (Abbildung 3B).
  4. Sammeln Sie jede Scheibe (Abbildung 3C), legen Sie sie auf ein separates Maßstabspapier (Abbildung 3D), drücken Sie den mit Indien-Tinte gefärbten Teil des Abgusses vorsichtig auf das Maßstabspapier, um die Umrisse zu übertragen (Abbildung 3E), zeichnen Sie mit einem Stift die Kontur des gesamten Gelabschnitts nach, entfernen Sie den Gelabschnitt und umreißen Sie den India-Tintenabdruck ebenfalls mit einem Stift (Abbildung 3F). Achten Sie darauf, die Ausrichtung jeder Scheibe und die kopierte Vorlage konsistent zu halten.
  5. Wiederholen Sie die Schritte 2.3 und 2.4, bis alle Gelstücke auf das Waagepapier kopiert und nacheinander nummeriert sind. Überprüfen Sie die Schnitte und ihre Abzüge erneut (repräsentative Bilder von koronalen Schnitten und Abdrücken in Abbildung 3G, H).

4. Acrylplattenschnitzerei

  1. Schneiden Sie Rillen auf die große Acrylplatte mit einem Plexiglas-Schneidemesser und brechen Sie die großen Platten in 10 x 8,5 cm große Stücke.
    HINWEIS: Die Gesamtanzahl der Stücke hängt von der Gehirngröße, der gewünschten Schnittdicke und der Schnittausrichtung ab. In der Regel bereiten wir 25 Stücke 2-mm-Acrylplatten für eine koronale oder sagittale Matrix für neonatale Ferkelhirne und 15 Stücke 5-mm-Platten für größere Gehirne für einfachere Handhabung vor.
  2. Markiere drei Verankerungslöcher auf der Acrylplatte bei x, y-Koordinaten, gemessen aus der linken unteren Ecke (in mm): (11, 42); (45, 15); und (88, 42).
  3. Sichern Sie die Acrylplatten mit der Unterstützung von Eckquadraten und Klemmen auf der Plattform der Bohrmaschine. Bohren Sie drei Verankerungslöcher an den genannten Koordinaten mit einem Bohrer aus Acrylplatten (Abbildung 4A). Zeichnen Sie eine Farblinie auf der rechten Seite aller Platten, um die Orientierung anzuzeigen.
  4. Entfernen Sie die Schutzfolie von der Acrylplatte und legen Sie sie über die Schablone auf das Skalapapier, wobei Sie die obere Kante der Acrylplatte an die oberen Linien der auf das Skalapapier kopierten Vorlage ausrichten. Zeichnen Sie die Umrisse des Gehirns mit einem permanenten Filzstift auf die Acrylplatte (Abbildung 4B). Beschrifte das Kennzeichen nacheinander wie in der Vorlage.
  5. Schneiden Sie die Acrylplatte auf der Bandsäge entlang der Schablone entlang (Abbildung 4C). Alternativ können Sie ein Drehwerkzeug mit einem Mehrzweck-Schneidset und einer Holzschnitzspitze verwenden, um unerwünschte Stellen zu entfernen.
  6. Poliert die Schnittkante mit dem Drehwerkzeug und einer Schleifspitze zum Polieren, um die vom Schneidwerkzeug hinterlassenen Kanten zu glätten (Abbildung 4D).
  7. Überprüfen Sie die Schnitte auf den Acrylplatten erneut mit der Schablone auf dem Skalapapier (Abbildung 4E). Schneiden und polieren, falls nötig.
  8. Setzen Sie die Matrix vor, indem Sie die geschnittenen Platten nacheinander stapeln, und überprüfen Sie die Ausrichtung der Platten (Abbildung 4F).

5. Zusammensetzung und Expansion der Gehirnmatrix

  1. Platzieren Sie drei Unterlegscheiben zwischen Acrylplatten, jede zentriert auf einem Verankerungsloch (Abbildung 5A). Kleben Sie sie mit Sekundenkleber um die Verankerungslöcher auf derselben Seite wie alle Acrylplatten, um die Montagezeit zu verkürzen (Abbildung 5A).
  2. Stapeln Sie die Acrylplatten nacheinander, führen Sie Edelstahlschrauben durch jedes Verankerungsloch, um die Matrix zusammenzusetzen, und ziehen Sie die Muttern fest (Abbildung 5A).
  3. Wenden Sie das letzte Polieren der Schnittkanten, die das Gehirn berühren, um die Platten zu glätten.
  4. Farbcodieren Sie oben in der Matrix, um die Schritte beim Schneiden zu identifizieren. Färbt abwechselnd die oberen Kanten der Platte mit Schwarz, Rot und dann Blank, um ein Muster zu formen. Wiederholen Sie diesen Schritt, bis alle Platten mit demselben Muster farblich codiert sind (Abbildung 5).
  5. Um die Geometrie anzupassen oder die Hohlraumgröße an bestimmte Gehirne anzupassen, entfernen oder fügen Sie ausgewählte Acrylplatten hinzu (Abbildung 5B), um sich an verschiedene Gehirngrößen anzupassen, was die Flexibilität dieser Matrizen erheblich erhöht und Material und Aufwand spart.

6. Koronale oder sagittale Schnitte des Gehirns

  1. Wickeln Sie ein Ende der hochprofiligen Kryostatklinge mindestens 2 cm lang mit Laborband, um die Hand des Benutzers zu schützen. Setzen Sie das Gehirn sicher in die Matrixhöhle. Halten Sie das umwickelte Ende der Klinge vorsichtig zwischen die Acrylplatten der Matrix und schneiden Sie dann das Gehirn in koronale oder sagittale Schnitte, wobei das Gehirn von der anderen Hand gestützt und gesichert wird (Abbildung 6A,B).
    HINWEIS: Vorsicht: 1) Da nach der Formalinfixierung jeder Gehirnteil unterschiedliche Texturen aufweist, ist Vorsicht geboten, gleichmäßigen Druck auf die Klinge auszuüben. 2) Außerdem ist das Gehirn des Ferkels groß, daher ist es besser, eine schneidende Bewegung zu verwenden, um das Gehirn zu schneiden, als eine direkte "Drück"-Schneidbewegung. 3) Es ist entscheidend, dass das Gehirn während des Schneidens mit Unterstützung der anderen Hand eng in die Matrix passt, um eine Neigung oder Orientierungsänderung zu vermeiden. Übermäßiger Druck auf das Gehirn gegen die Matrix sollte jederzeit vermieden werden.
  2. Geben Sie alle Scheiben in eine mit PBS gefüllte 6-Well-Platte oder ein Edelstahlblech. Legen Sie die Scheiben sorgfältig in derselben Ausrichtung aus (Abbildung 6C, D) und bewahren Sie oder fahren Sie bei Bedarf fort.

Zugriff eingeschränkt. Bitte melden Sie sich an oder starten Sie eine Testversion, um diesen Inhalt anzuzeigen.

Ergebnisse

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Ein Ferkel wurde im Alter von P5 mit einer Pentobarbital-Überdosis eingeschläfert. Die anderen drei Tiere zeigten normale physiologische Aktivitäten und eine ähnliche Gewichtszunahme (erreichten 7,44–8,4 kg). Zwei Ferkel erhielten wöchentliche MRT-Untersuchungen unter Isofluran-Anästhesie, bis sie auf P32 eingeschläfert wurden. Das vierte Ferkel blieb naiv bis zur Euthanasie auf S. 38.

Die Kopfgrößenähnlichkeit zwischen Ferkel und menschlichem Fötus ist in

Zugriff eingeschränkt. Bitte melden Sie sich an oder starten Sie eine Testversion, um diesen Inhalt anzuzeigen.

Diskussion

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Dieses Protokoll stellt die Methodik vor, um erschwingliche und leicht aufzubauende Gehirnmatrizen zu erstellen, die beim Schneiden des Ferkelshirns oder anderer großer Tierarten in der gewünschten Ausrichtung und Dicke unterstützt werden können. Wichtig ist, dass im Gegensatz zu kommerziellen "festen Matrizen", die nur mit einem begrenzten Bereich von Gehirngrößen arbeiten, dieser Ansatz es ermöglicht, die Matrix bequem anzupassen oder zu erweitern, um eine breite Palette von Gehirngröß...

Zugriff eingeschränkt. Bitte melden Sie sich an oder starten Sie eine Testversion, um diesen Inhalt anzuzeigen.

Offenlegungen

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Die Autoren haben keine Interessenkonflikte, die offengelegt werden müssen.

Danksagungen

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Diese Arbeit wurde von den National Institutes of Health (NIH) #R21-NS114771 (K.E.S.), #R56-NS117587, #R01-EB028792, #R01-HD101508, #R21-HD091118, #R41-NS122722, #R42-MH135825 (G.Y.), der American Heart Association (AHA) #16GRNT30820006 (G.Y.) und #14SDG20480186 (L.C.) sowie dem University of Kentucky Neuroscience Research Priority Area (L.C.) unterstützt. Die naiven männlichen neonatalen Schweine wurden über die Division of Laboratory Animal Resources (DLAR) vom Swine Center des College of Agriculture der University of Kentucky gekauft.

Zugriff eingeschränkt. Bitte melden Sie sich an oder starten Sie eine Testversion, um diesen Inhalt anzuzeigen.

Materialien

Liste der in diesem Artikel verwendeten Materialien
NameUnternehmenKatalognummerKommentare
1/4"-20 x 3-1/2" Edelstahl-Kreuzschlitzschrauben-Maschinenschraube (25 PC), grobes Gewinde, 18-8 (304) Edelstahl, mit Bolzen-DropperBolzen-Dropperhttps://www.amazon.com/
Edelstahl-Kreuzschlitz-Maschine
-Bolt-Dropper/dp/B07D1L8
7VB/ref=sr_1_2?crid=38M
PNERXG39Q3& Stichwörter
=1%2F4%22+3,5+Zoll+
Edelstahl+Schrauben& qid=16427
82626& s=Industriell& Präfix
=1%2F4+3,5+Zoll+Edelstahl
+Bolts%2Cindustrial%2C62
& sr=1-2
10er Packung von 8 x 10" PET-Platten/Plexiglasplatten 0,03" Dick CALPALMYhttps://www.amazon.com/dp
/B084P4YSST/?coliid=I1S59
82XD9P6CB& colid=XJ78FAX
D85BF& psc=1& ref_=lv_ov_lig_dp_it
3-Pack 3/16" (4,5 mm) klare Acrylplatte 8" x 12" gegossenes Plexiglas (0,177") Dicke Nenngröße AZMAZM-Displayshttps://www.amazon.com/4-5mm
-Acryl-Plexiglas-Nominal-AZM
/dp/B082CGYSCK/ref=sr_1_12?
dchild=1& Schlüsselwörter=acryl+blatt
%2C+4,5mm& qid=1617572206& sr=8-12
3  Schulterverkürzender Shim Flat  Unterlegscheiben, 18-8 Edelstahl, 1/2" Bolzengröße, 0,501" Innendurchmesser, 0,750" Außendurchmesser, 0,016" dick (Packung mit 50)Kleine Teilehttps://www.amazon.com/Shoulder-
Shortening-Washer-Edelstahl
l-0-251/dp/B004K1FFZA/ref=sr_1_
3?crid=1K8LO0VN4GLE& dchild=1
& Schlüsselwörter=Waschmaschinen& pd_rd_r=
0ffe510e-abe5-4eae-b975-ed945
08ac71a& pd_rd_w=HuED5& pd_r
d_wg=fixK7& pf_rd_p=b4950e17-f
2f6-494c-bba5-69a9d0aa3887& pf
_rd_r=BRVGS2378CHD1WBC2E
4P& pid=3tntl8w& qid=1617573484
& Verfeinerungen=p_n_feature_twenty
_browse-bin%3A17420898011%2
Cp_n_feature_twenty-one_browse
-bin%3A19047154011& s=industria
l& sprefix=washer%2Bfor%2B%2C
aps%2C202& sr=1-3& th=1
6-BrunnenplatteAvantor76520-650
8-32 Sechskantmutter, grobe Gewinde Sechskantmutter, 18-8 Edelstahl Sechskantmutter, silbern, 100 Stück?Fullerkreghttps://www.amazon.com/Fullerkreg
-Machine-Stainless-Bright-Quantity/
dp/B078S3J765/ref=sr_1_4?crid=4
VSSI5B9MJ2D& Schlüsselwörter=1%2F4
%22-20+Zoll+Edelstahl+
Hex+Mutter+grob+Gewinde& qid=1
642782823& s=Industriell& sprefix
=1%2F4+-20+Zoll+Edelstahl+ste
el+hex+mutter+grob+gewinde%2Cin
dustrial%2C61& sr=1-4
90-Grad-Platzierungsquadrate AluminiumlegierungHINMAYhttps://www.amazon.com/Positioni
ng-Aluminium-Holzbearbeitung-Karpfen
enter-Clamping/dp/B08294FZ7L/r
ef=sr_1_6?crid=1I97TLVRYREPQ
& dchild=1& Schlüsselwörter=Ecke+squ
are& qid=1625683905& sprefix=co
rner+squ%2Caps%2C182& sr=8-6
AgaroseAvantor97062-244
BandsägeSKIL
Geburtsrecht-Milchersatz (Pipestone)PipestoneSKU  8229https://pipevet.com/birthright-baby-pig-milk-replacer
EimerAvantor89233-340
Dremel 4300-5/40 Hochleistungs-RotationswerkzeugsetDremelhttps://www.amazon.com/dp/B0
1M1SJNVU/?coliid=IMLRI62ZL
JTSJ& colid=2XZ304Y9M7PV7
& psc=1& ref_=lv_ov_lig_dp_it
Bohrer für Kunststoff (Acryl, Plexiglas, ABS, Lexan, Polycarbonat, PVC)FTMhttps://www.amazon.com/dp/B
07D1B3B51/?coliid=I26RS6UP
UJ3P1Y& colid=2XZ304Y9M7P
V7& psc=1& ref_=lv_ov_lig_dp_it
Glasbecher X 2Avantor470335-854
GlasbehälterWheaton-FärbungsschalenWHEATON®   900303
Graph Paper Notebook: 1 mm dünn und 10 mm dickere hellgraue Rasterlinien (metrisch, 120 Seiten):https://www.amazon.com/
Graph-Paper-Notebook-
doppelseitig-nicht-perforiert
/dp/154319026X/ref=sr_1_13?
dchild=1& Schlüsselwörter=millimeter
+paper& qid=1617634163& sr=8-13
HACKER INSTRUMENTS MICROTOME MESSERKLINGEHACKER-INSTRUMENTE
Schwerer KunststoffstreifenAvantor89072-136
India InkSpeedball SUPER SCHWARZ
IRWIN QUICK-Grip Klemmen, Einhand, Mini-Stange, 6-Zoll, 4-Pack (1964758)IRWINhttps://www.amazon.com/IRWIN
-QUICK-GRIP-1964758-One-
Handed-Clamp/dp/B001DSY4
QO/ref=sr_1_5?crid=3NJ320
86LJCS6& dchild=1& Schlüsselwörter
=Klemmen+für+Holzbearbeitung& qid
=1617634545& sprefix=clamp%
2Caps%2C184& sr=8-5
Kreg KHC-Premium Gesichtsklemme Kreghttps://www.amazon.com/KREG
-KHC-PREMIUM-Kreg-Face-
Clamp/dp/B001DC9UR8/ref=sxin
_11?ascsubtag=amzn1.osa.27
eddff2-544b-4c29-9242-220b3f
760cb0. ATVPDKIKX0DER.en_
US& creativeASIN=B001DC9UR
8& crid=3NJ32086LJCS6& cv_ct_
cx=Clamps+for+woodworking& cv
_ct_id=amzn1.osa.27eddff2-544b
-4c29-9242-220b3f760cb0. ATVP
DKIKX0DER.en_US& cv_ct_pg=
search& cv_ct_we=asin& cv_ct_wn
=osp-single-source-earns-comm&
dchild=1& Keywords=Clamps+for+
Holzbearbeitung& linkCode=oas& pd_r
d_i=B001DC9UR8& pd_rd_r=eeaf7
178-eee3-4399-862a-479fffb6cfc3&
pd_rd_w=W3Inj& pd_rd_wg=PKPUl&
pf_rd_p=e666d5aa-04ca-46aa-86b0-
07ac28e037d4& pf_rd_r=22RKP4S4S
SS5PYDM2ZFD& qid=1617634545& s
Präfix=clamp%2Caps%2C184& SR=1-
2-64F3A41A-73CA-403A-923C-8152C4
5485FE& Tag=ThisOld House05-20
LaborbandAvantor76276-016
Loctite 1363589 4-Gramm-Flasche Sekundenkleber Ultra Gel Control Kleber, 3er-PackLoctitehttps://www.amazon.com/Loctite-
1363589-4-Gram-Control-Adhesive/
dp/B01HPT0AWQ/ref=sr_1_13?
Keywords=Superglue+power+glue
+for+plastic& qid=1642782991& s
Präfix=Superglue%2Caps%2C83& sr=8-13
Microtome Hochprofil-EinwegklingenOptimal Wissenschaftlichhttps://www.amazon.com/Optimal
-Scientific-Microtome-High-Profile
-Wegwerf/dp/B08MCSN6SL/ref
=sr_1_1?dchild=1& Keywords=hig
h+profile+cryostat+blade& qid=16
17592221& sr=8-1
MineralölSigma-AldrichM8410-100ml
PBSAvantor97062-818
Polieren-Schleiftipp20 Stück Karbid-Mahlerstücke 1/8" Schaft
Pre-Starter Pellet Non-Med - #50 (Pipestone)PipestoneSKU  8228https://pipevet.com/pre-starter-pellet-non-med-50-hubbard
Red Devil 1170 PLEXIGLAS Schneiden TOOLCARDEDRoter Teufelhttps://www.amazon.com/dp
/B000BZZ1D0/?coliid=I3C0K3
AKD3TS75& colid=XJ78FAXD8
5BF& psc=1& ref_=lv_ov_lig_dp_it
Permanentmarker mit Markern | MeißelspitzenmarkerSharpiehttps://www.amazon.com/
Sharpie-Permanentmarker
-Chisel-Classic/dp/B00006IFI
A/ref=sr_1_8?crid=2GD78WJ5COF
NN& Schlüsselwörter=permanent+Marker
S+Assorted+Colors& qid=16427831
06& sprefix=permanent+markers%
2Caps%2C129& sr=8-8
Umrühren der heißen PlatteCorning100493-718
berührender MagentVWR58948-138
STYLEZONE 10 Stück: Transparente klare Acrylplatten 8 x 10 Zoll 0,08 Zoll 2 mm dicke AcrylplatteStylezonehttps://www.amazon.com/dp/
B08GJYS4TT/?coliid=I11RLE
V42BKEFB& colid=XJ78FAX
D85BF& psc=1& ref_=lv_ov_lig_dp_it
OperationstablettAvantor10193-194
Nasses EisLaborgefertigt
Holz-Carvign-SpitzeHolzschnitzwerkzeuge für Drehwerkzeugehttps://www.amazon.com/
stores/page/28E50A85-D8C
1-4669-8272-D5D435EA126F

Referenzen

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
  1. Jelsing, J., et al. The postnatal development of neocortical neurons and glial cells in the Gottingen minipig and the domestic pig brain. J Exp Biol. 209 (Pt 8), 1454-1462 (2006).
  2. Conrad, M. S., Dilger, R. N., Johnson, R. W. Brain growth of the domestic pig (Sus scrofa) from 2 to 24 weeks of age: a longitudinal MRI study. Dev Neurosci. 34 (4), 291-298 (2012).
  3. Conrad, M. S., Dilger, R. N., Nickolls, A., Johnson, R. W. Magnetic resonance imaging of the neonatal piglet brain. Pediatr Res. 71 (2), 179-184 (2012).
  4. Dobbing, J. The later growth of the brain and its vulnerability. Pediatrics. 53 (1), 2-6 (1974).
  5. Sorby-Adams, A. J., Vink, R., Turner, R. J. Large animal models of stroke and traumatic brain injury as translational tools. Am J Physiol Regul Integr Comp Physiol. 315 (2), R165-R190 (2018).
  6. Sauleau, P., Lapouble, E., Val-Laillet, D., Malbert, C. H. The pig model in brain imaging and neurosurgery. Animal. 3 (8), 1138-1151 (2009).
  7. Huang, C., et al. Speckle contrast diffuse correlation tomography of cerebral blood flow in perinatal disease model of neonatal piglets. J Biophotonics. 14 (4), 2021(2021).
  8. Dobbing, J., Sands, J. Quantitative growth and development of human brain. Arch Dis Child. 48 (10), 757-767 (1973).
  9. Lossi, L., D'Angelo, L., De Girolamo, P., Merighi, A. Anatomical features for an adequate choice of experimental animal model in biomedicine: II. small laboratory rodents, rabbit, and pig. Ann Anat. 204, 11-28 (2016).
  10. Lind, N. M., et al. The use of pigs in neuroscience: modeling brain disorders. Neurosci Biobehav Rev. 31 (5), 728-751 (2007).
  11. Andersen, A. D., et al. Delayed growth, motor function and learning in preterm pigs during early postnatal life. Am J Physiol Regul Integr Comp Physiol. 310 (6), R481-R492 (2016).
  12. Desantis, S., Minervini, S., Zallocco, L., Cozzi, B., Pirone, A. Age-related changes in the primary motor cortex of newborn to adult domestic pig Sus scrofa domesticus. Animals (Basel). 11 (7), 2019(2021).
  13. Pond, W. G., et al. Perinatal ontogeny of brain growth in the domestic pig. Proc Soc Exp Biol Med. 223 (1), 102-108 (2000).
  14. Huang, C. C., Chen, Y. Y., Fang, Y. T., Chen, Y. C., Hung, C. M. Generating brain matrices for zebra finch brain sectioning using three-dimensional printing technology. J Neurosci Methods. 327, 108399(2019).
  15. Yamazaki, Y., Yuguchi, M., Honjo, B., Isokawa, K. Design and fabrication of customized brain slice matrices using CAD and 3D printing technology. PLoS One. 20 (1), e0317616(2025).
  16. Lattin, C. R., et al. A 3D-printed modular device for imaging the brain of small birds. J Neurosci Methods. 293, 183-190 (2018).
  17. Fleming, S. A., Monaikul, S., Mudd, A. T., Jacob, R., Dilger, R. N. Extraction and dissection of the domesticated pig brain. J Vis Exp. (170), e62030(2021).

Zugriff eingeschränkt. Bitte melden Sie sich an oder starten Sie eine Testversion, um diesen Inhalt anzuzeigen.

Nachdrucke und Genehmigungen

Genehmigung beantragen, um den Text oder die Abbildungen dieses JoVE-Artikels zu verwenden

Genehmigung beantragen

Schlagwörter

Herstellung einer HirnmatrixFerkelgehirnschnitteanpassbare HirnmatrixAcrylplattenmatrixAgarose Gehirnformkoronale Gehirnschnittf hrungsagittale Gehirnschnittf hrungNeurowissenschaften bei Gro tierenEntwicklungsmodell des Gehirns

Verwandte Artikel