Ein Abonnement von JoVE ist erforderlich, um diesen Inhalt anzuzeigen. Melden Sie sich an oder beginnen Sie noch heute mit einer kostenlosen Testphase.
Forschungsartikel
Wir präsentieren einen einzentrigen, pathologievalidierten Arbeitsablauf für Brustkrebspatientinnen (BC), die einen zweiten primären Lungenkrebs (pLC) entwickeln. Eine größere Primärtumorgröße und ein höheres Ki-67-Risiko definieren das Risiko, während Kohorten-Niveau OS und iDFS vergleichbar bleiben. Die Ergebnisse unterstützen risikostratifizierte Thoraxbildgebung und frühe pathologische Korrelation bei der Nachbeobachtung.
Wir führten eine retrospektive Studie mit nur einem Zentrum bei Brustkrebspatientinnen (BC) durch, die einen zweiten primären Lungenkrebs (pLC) (BC-pLC; n = 54) entwickelten, im Vergleich zu nur BC (n = 216), die von 2012 bis 2017 einer kurativen Absichtsoperation unterzogen wurden, mit Nachsorgeuntersuchung bis zum 30. Juni 2023. Klinisch-pathologische Variablen wurden verglichen; multivariable logistische Regressien geschätzte Korrelate von BC-pLC; Das Überleben wurde mit Kaplan-Meier-Schätzungen und Cox-Proportional-Hazard-Modellen bewertet. Im Vergleich zu BC hatte die BC-pLC-Kohorte höhere Häufigkeiten von Östrogenrezeptor-negativen (ER-negativen) und Progesteronrezeptor-negativen (PR-negativen) Tumoren sowie mehr Ki-67-positiven Tumoren; nach Multiplizitätsanpassung (Bonferroni) blieben die ER-Negativität und die Ki-67-Positivität signifikant, während der humane epidermale Wachstumsfaktor-Rezeptor 2 (HER2) dies nicht tat. In multivariablen Analysen waren größere Tumorgröße (>2 cm) und Ki-67-Positivität unabhängig mit BC-pLC assoziiert (Odds Ratio [OR] 3,02, 95% KI 1,29-7,38; OR 3,10, 95%-KI 1,32–7,49). Auf Kohortenebene waren Unterschiede im Gesamtüberleben (OS) und im invasiven krankheitsfreien Überleben (iDFS) zwischen BC-pLC und BC nach der Anpassung statistisch nicht signifikant. Biomarker-stratifizierte Analysen zeigten eine schlechtere OS-Therapie bei ER-negativen Tumoren und nominell bessere iDFS für Ki-67-negative Tumore. Tumorlast und proliferative Aktivität können risikostratifizierte Thoraxbildgebende Überwachung und frühe pathologische Korrelation leiten, um Metastasen von neuen Primärarten während der BC-Nachbeobachtung zu unterscheiden.
Brustkrebs (BC) gehört zu den häufigsten Malignitäten weltweit, und Fortschritte im Screening und in der Therapie haben das Überleben verlängert, was die Wahrscheinlichkeit mehrerer primärer Krebserkrankungen erhöht; bemerkenswert ist, dass das Risiko für einen zweiten primären Lungenkrebs (pLC) bei BC-Überlebenden höher ist als in der Allgemeinbevölkerung1. Lungenkrebs (LC) bleibt eine der Hauptursachen für Krebssterblichkeit, mit einer anhaltend niedrigen 5-Jahres-Überlebensrate trotz therapeutischerFortschritte 2,3. Geschlechtsspezifische Muster werden zunehmend erkannt: Der Anteil von LC bei Frauen ist gestiegen, und Tumore bei Frauen weisen häufiger verwirklichbare Treiberveränderungen wie EGFR-Mutationen 4,5 auf. Das hormonelle Milieu (z. B. Östrogensignale) und das Alter – beide etablierte krebserregende Faktoren – könnten zum erhöhten LC-Risiko bei BC-Überlebenden beitragen, ebenso wie gemeinsame Expositionen (Tabak, Strahlung, Familiengeschichte), behandlungsbezogene Effekte, erbliche Anfälligkeit und sich überlappende onkogene Signalwege (EGFR, KRAS, TP53, BRCA1)6.
Die Verhütung mit zweiter primärer LC (BC-pLC) kann sich synchron (während der diagnostischen Diagnostik der Verhütung nachweisen) oder metachronisch (auftretend Monate bis Jahre nach der Prämie) auftreten. In der Praxis sind Diagnose und Behandlung eine Herausforderung. Ein erheblicher Anteil der Fälle wird bei einer routinemäßigen Thorax-CT nach der Verhütungsbehandlung erstmals als Lungenknoten festgestellt, doch überschneiden sich radiologische Erscheinungen von pLC- und pulmonalen Metastasen durch die Verhütung häufig, was zu einer anfänglichen Fehlklassifikation und Verzögerungen bei der endgültigen Gewebediagnoseführt. Ungefähr ein Drittel der BC-pLC-Fälle sind synchron (Diagnoseintervall <6 Monate)10. Die Behandlungssequenzierung (Brust-zuerst vs. Lungen-zuerst) kann perioperative Risiken und Adjuvansoptionen beeinflussen, aber standardisierte Leitlinien bleiben begrenzt, und die berichtete 5-Jahres-Überlebensrate variiert je nach Serie, was teilweise Unterschiede in Selektion und Behandlung widerspiegelt.
Multizentrische Register bieten Breite und statistische Stärke, aber retrospektive Einzelzentrenanalysen bieten eine einzigartige Tiefe: harmonisierte bildgebende Pfade, einheitliche pathologische Arbeitsabläufe und die Beurteilung durch ein dediziertes multidisziplinäres Team ermöglichen eine feinkorrelierte klinisch-pathologische Validierung mit intern konsistenter langfristiger Nachbeobachtung11. Diese Merkmale sind besonders wertvoll, um intrathorakale Metastasen von einer zweiten primären Metastase zu unterscheiden, bei der kleine Klassifikationsfehler Ergebnisse und Behandlungsentscheidungen verzerren können. Wir erkennen jedoch an, dass das Einzelzentrum-Design die Generalisierbarkeit im Vergleich zu Register-Scale-Kohorten12 einschränkt.
Praktische Anwendbarkeit. Durch die Quantifizierung klinisch-pathologischer Korrelate von BC-pLC (z. B. primäre BC-Tumorgröße und Ki-67-proliferativer Index) und die Berichterstattung über das Überleben mit klaren Nennern und Effektgrößen zielt diese Studie darauf ab, risikostratifizierte CT-Überwachung des Brustkorbs, eine frühere multidisziplinäre Überprüfung unbestimmter Knoten und Gewebegewinnungsstrategien zu unterstützen, die darauf zugeschnitten sind, Metastasen von neuen primären Tumorenzu unterscheiden 13,14. In Umgebungen, in denen bildgebende Ergebnisse unklar sind, können leicht verfügbare klinisch-pathologische Hinweise Patienten priorisieren, um eine beschleunigte pathologische Korrelation zu gewährleisten.
Vor diesem Hintergrund wollten wir das klinisch-pathologische Profil von BC-pLC abgrenzen, Faktoren identifizieren, die mit seinem Auftreten verbunden sind, und prognostische Implikationen mit Kaplan-Meier- und Cox-Modellen für das Gesamtüberleben (OS) und das invasive krankheitsfreie Überleben (iDFS) bewerten. Um den Beitrag eines Ein-Zentrum-Designs transparent zu positionieren, ergänzen wir Primäranalysen mit intervallstratifizierten und behandlungsangepassten Modellen und nennen methodische Vorteile und Einschränkungen klar.
Zugriff eingeschränkt. Bitte melden Sie sich an oder starten Sie eine Testversion, um diesen Inhalt anzuzeigen.
Diese retrospektive Studie wurde vom institutionellen Ethikkomitee 2024YX070 genehmigt und gemäß der Erklärung von Helsinki durchgeführt. Angesichts der nicht-interventionellen, de-identifizierten Natur des Datensatzes und des minimalen Risikos wurde die informierte Einwilligung gemäß institutioneller Richtlinie aufgehoben. Die Daten wurden auf sicheren, zugriffskontrollierten Servern gespeichert, und die Analysen nutzten einen anonymisierten, gesperrten Datensatz mit einem auditierbaren Pfad und einem vorgegebenen Dateneinfrierdatum.
Studiendesign und Setting
Wir führten eine retrospektive Kohortenstudie mit nur einem Zentrum durch, bei der Patienten mit Brustkrebs (BC), die einen zweiten primären Lungenkrebs (pLC) (BC-pLC) entwickelten, sowie zeitgleich ausschließlich Patientinnen mit BC einschlossen. Alle Patienten unterzogen sich zwischen Januar 2012 und Januar 2017 einer kurativen Absichtsoperation, mit Nachsorge bis zum 30. Juni 2023. Die BC-pLC-Kohorte benötigte eine pathologische Bestätigung sowohl des primären als auch des primären Lungenkrebses; die BC-Kohorte umfasste nur Patienten mit primärer Verhütung. Propensity Score Matching wurde nicht durchgeführt und wird als Einschränkung anerkannt; Um Selektionsverzerrungen zu mindern, wurden Kovariaten für die multivariable Anpassung vordefiniert und transparent berichtet. Synchrones BC-pLC wurde als diagnostisches Intervall von ≤6 Monaten zwischen primären und metachronen BC-pLC mit >6 Monaten definiert. Ein Flussdiagramm, das Screening, Ausschlüsse, Einbeziehungen und Analysen zusammenfasst, ist in Abbildung 1 dargestellt.
Zulassungskriterien und Fallentscheidung
Die berechtigten Teilnehmer waren ≥18 Jahre alt, mit pathologisch bestätigter frühstufiger primärer Verhütung, verfügbaren zentralen klinisch-pathologischen Variablen, Bildgebenden für die Überprüfung sowie Blöcke/Objektträger für die zentrale pathologische Überprüfung, wenn angezeigt. Patienten wurden ausgeschlossen, wenn sie an einer anderen Stelle eine gleichzeitige Malignität hatten, radiologische oder pathologische Hinweise auf pulmonale Metastasen durch die Verhütung, metastasierte oder wiederkehrende Verhütung bei der Indexdiagnose oder unvollständige Nachsorgedaten vorlagen. Die Klassifikation der Lungenläsionen als primärer Lungenkrebs statt metastasierter Verhütung basierte auf Histomorphologie und, sofern verfügbar, auf einem immunophenotypischen Profil, das mit dem Lungenursprung übereinstimmt (z. B. TTF-1/Napsin A für Adenokarzinom und p40 für die Plattenepithel-Differenzierung). Dissonante oder unbestimmte Fälle wurden durch multidisziplinären Konsens gelöst (Brustchirurgie, Thoraxchirurgie, Radiologie, Pathologie).
Bildgebungsprotokoll und Überwachung
Während der BC-Behandlung folgte die Brustbildgebung institutionellen Wegen, die eine Baseline-Staging-CT bei der Diagnose und Überwachungs-CT umfassten, typischerweise alle 6-12 Monate in den ersten 2-3 Jahren und danach jährlich oder früher, wenn Symptome oder abnormale Befunde eine Bildgebung auslösten. Die Erfassungsparameter wurden gemäß radiologischen Protokollen standardisiert. Da die Überwachungsintensität die Detektion und Stufenverteilung beeinflussen kann, wurde der potenzielle Erkennungs-/Vorlaufzeit-Bias in Sensitivitätsanalysen unter Berücksichtigung der Bildintensität und des Kalenderzeitraums berücksichtigt.
Pathologie-Arbeitsablauf und Immunhistochemie
Tumorproben wurden in neutralem gepuffertem Formalin fixiert, 4 %, typischerweise 6–24 Min/mm Gewebedicke (konventionell insgesamt 6–24 Stunden bei Routineproben), dehydriert und vor der Schnittung mit Paraffin eingebettet. Abschnitte von 3–4 μm wurden zugeschnitten und auf geladenen Schlitten montiert. Die hitzinduzierte Epitopenrückgewinnung wurde entweder mit einem Citratpuffer (pH 6,0) oder einem EDTA-Puffer (pH 9,0) bei 95–100 °C für etwa 20 Minuten durchgeführt, gefolgt von 10 Minuten Abkühlung bei Raumtemperatur. Primäre Antikörper für ER, PR, HER2 und Ki-67 wurden nach validierten Laborprotokollen mit einer typischen Inkubation von 30–60 Minuten bei Raumtemperatur, polymerbasierter Sekundärdetektion und DAB-Entwicklung für 5–10 Minuten angewendet; Die Objektträger wurden 30–60 Sekunden lang mit Hämatoxylin gekontert, dehydriert, freigegeben und montiert. ER- und PR-Positivität wurden definiert als ≥1 % Tumorzell-Kernfärbung. HER2 folgte den ASCO/CAP 2018-Kriterien (3+ durch IHC oder Verstärkung durch In-situ-Hybridisierung bei 2+ und zweideutig). Ki-67 wurde mit einer vorgegebenen Grenze von 14 % dichotomisiert. Zwei Facharzt-zertifizierte Pathologen überprüften alle Objektträger unabhängig voneinander, und Unstimmigkeiten wurden durch Konsens behoben, um die Bewertung zu standardisieren.
Lagerbedingungen für Bioproben
Formalinfixierte, mit Paraffin eingebettete (FFPE) Blöcke wurden bei kontrollierter Raumtemperatur (18–25 °C), trocken und dunkel, mit einer Umgebungsluftfeuchtigkeit unter 60 % gelagert. Die Blöcke wurden gemäß institutioneller Richtlinie für ≥10 Jahre beibehalten, und Neuzuschnitte vom ursprünglichen Block wurden durchgeführt, wann immer das Alter der Sektionen die vordefinierten Stabilitätsfenster überschritt. Unbefleckte Abschnitte (3–4 μm) wurden in versiegelten Schachtelboxen mit Trockenmittel gelagert, die vor Licht geschützt waren. Für die Immunhistochemie (ER, PR, Ki-67) wurden ungefärbte Objektträger bei 2–8 °C gekühlt und innerhalb von 8 Wochen nach der Schnittung gefärbt; Folien, die älter als diese Schwelle waren, wurden verworfen und neu zugeschnitten. Für die In-situ-Hybridisierung /FISH-Bestätigung ambivalenter HER2-Ergebnisse wurden ungefärbte Objektträger innerhalb von 2–4 Wochen nach Schnitt bei 2–8 °C Lagerung verwendet oder bei älteren Schnitten neu zugeschnitten. Lagertemperatur und Schnittdaten wurden im Laborinformationssystem protokolliert, und Abweichungen führten zum Nachschneiden vor der Färbung.
Datenerhebung und -verwaltung
Demografische und klinisch-pathologische Variablen wurden aus der elektronischen Patientenakte gemäß einem vordefinierten Datenwörterbuch abstrahiert. Variablen umfassten Alter bei der Diagnose, Wechseljahresstatus, Bluthochdruck, Familiengeschichte, Größe des primären Tumors, histologischen Subtyp und -grad, Knotenstatus und Anzahl untersuchter Knoten, lymphovaskuläre Invasion sowie Biomarkerstatus für ER, PR, HER2 und Ki-67. Histologische Untertypen und TNM-Stagingen wurden in Tabelle 1 und Tabelle 2 beschreibend zusammengefasst, mit klarstellenden Fußnoten für Abkürzungen und Untergruppendefinitionen. Datenqualitätsverfahren umfassten Bereichs- und Logikprüfungen sowie die Quellverifikation durch einen zweiten Prüfer. Die Analysen wurden aus einem gesperrten Datensatz mit dokumentiertem Codebuch und Manifest reproduziert.
Ergebnisse und Nachverfolgung
Das Gesamtüberleben (OS) wurde vom Datum der Krebsdiagnose bis zum Tod durch jede Ursache oder der jüngsten Nachbeobachtung gemessen. Das invasive krankheitsfreie Überleben (iDFS) wurde vom Ende der kurativen Behandlung bis zum Auftreten eines invasiven Rückfalls, der Entwicklung einer neuen primären Malignität oder Tod durch nicht verwandte Ursachen berechnet. Patienten, die ohne Ereignisse leben, wurden beim letzten Kontakt zensiert. Die Nachuntersuchung erfolgte telefonisch, Klinikbesuche und elektronische Patientenakte bis zum 30. Juni 2023. Die ursachenspezifische Sterblichkeit wurde nicht entschieden; Wettbewerbsrisikoanalysen wurden daher nicht durchgeführt, und diese Einschränkung wird in der Diskussion erwähnt.
Statistische Analyse
Kontinuierliche Variablen wurden mit dem Shapiro-Wilk-Test auf Normalität bewertet und je nach Bedarf als Median (IQR) oder Mittelwert (SD) zusammengefasst, und kategorische Variablen als n (%). Gruppenvergleiche verwendeten den t-Test oder den Wilcoxon-Rangsummentest und den Chi-Quadrat-Test oder den Fisher-exakten Test, wo angebracht. Für Korrelate von BC-pLC wurde der univariablen logistischen Regression eine multivariable logistische Regression unter Verwendung von a priori-Variablen (Tumorgrößenkategorie, ER, PR, Ki-67) gefolgt, mit Ereignissen pro Variable, Varianzinflationsfaktoren für Kollinearität und Standard-Goodness-of-Fit-Diagnostik. Das Überleben wurde mit Kaplan-Meier-Schätzungen und Log-Rank-Tests sowie mit Cox-Proportional-Hazard-Modellen bewertet, die Alter, Tumorgröße, Knotenstatus, ER, PR, HER2, Ki-67 und Kohorte (BC-pLC vs. BC) vorgaben. Proportional-Hazard-Annahmen wurden mit Schoenfeld-Residuen bewertet. Fehlende Daten wurden mit einer vollständigen Fallanalyse behandelt, und das Ausmaß der Fehlfunktion spiegelt sich in den Nennern wider. Angesichts mehrerer Biomarker-Vergleiche über ER, PR, HER2 und Ki-67 verwendete die familienweise Fehlerkontrolle eine Bonferroni-Anpassung mit einem angepassten ɑ von 0,0125, und es werden ebenfalls nominale zweiseitige P-Werte gemeldet. Alle P-Werte im Text und in den Tabellen werden mit Effektgrößen und 95%-Konfidenzintervallen gepaart.
Sensitivitäts- und Robustheitsanalysen
Die Robustheit wurde durch intervallstratifizierte Überlebensanalysen untersucht, die synchrone Fälle mit metachronen Fällen in den Bereichen ≤12 Monate, 13–36 Monate und >36 Monate kontrastierten, wobei adjustierte Hazard-Ratios zusammen mit 95%-Konfidenzintervallen und nominalen P-Werten berichtet wurden. Ein 12-Monats-Meilenstein wurde angewandt, um Garantiezeit-Bias zu mindern, bei dem postoperative oder adjuvante Therapien die Zeit-zu-Ereignis-Schätzungen sonst verzerren könnten. Zusätzliche Modelle wurden für Behandlungsklassen angepasst, wo verfügbar, darunter Lungenchirurgie-Typ, Strahlentherapie-Exposition und systemische Therapiekategorien (Chemotherapie, gezielte Therapie, Immuntherapie). Sensitivitätsanalysen berücksichtigten zudem die Intensität der Bildüberwachung und den Kalenderzeitraum, um potenzielle Erkennungs- und säkular-Trend-Verzerrungen zu adressieren.
Reproduzierbarkeitskontrollpunkte
Wichtige Checkpoints, die die Reproduzierbarkeit beeinflussen, umfassten explizite Beurteilungskriterien, die primären Lungenkrebs von metastatischer Verhütung unterscheiden, vordefinierte Schwellenwerte für ER, PR, HER2 und Ki-67, duale unabhängige Pathologiewerte mit Konsensauflösung, transparente Berichterstattung der bildgebenden Überwachungsintensität und a priori Kovariatenspezifikation mit Multiplizitätskontrolle. Alle Abweichungen vom Protokoll wurden dokumentiert, einschließlich der Begründung und einer Bewertung ihrer möglichen Auswirkungen auf die Ergebnisse.
Zugriff eingeschränkt. Bitte melden Sie sich an oder starten Sie eine Testversion, um diesen Inhalt anzuzeigen.
Basismerkmale
Der Patientenauswahlpfad ist in Abbildung 1 dargestellt. Die klinisch-pathologischen Merkmale der Ausgangslinie sind in Tabelle 1 zusammengefasst. Das mittlere Alter betrug 51 Jahre (IQR 45-59) in der BC-Kohorte und 52 Jahre (IQR 46-60) in der BC-pLC-Kohorte. Im Vergleich zu BC hatte die BC-pLC-Kohorte größere primäre Brusttumoren und einen höheren Anteil an T2-T4-Erkrankungen; Knotenmetasta...
Zugriff eingeschränkt. Bitte melden Sie sich an oder starten Sie eine Testversion, um diesen Inhalt anzuzeigen.
Die zunehmende Erkenntnis mehrerer primärer Krebsarten spiegelt Fortschritte in Bildgebung, Therapeutik und Längsüberwachung wider, verbunden mit längerer Überlebensdauer und dem Zusammenspiel genetischer und Umweltfaktoren15,16. Mit routinemäßig gesammelten klinisch-pathologischen Daten charakterisierte diese Studie Brustkrebs mit einem zweiten primären Lungenkrebs (BC-pLC) und untersuchte Korrelate von Auftreten und Prognose, m...
Zugriff eingeschränkt. Bitte melden Sie sich an oder starten Sie eine Testversion, um diesen Inhalt anzuzeigen.
Die Autoren erklären, dass sie keine konkurrierenden finanziellen Interessen haben.
Es wurde keine konkrete Finanzierung von öffentlichen, kommerziellen oder gemeinnützigen Organisationen erhalten. Die Autoren danken den Abteilungen für Pathologie und Herz-Thorax-Chirurgie für die Unterstützung bei der Fallbeurteilung und der Durchsicht der Objektträger.
Zugriff eingeschränkt. Bitte melden Sie sich an oder starten Sie eine Testversion, um diesen Inhalt anzuzeigen.
| Name | Unternehmen | Katalognummer | Kommentare |
|---|---|---|---|
| Deckzettel | Fisher Scientific | 12?545?10 | Wird verwendet, um gefärbte Gewebeschnitte für die Mikroskopie zu bedecken. |
| DAB-Chromogen | Thermo Fisher Scientific | K346711 | Verwendet zur Farbentwicklung in der Immunhistochemie |
| Östrogenrezeptor (ER) Antikörper | Thermo Fisher Scientific | MA1?10066 | Monoklonaler Antikörper zur ER-Proteindetektion RRID: AB_2252608 |
| Fluoreszenz-In? Situ-Hybridisierungs-(FISH)-Kit | Abbott | 32?10030 | Für bestätigende HER2-Amplifikationsstudien |
| Formalin (4 % neutral gepuffert) | Neomarker, USA | – | Für Gewebefixierung in histopathologischen Studien |
| HER2-Antikörper | Dako / Agilent | A0485 | Monoklonaler Antikörper zur HER2-Proteindetektion RRID: AB_2252608 |
| Immunhistochemie-Färbeset | Neomarker, USA | – | Für die Durchführung von IHC-Assays an Tumorproben |
| Ki67-Antikörper | Dako / Agilent | M7240 | Monoklonaler Antikörper für Ki67-Proteindetektion RRID: AB_2341197 |
| Mikrotome | Leica | RM2255 | Für das Schneiden von Paraffin-eingebetteten Gewebeproben |
| Montagemedien | Sigma? Aldrich | M2681 | Verwendet zum Anbringen von Gewebeschnitten auf Objektträgern |
| Paraffin | Sigma-Aldrich | P?6001 | Verwendet für Gewebeeinbettung in der Histologie |
| Progesteronrezeptor (PR) Antikörper | Thermo Fisher Scientific | MA1?10176 | Monoklonaler Antikörper zur PR-Proteindetektion |
| SPSS v23.0 |
Zugriff eingeschränkt. Bitte melden Sie sich an oder starten Sie eine Testversion, um diesen Inhalt anzuzeigen.