Name: Embryonale Stammzellen gewonnenen Endothelzellen zur Behandlung von Ischämie Hinterlauf (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2009-01-23T00:00:00.000+00:00
Duration: 9 min 11 s
Description: Lernen Sie die Injektion embryonaler Stammzell-abgeleiteter Endothelzellen in die ischämische Hinterpfote zur Behandlung der peripheren arteriellen Verschlusskrankheit. Die Zellmigration wird nicht-invasiv durch Biolumineszenz-Bildgebung verfolgt.

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Die Autoren danken Andrea Axtell, Satoshi Itoh, MD, Jeff Velotta, MD, Grant Hoyt, Robert C. Robbins, MD, Jin Yu, MD, Tim Doyle, PhD, und die Stanford Small Animal Imaging Core für die technische Unterstützung. Die Autoren danken AM Bickford, Inc. für die Unterstützung der tierärztlichen Einrichtungen. Diese Arbeit wurde durch Forschungsstipendien der National Institutes of Health (R01 HL-75774, R01 CA098303, R21 HL085743, 1K12 HL087746), der California Tobacco Related Disease Research Program der University of California (15IT-0257 und 1514RT-0169) unterstützt und das California Institute for Regenerative Medicine (RS1-00183). NH wird durch ein Stipendium der American Heart Association unterstützt. kann Heart Association.

1. Differenzierung von murinen ES-Zellen in Endothelzellen <ol><li> Das Protokoll zur Differenzierung von ES-Zellen in Endothelzellen wird an anderer Stelle beschrieben ist nicht der Schwerpunkt dieses Protokoll 2,3. Kurz gesagt, werden die Zellen erlaubt, zu unterscheiden, und die Zellen, die positiv für die endotheliale Marker wie CD31 oder vascular endothelial cadherin (VE-Cadherin) werden dann mittels Fluoreszenz-activated cell sorting (FACS) gereinigt. </li></ol> 2. Der Bau des Double Fusion Reporter Gene und Lentivirale Transduktion <ol><li> Biolumineszenz kann verwendet werden, um Zellen, die geändert werden, um Reporter-Gene wie Glühwürmchen-Luciferase (fluc) exprimieren, sind zu verfolgen. Für diese Anwendung enthalten unsere Zellen sowohl Schwankungen und verbesserte grün fluoreszierendes Protein (eGFP) Fusionsgen unter der Kontrolle eines internen Ubiquitin-Promotor. Um die Zellen zu verändern, das Transgen lentiviralen Vektor, der Schlüssel optimiert genetische Elemente zu erfüllen bio-Sicherheitskriterien sowie erhöhte Transduktionseffizienz kann PFU-FG-Vektor in unserem Labor Durchführung der Schwan-eGFP Fusion Reportergens entwickelt, um stabil zu werden Transduktion der Zellen nach Differenzierung. Diese Fusionskonstrukt ermöglicht sowohl Biolumineszenz und Fluoreszenz-Tracking der transplantierten Zellen. Das Verfahren zur Erzeugung von Viruspartikeln, Transduktion und Produktion von markierten Zellen, die zum Ausdruck Reportergene anderswo 4 beschrieben. </li></ol> 3. Die Transplantation von ESC-derived Endothelzellen der ischämischen Hinterlauf <ol><li> Beginnen Sie den Vorgang, indem man eine Maus, die hinteren Gliedmaßen Ischämie für die Zell-Transplantation unterzogen wurde. Dazu platzieren Sie den Mauszeiger in die Narkose Kammer mit 1-3% Isofluran in 100% Sauerstoff bei einer Durchflussrate von 1l/min. </li><li> Lassen Sie die Maus in die Induktion Kammer, bis es reagiert auf äußere Reize ist. Dann entfernen Sie das Tier von der Induktion Kammer. </li><li> Dann setzen Sie das Tier in Rückenlage auf dem OP-Tisch und verbinden Sie es mit einem kontinuierlichen Strom von 1-3% Isofluran in 100% Sauerstoff bei einer Durchflussrate von 1l/min. </li><li> Wischen Sie die Haut der hinteren Gliedmaßen mit drei wechselnden betadine und Alkohol scheuert. </li><li> Sobald die Haut wird gereinigt, erhalten eine Million ESC-derived Endothelzellen in 30 ul Phosphat-gepufferter Kochsalzlösung (PBS). Legen Sie diese Zellen in einer 28-Gauge-Nadel. </li><li> Wenn die Zellen bereit sind, heben und erweitern das Hinterbein besser visualisieren die Position des M. gastrocnemius. Während die Bein ist gestreckt, die Nadel durch die Haut in das darunter liegende Muskulatur. Achten Sie darauf, nicht bis auf die Knochen Ansatz. Sanft und langsam injizieren die 30 ul Zelle Mischung in die gastrocnemius. Für die intramuskuläre Injektion von 30 ul in der Nähe der Grenze von Volumen, das injiziert werden können. Daher sind 28-gauge Insulinspritzen bevorzugt, weil nach unserer Erfahrung, sie den Verlust Volumen in Spritzen-Nadeln zu beseitigen. </li><li> Nach der Injektion abgeschlossen ist, kehren die Maus, um die Erholung Käfig und überwachen sie kontinuierlich bis wach. Lassen Sie das Tier für mehrere Stunden erholen und fahren Sie dann mit der in vivo Biolumineszenz-Bildgebung der transplantierten Zellen. </li></ol> 4. Biolumineszenz-Bildgebung des ESC-derived Endothelzellen in vivo <ol><li> Die transplantierten ESC-derived Endothelzellen Zellen wurden modifiziert, um sowohl die Schwankungen und die eGFP-Fusionsgen unter der Kontrolle eines internen Ubiquitin-Promotor auszudrücken. Daher kann Biolumineszenz verwendet werden, um die Zellen innerhalb der ischämischen Hinterlauf zu verfolgen. </li><li> Zu Beginn dieses Schrittes auf die Biolumineszenz-Bildgebung und Wohnen Bildaufnahme-Software ab. Dann initialisieren den Erwerb und die Maße des Gesichtsfeldes. </li><li> Als nächstes legen Sie schwarze matte Papier auf die Bildgebung Feld Hintergrund-Emissionen zu absorbieren. </li><li> Sobald die Bildgebung Kiste ist fertig, legen Sie die Maus in die Narkose Kammer mit 1-3% Isofluran in Sauerstoff am Ausgang des 1l/min. Lassen Sie die Maus in die Induktion Kammer, bis es reagiert auf äußere Reize ist. Dann entfernen Sie das Tier von der Induktion Kammer. </li><li> Entfernen Sie das Haar von beiden Hinterbeine mit einem elektrischen Rasierer wie nötig. </li><li> Inject 10 l D-Luciferin pro Gramm Körpergewicht in die Bauchhöhle. Die D-Luciferin ist im Voraus zu gefiltert Stammlösungen von 15 mg / mL in PBS hergestellt. </li><li> Sobald das Luciferin injiziert wird, legen Sie das Tier in der Imaging-Box über das schwarze Papier in der Rückenlage, verbunden mit einem kontinuierlichen Fluss von Isofluran. </li><li> Platzieren Tier in Imaging-Box und die Verbindung mit Isofluran. </li><li> Start, um Bilder für 10-60 Sekunden zu erwerben, um eine optimale Belichtungszeit für die das Bild nicht gesättigt ist zu bestimmen. Wenn das Bild gesättigt, reduzieren Sie die Belichtungszeit. Wenn die Biolumineszenz-Signal ist sehr schwach, erhöhen Sie die Belichtungszeit. </li><li> Using die optimale Belichtungszeit, weiterhin den Erwerb Bilder alle 1-3 Minuten, bis das Signal das Maximum erreicht und dann verschwindet. Wenn Akquisition abgeschlossen ist, speichern Sie die Datei. </li><li> Um die Daten analysieren, wählen Sie Regions of Interest (ROI), dass der Injektionsstelle zu decken. Als Negativ-Kontrolle, kann eine ähnliche ROI für die nicht-operierten Bein ausgewählt werden. Mit der Software, messen die gesamte Ausstrahlung, die in Einheiten von Photonen / Sekunde / cm 2 / Steradiant (p / s / cm 2 / sr) ausgedrückt wird, für die ROIs für jeden Zeitpunkt. Der maximale Wert sollte in der endgültigen Daten verwendet werden. Die Daten können auch an Excel-Tabelle für die zukünftige Verwendung exportiert werden. </li><li> Sobald alle Daten erfasst, kehren die Tiere zur Erholung Käfig und überwachen kontinuierlich, bis das Tier erwacht. </li><li> Wiederholen Sie diesen Vorgang, um die Zellen im Laufe der Zeit zu verfolgen. </li><li> Bei einem gewünschten Zeitpunkt kann das Tier für die Beurteilung von Gewebe-Funktion eingeschläfert werden. </li></ol> 5. Repräsentative Ergebnisse <img src="/files/ftp_upload/old/1034_2009_1_22_4/figure 1.png" alt="Abbildung 1" width="600" height="600" /> Ein Vertreter Biolumineszenz Bild von transplantierten Zellen in der linken Hinterlauf ischämischen ist in Abbildung 1 dargestellt. Bei der Aufnahme der Biolumineszenz, wird die Intensität, mit der Zeit zunehmen, und der maximale Wert während der Zeit natürlich erhalten sollte als der letzte Wert gemeldet werden.

<ol><li>Niiyama, H., Huang, N. F., Rollins, M., Cooke, J. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Murine+model+of+hindlimb+ischemia%5BTitle%5D)+AND+%22JoVE%22%5BJournal%5D)">Murine model of hindlimb ischemia.</a> JoVE. , (2008).</li>
<li>Levenberg, S., Golub, J. S., Amit, M., Itsakovitz-Eldor, J., Langer, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Endothelial+cells+derived+from+human+embryonic+stem+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Proc.+Natl.+Acad.+Sci.+U.S.A%22%5BJournal%5D)">Endothelial cells derived from human embryonic stem cells.</a> Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 99, 4391-4396 (2002).</li>
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<li>De, A., Yaghoubi, S. S., Gambhir, S. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Applications+of+lentiviral+vectors+in+noninvasive+molecular+imaging%5BTitle%5D)+AND+%22Methods+Mol+Biol%22%5BJournal%5D)">Applications of lentiviral vectors in noninvasive molecular imaging.</a> Methods Mol Biol. 433, 177-202 (2008).</li>
<li>Niiyama, H., Kai, H., Yamamoto, T., Shimada, T., Sasaki, K., Murohara, T., Egashira, K., Imaizumi, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Roles+of+endogenous+monocyte+chemoattractant+protein-1+in+ischemia-induced+neovascularization%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Am.+Coll.+Cardiol%22%5BJournal%5D)">Roles of endogenous monocyte chemoattractant protein-1 in ischemia-induced neovascularization.</a> J. Am. Coll. Cardiol. 44, 661-666 (2004).</li>
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<li>Cao, F., Lin, S., Xie, X., Ray, P., Patel, M., Zhang, X., Drukker, M., Dylla, S. J., Connolly, A. J., Chen, X., Weissman, I. L., Gambhir, S. S., Wu, J. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((In+vivo+visualization+of+embryonic+stem+cell+survival%2C+proliferation%2C+and+migration+after+cardiac+delivery%5BTitle%5D)+AND+%22Circulation%22%5BJournal%5D)">In vivo visualization of embryonic stem cell survival, proliferation, and migration after cardiac delivery.</a> Circulation. 113, 1005-1114 (2006).</li>
<li>Wilson, K., Yu, J., Lee, A., Wu, J. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((In+vitro+and+in+vivo+bioluminescence+reporter+gene+imaging+of+human+embryonic+stem+cells%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">In vitro and in vivo bioluminescence reporter gene imaging of human embryonic stem cells.</a> J Vis Exp. , (2008).</li>
</ol>

ESZ sind eine vielversprechende Quelle Zelle für die Behandlung von Gewebe-Ischämie aufgrund ihrer Plastizität der Differenzierung und ihre Fähigkeit, sich zu erheben, um Zelllinien aus aller drei Keimblätter, einschließlich Endothelzellen geben. Zur Überwindung der ethischen Bedenken mit ESC verbunden sind, können induzierte pluripotente Stammzellen (IPSCs) eine Alternative pluripotente Stammzelle Quelle, die die ethischen Bedenken überwindet werden. Neben WSR können adulte Stammzellen, wie endotheliale Vorläuferzellen (EPC) und hämatopoet...

<table><tbody><tr><td>Chirurgische Instrumente</td><td>Instrument</td><td>Fine Science Tools</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Spritzennadel</td><td>Instrument</td><td>BD Biosciences</td><td></td><td>Es wird eine 28G-Insulinspritze bevorzugt</td></tr><tr><td>Phosphatgepufferte Kochsalzlösung</td><td>Reagenz</td><td>Invitrogen</td><td></td><td></td></tr><tr><td>D-Luciferin</td><td>Reagenz</td><td>Biosynth International, Inc</td><td></td><td>D-Luciferin im Voraus in filtrierten Stammlösungen von 15 mg/mL in PBS herstellen</td></tr><tr><td>IVIS 200 Biolumineszenz-Bildgebungssystem und Aufnahmesoftware</td><td>Ausstattung</td><td><a href="http://www.perkinelmer.com/Catalog/Category/ID/IVIS%20Series" target="_blank"><img src="/img/new_window.png"> Xenogen Corporation</a></td><td></td><td></td></tr></tbody></table>

embryonale stammzellen gewonnenen endothelzellen zur behandlung von ischämie hinterlauf

Embryonic Stem Cell-Derived Endothelial Cells for Treatment of Hindlimb Ischemia

Periphere arterielle Verschlusskrankheit (pAVK) ergibt sich aus Verengung der peripheren Arterien, die sauerstoffreiches Blut und Nährstoffen zu versorgen, um die Beine und Füße, Ursachen dieser Erkrankung Symptome wie Claudicatio intermittens (Schmerzen beim Gehen), schmerzhafte ischämische Geschwüre oder sogar Gliedmaßen-bedrohlichen Gangrän. Es wird allgemein angenommen, dass das vaskuläre Endothel, einer Monoschicht aus Endothelzellen, die der luminalen Oberfläche von Blut-und Lymphgefäße investiert, eine dominierende Rolle spielt in der vaskulären Homöostase und vaskuläre Regeneration. Als Ergebnis Stammzellen-basierten Regeneration des Endothels kann ein viel versprechender Ansatz zur Behandlung von PAD werden. In diesem Video zeigen wir die Transplantation von embryonalen Stammzellen (ESC)-abgeleiteten Endothelzellen zur Behandlung von einseitigen hindimb Ischämie als ein Modell der PAD, durch nicht-invasive Verfolgung der Zelle Homing und das Überleben von Biolumineszenz-Bildgebung verfolgt. Die spezifischen Materialien und Verfahren für die Zell-Liefer-und Imaging beschrieben. Dieses Protokoll folgt eine weitere Veröffentlichung in der Beschreibung der Induktion der hinteren Gliedmaßen Ischämie durch Niiyama et al. 1

Das chirurgische Verfahren für die Lieferung von embryonalen Stammzellen abgeleitete Endothelzellen der ischämischen Hinterlauf gezeigt wird, mit nicht-invasive Tracking durch Biolumineszenz-Bildgebung.

Embryonale Stammzellen gewonnenen Endothelzellen zur Behandlung von Ischämie Hinterlauf

Die periphere arterielle Verschlusskrankheit (pAVK) resultiert aus einer Verengung der peripheren Arterien, die die Beine und Füße mit oxygeniertem Blut und Nährstoffen versorgen. Diese ...

Periphere arterielle Verschlusskrankheit. PAD entsteht durch eine Verengung der peripheren Arterien, die Beine und Füße mit Blut und Sauerstoff versorgen, was zu einer vaskulären Dysfunktion führt. Um zu bestimmen, ob Stammzellen zur Behandlung der PAD eingesetzt werden können, injizieren wir aus embryonalen Stammzellen abgeleitete endotheliale Zellen in die Hinterextremität nach Induktion einer Ischämie.Da diese Zellen so verändert wurden, dass sie Feuerflieluciferase exprimieren, können sie mittels Biolumineszenzbildgebung verfolgt werden, um festzustellen, ob sie zum Verletzungsort wandern und eine therapeutische Wirkung entfalten. Hallo, ich bin John Cook. Ich bin Professor für Medizin in der Abteilung für Kardiovaskuläre Medizin an der Stanford University.Unser Labor beschäftigt sich mit Angiogenese und vaskulärer Regeneration. In diesem Video stellen Ihnen zwei meiner Postdoktoranden, Dr. Nan Wong und Hir Niyama, Verfahren zur therapeutischen Zelltransplantation bei hindlimb-Ischämie und zur nichtinvasiven Bildgebung des Zellüberlebens vor. Diese Verfahren umfassen die folgenden Schritte: die Applikation von aus embryonalen Stammzellen abgeleiteten Stereozellen zur Behandlung einer einseitigen hinteren Extremitätenischämie sowie das nichtinvasive Verfolgen von Zellverteilung und -überleben mittels Biolumineszenz-Bildgebung.Beginnen wir. Starten Sie das Verfahren, indem Sie eine acht Monate alte SV 1 29 Stamm-Maus vorbereiten, die einer Hintergliedmaßen-Ischämie für die Zelltransplantation unterzogen wurde. Platzieren Sie hierzu die Maus in die Anästhesie-Induktionskammer mit ein bis 3 % ISO-Fluoran in 100 % Sauerstoff bei einer Flussrate von einem Liter pro Minute.Lassen Sie die Maus im Induktionskammer, bis sie nicht mehr auf äußere Reize reagiert. Entfernen Sie dann das Tier aus der Induktionskammer. Anschließend platzieren Sie das Tier in Rückenlage auf dem Operationstisch und schließen es an einen kontinuierlichen Durchfluss von ein bis 3 % ISO in 100 % Sauerstoff bei einer Flussrate von einem Liter pro Minute an.Reinigen Sie die Haut des Hinterbeins mit drei abwechselnden Abreibungen mit Betadine und Alkohol. Nach der Reinigung der Haut werden 1 Million aus murinen embryonalen Stammzellen abgeleitete endotheliale Zellen in 30 Mikroliter gepufferter Kochsalzlösung (PBS) gewonnen. Diese Zellen werden mit PBS in eine 28-Gauge-Nadel aufgezogen.Wenn die Zellen bereit sind, heben und strecken Sie das Hinterbein vorsichtig, um die Lage des Musculus gastrocnemius besser visualisieren zu können. Während das Bein gestreckt ist, führen Sie die Nadel durch die Haut in den darunterliegenden Muskel ein. Achten Sie darauf, den Knochen nicht zu verletzen, und injizieren Sie langsam die 30 Mikroliter große Zellmischung in den Musculus gastrocnemius.Für eine intramuskuläre Injektion liegt 30 µL nahe am Grenzwert des injizierbaren Volumens. Daher werden Insulinspritzen mit Kanüle der Größe 28 Gauge bevorzugt, da sie nach unserer Erfahrung das Verlustvolumen in den Spritzenkanülen vermeiden. Nach Abschluss der Injektion das Mäuschen in den Erholungskäfig zurückbringen.Lassen Sie das Tier mehrere Stunden lang auskuriern und führen Sie anschließend die in-vivo-Biolumineszenz-Bildgebung der transplantierten Zellen durch. Die transplantierten aus ESCs abgeleiteten endothelialen Zellen wurden so modifiziert, dass sie sowohl das Gen für das Glühwürmchen-Luciferase-Gen als auch das Fusionsgen für das verbesserte grüne Fluoreszenzprotein unter Kontrolle eines internen Ubiquitin-Promotors exprimieren. Daher kann die Biolumineszenz verwendet werden, um die Zellen im ischämischen Hinterbein zu verfolgen.Um diesen Schritt zu beginnen, schalten Sie das Biolumineszenz-Bildgebungssystem und die Living-Image-Aufnahmesoftware ein. Anschließend initialisieren Sie das Aufnahmesystem und geben dann die Abmessungen des Sichtfelds vor.Als Nächstes schwarzes Tonerpapier in die Ablichtungskammer legen, um die Hintergrundemission zu absorbieren. Sobald die Ablichtungskammer bereit ist, die Maus in die Narkoseinduktionskammer geben, die ein bis 3 % Isofluran in Sauerstoff mit einem Durchfluss von einem Liter pro Minute enthält. Die Maus so lange in der Induktionskammer belassen, bis sie nicht mehr auf äußere Reize reagiert.Entfernen Sie dann das Tier aus der Induktionskammer. Injizieren Sie 10 Mikroliter Luciferin pro Gramm Körpergewicht in das Peritoneum. Das Luciferin wird im Voraus in gefilterten Stammlösungen mit 15 Milligramm pro Milliliter in PBS vorbereitet.Nach der Injektion des Luciferins wird das Tier in Rückenlage auf das schwarze Papier in die Bildgebungskammer gelegt und mit einem kontinuierlichen Fluss von ISO-Fluor verbunden. Es werden Bilder für 10 bis 60 Sekunden aufgenommen, um die optimale Belichtungszeit zu bestimmen, bei der das Bild nicht gesättigt ist. Falls das Bild gesättigt wird, ist die Belichtungszeit zu verkürzen.Wenn das Biolumineszenzsignal sehr schwach ist, erhöhen Sie die Belichtungszeit. Verwenden Sie die optimale Belichtungszeit und nehmen Sie weiterhin alle ein bis drei Minuten Bilder auf, bis das Signal sein Maximum erreicht und anschließend abklingt. Speichern Sie nach Abschluss jeder Aufnahme die Datei, um die Daten zu analysieren, und wählen Sie interessierende Bereiche oder ROIs aus, die die Injektionsstelle abdecken, als negative Kontrolle.Eine ähnliche ROI kann für das nicht operierte Bein ausgewählt werden. Mit der Software die Gesamtstrahlstärke für dieselben ROIs in jeder Datei messen.Der Maximalwert sollte in den endgültigen Daten verwendet werden. Die Daten können außerdem zur späteren Verwendung in eine Excel-Tabelle exportiert werden. Sobald alle Daten erfasst sind, das Tier in den Erholungskäfig zurückbringen und überwachen, bis es wieder aufwacht; wiederholen Sie diesen Vorgang, um die Zellen zu verfolgen.Über einen gewünschten Zeitraum hinweg kann das Tier zu einem bestimmten Zeitpunkt euthanasiert werden, um die Gewebefunktion zu beurteilen. Hier ist ein repräsentativer zeitlicher Verlauf der Biolumineszenzbildgebung transplantierten Zellen im linken ischämischen Hinterglied am Tag nach der Zellinjektion; der in Rot umkreiste Bereich ist die Region von Interesse (ROI), in die die Zellen appliziert wurden. Die Farbe korreliert mit der Anzahl der transplantierten Zellen, wobei rote und gelbe Farben eine stärkere Biolumineszenzintensität im Vergleich zu blauen und grünen Farben anzeigen.Wie Sie sehen können, weist das Kontrollgliedmaß keine Biolumineszenz auf, während das mit Zellen injizierte Gliedmaß während der Erfassung der Biolumineszenz eine starke Biolumineszenz zeigt. In dieser Abbildung nimmt das Biolumineszenzsignal in der interessierenden Region (ROI) im Laufe der Zeit zu, erreicht einen Maximalwert und nimmt anschließend wieder ab. Der maximale Biolumineszenzwert, gemessen als maximale Strahldichte, wird 27 Minuten nach Beginn der Aufnahme erreicht.Dieser Maximalwert sollte für die Datenanalyse angegeben werden. Wir haben Ihnen gerade gezeigt, wie man aus ESCs stammende serielle Zellen zur Behandlung einer hinteren Extremitätenischämie verabreicht und verfolgt. Dieses Verfahren kann durch die Induktion einer hinteren Extremitätenischämie vorangestellt werden, die in einem anderen JoVE-Video von ER et al. demonstriert wird.Bei diesem Verfahren ist es wichtig, das Volumen der injizierten Zellen in PBS auf maximal 30 Mikroliter zu begrenzen, um ein subkutanes Austreten der Zellen zu verhindern. Außerdem sollte bei der Aufnahme von Biolumineszenzbildern vermieden werden, dass die Bildintensität durch zu lange Belichtungsintervalle gesättigt wird. Das war's.Vielen Dank fürs Zuschauen und viel Erfolg bei Ihren Experimenten.

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Biologie

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