Eine Technik für Serial Sammlung von Liquor aus der Cisterna Magna in Maus

Zusammenfassung

Transgene (Tg) Mausmodellen der Alzheimer bieten eine ausgezeichnete Gelegenheit, um zu untersuchen, wie und warum Aß oder tau-Spiegeln im Liquor ändern, wenn die Krankheit fortschreitet bei menschlichen Patienten. Hier zeigen wir eine raffinierte Cisterna magna Punktionstechnik für serielle CSF Probenahme aus die Maus.

Zusammenfassung

Alzheimer-Krankheit (AD) ist eine fortschreitende neurodegenerative Erkrankung, die pathologisch durch extrazelluläre Ablagerung von β-Amyloid-Peptid (Aß) und intraneuronale Ansammlung von hyperphosphorylierte Tau-Protein ist aus. Da Liquor (CSF) ist in direktem Kontakt mit dem extrazellulären Raum des Gehirns, bietet es eine Reflexion der biochemischen Veränderungen im Gehirn als Reaktion auf pathologische Prozesse. CSF von AD-Patienten zeigt eine Abnahme in den 42 Aminosäure-Form von Aß (Aß42), und erhöht in Gesamt-tau und hyperphosphorylierte tau, obwohl die Mechanismen, die für diese Veränderungen noch nicht vollständig verstanden. Transgene (Tg) Mausmodellen der Alzheimer bieten eine ausgezeichnete Gelegenheit, um zu untersuchen, wie und warum Aß oder tau-Spiegeln im Liquor ändern, wenn die Krankheit fortschreitet. Hier zeigen wir eine raffinierte Cisterna magna Punktionstechnik für CSF Probenahme aus die Maus. Diese äußerst schonende Sampling-Technik ermöglicht serielle CSF Proben aus der gleichen Maus Abstand von 2-3 Monaten die stark minimiert die verwirrende Wirkung der zwischen-Maus-Variabilität in Aß oder tau-Spiegeln, die es ermöglicht, subtile Veränderungen im Laufe der Zeit zu erkennen eingeholt werden. In Kombination mit Aß und Tau-ELISA, wird diese Technik nützlich sein Studium konzipiert, um die Beziehung zwischen den Ebenen der CSF Aß42 und Tau, und deren Stoffwechsel im Gehirn in AD Mausmodellen untersuchen. Studies in Tg Mäusen konnten wichtige Bestätigung, um das Potenzial der CSF Aß oder tau-Spiegeln als biologische Marker für die Überwachung der Krankheitsprogression verwendet werden kann, und um die Wirkung von therapeutischen Interventionen zu überwachen. Da die Mäuse geopfert und das Gehirn kann für biochemische oder histologische Veränderungen untersucht werden, können die zugrunde liegenden Mechanismen der CSF Veränderungen besser beurteilt werden kann. Diese Daten sind wahrscheinlich informative zur Interpretation der menschlichen AD CSF Veränderungen.

Protokoll

Pulling der Glaskapillare

1. Die Glaskapillare ist von der Sutter Instrument Inc (Borosilikatglas, B100-75 bis 10) gekauft.
2. Ziehen Sie die Kapillaren auf einer Sutter P-87 Flaming Mikropipette Abzieher, mit der Hitze Index 300 gesetzt und der Druck Index bei 330 gesetzt.
3. Schneiden Sie die Spitze des Glaskapillare mit einer Schere, so dass die verjüngte Spitze einen Innendurchmesser von etwa 0,5 mm hat.

Cisterna magna Punktionstechnik für CSF

CSF-Proben werden aus der Cisterna magna (Abb. 1) mit einer Methode, die zuvor ¹ wurde veröffentlicht wurde.

Diskussion

Wir beschrieben eine sehr zuverlässige Protokoll für serielle Probenahme von CSF aus Mäusen ohne nachweisbare Plasma Kontamination.

1. Die ganze Prozedur dauert in der Regel 10 min pro Maus (einschließlich Narkose). Das Volumen der CSF erhalten ist abhängig von der Maus-Stämme. In der PS / APP doppelte Tg Mäusen wir Gebraucht2, ist das durchschnittliche Volumen ca. 5 ul (3 bis 7 ul), während die P301L (JNPL3) Mäuse 3 geben eine Ausbeute von etwa 10 ul-15 ul. Für die serielle Probenahme, kann ein Maximum von 7-8 ul sicher genommen we.......