Name: Micro-Drive-Array für chronische In vivo Recording: Tetrode Assembly (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2009-04-22T00:00:00.000+00:00
Duration: 14 min 19 s
Description: Lernen Sie die Herstellung und Montage von Tetroden für chronische In-vivo-Elektrophysiologie bei wachen Ratten. Dieses Protokoll zeigt die vollständige Mikro-Drive-Array-Konstruktion mit Goldplattierung.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Wir möchten bis Jun Yamamoto für seinen Entwurf und Bau von automatischen, motorisierte Tetrode twister Gerät im Video dargestellt anzuerkennen. Darüber hinaus möchten wir alle ehemaligen und derzeitigen Wilson Lab Mitgliedern für ihre Beiträge zur Mikro-Laufwerk und Tetrode Technologieentwicklung im Labor bestätigen.

1. Herstellung von Tetroden <ol><li> Beginnen Sie mit dem Bau eines Tetrode durch den Erwerb einer 50 cm langen, Polyimid isoliert, ni-Chrom-Draht mit einem 12,5 Mikron Durchmesser Kern. Klappen Sie den Draht in die Hälfte. Lassen Sie Ihre Finger entlang der Paar, um sie miteinander zu verkleben. Achten Sie darauf, die beiden Drähte haben einen guten Kontakt über die gesamte Länge. </li><li> Falten Sie das Paar wieder, indem Sie die beiden Enden zusammen. Stellen Sie sicher, dass die Schlaufe an einem Ende gebildet wird, nicht geknickt werden. Schneiden Sie die vier Adern auf der nicht-Schleife Ende so, dass die vier Spitzen ausgerichtet sind. </li><li> Für den nächsten Schritt benötigen Sie eine modifizierte Krokodilklemme, ein motorisiertes Wendeeinrichtung und eine horizontale Leiste oberhalb der Drehvorrichtung. Die Krokodilklemme wird durch Aufkleben eines Kunststoff-bar an der Basis des Clips geändert. Wo die Drahtspitzen ausgesetzt sind, spannen die vier Drähte zusammen mit dem modifizierten Krokodilklemme. Hängen Sie die Schlaufe von Drähten über der horizontalen Leiste. Legen Sie die Krokodilklemme in die motorisierte Bühne. </li><li> Übernehmen 80 im Uhrzeigersinn verdreht um 40 gegen den Uhrzeigersinn verdreht, um das Kabelbündel im Laufe von etwa drei Minuten. Diese Parameter können nach Ihren Bedürfnissen variiert werden. </li><li> Nach Tetrode Verdrehen abgeschlossen ist, verschmelzen die Drähte durch Erhitzen aus drei verschiedenen Blickwinkeln mit einer Heißluftpistole (420 ° C oder 790 ° F), mit mittel-niedrigen Durchfluss. Für jeden Winkel, beginnt 1-2 cm unterhalb der Stelle, das Kabelbündel spaltet, führen Sie die Heißluftpistole nach unten und oben mit einer 2 cm Abstand von den Drähten für ca. 5 Sekunden. Seien Sie vorsichtig bei hohen Temperaturen vollständig schmelzen wird die Isolierung und führen zu Kurzschlüssen. </li><li> Nun, da die Drähte miteinander verschmolzen, entfernen Sie die Tetrode aus dem Verdrehen Gerät durch leichtes Anheben der Krokodilklemme Spannung auf der Tetrode zu entlasten, und schneiden Sie die Tetrode in der Nähe der Krokodilklemme. Am anderen Ende, schneiden Sie die Schleife so, dass es vier nicht-gebundene Drähte von gleicher Länge. </li><li> Anschließend trennen die einzelnen Stränge an der Spitze durch leichtes Biegen der Drähte mit einem weichen Spitze Pinzette. </li><li> Die Tetrode ist nun bereit zum Laden in den Mikro-Drive Array. Machen Sie 21 bis 25 mehr Tetroden und speichert sie in einer staubfreien Box, bis es Zeit für die Tetrode Ladevorgang. </li></ol> 2. Lädt die Tetroden und Erdungskabel in die Mikro-Laufwerk-Array <ol><li> Um fortzufahren, müssen Sie eine komplette Mikro-Drive Array. Wenn Sie noch nicht ein gebaut haben, um das Video zu beziehen &#39;Micro-Drive-Array für chronische in-vivo-Aufnahme:. Laufwerk Fertigung &quot; In unserem Design-Plan wird die Tetrode an einem Ende an den Anschluss-Hardware angeschlossen werden und wird durch die Ausführung Polyimid Trägerrohr in der Mikro-Laufwerk, so dass die Elektrode Tipps unterhalb der Basis der Mikro-Laufwerk-Array erweitern. </li><li> Bevor Sie beginnen, bauen ein Laufwerk Halter, der an den Anschluss Bord an einem Ende befestigt werden kann, und am anderen Ende, kann durch eine Panavise geklemmt werden. In diesem Beispiel ist das Laufwerk Inhaber einer Mühle-max-Anschluss geklebt, um ein Ende des X-ACTO Messergriff (Abbildung 1c). </li><li> Halten Sie die Tetrode mit weichen Spitze Pinzette und mit einem Stereoskop, drücken Sie die Spitze des Tetrode in das Polyimid Trägerrohr eines der Mikro-Laufwerke. Drücken Sie die Tetrode in die Röhre, bis die einzelnen Elektrodendrähte in der Nähe der Stecker Bord stehen an der Spitze des Drive Array. Achten Sie darauf, nicht zu knicken und biegen Sie die Drähte, wie die Tetrode verursachen wird, um das Gehirn in einem Winkel, anstatt senkrecht geben, und wird die Integrität der Tetrode schwächen. </li><li> Gently feed das andere Ende der vier Drähte in ihre jeweiligen Löcher in die Elektrode Schnittstellenkarte mit weichen Spitzen einer Pinzette. Wieder zu vermeiden Knicken oder Biegen der Drähte. Bei allen vier Adern vorhanden, drücken Sie die goldenen Nadeln in ihre Löcher mit einer Zange, die eine verkürzte Unterkiefer haben. Wenn die Stifte in das Loch geschoben werden, werden sie Abisolieren der Leitung und schaffen eine elektrische Verbindung. </li><li> Für den späteren Gebrauch auf, verfolgen die Zuordnung zwischen Mikro-Laufwerke und Pin-Position auf der Elektrode Interface-Karte. </li><li> Weiter loading insgesamt 18 Tetroden. Die drei verbleibenden Mikro-Laufwerke im Array wird benutzt, um die Referenz-Elektroden Haus. Jede Referenz-Elektrode besteht aus einer Tetrode, dass nur einer der vier ungebundenen Drahtenden verwendet hat. Um die Referenz-Elektroden anbringen, folgen Sie den Ladevorgang, sondern legen nur eine der vier Elektroden an die jeweilige Referenzelektrode Pin am Stecker Bord. </li><li> Wenn Sie planen, Multi-Site-Aufnahmen sind, kann es sinnvoll sein, planen Sie die Verbindungen von der Tetroden an den Anschluss Bord vor der Zeit. Dies sollte um die Möglichkeit einer Anpassung der falschen Tetrode während der Experimente. </li><li> Sobald Tetrode Laden abgeschlossen ist, machen zwei Masseleitungen, eine für das Tier und einen für die schützende Membran. Cut eine 6 &quot;lange isolierten Draht (Text: 0,005&quot; Durchmesser) und entfernen Sie 3 mm Isolierung, mit Metall-Pinzette, von jedem Ende des Drahtes. Dann schneiden Sie ein 4&quot;Langen isolierten Draht (Text: 0,005&quot; Durchmesser). Entfernen 3 mm der Isolierung an einem Ende und 1 cm am anderen Ende. </li><li> Führen Sie das 6 &#39;Erdungskabel durch das Loch an der Seite des Mikro-Laufwerk-Array und bis auf die Interface-Karte. Schließen Sie das freiliegende Drähte der Elektrode Schnittstellenkarte mit einer goldenen Nadel an den dafür vorgesehenen Boden-Loch. Dieser Draht wird das Tier den Schädel zu verbinden. </li><li> Verlegen Sie die 4 &#39;Erdungskabel parallel zu den bereits installierten Erdleitung. Verbinden Sie die 3 mm abisolierte Ende der Elektrode Schnittstellenkarte mit einer goldenen Nadel an einem anderen benannten Ort Loch. Dieser Draht wird später eine schützende Membran, die als kleine Faraday-Käfig wirken wird Rauschaufnahme reduzieren angeschlossen werden. Wir sind jetzt Anschlussdrähte fertig und kann mit der Verfeinerung unserer Tetroden gehen. </li></ol> 3. Einstellen der Länge des Tetroden <ol><li> Unser Ziel in diesem Prozess ist es, alle Tetroden so geschnitten, dass sie etwas länger als die Tiefe des Ziels der Struktur des Gehirns sind. In unserem Beispiel sind die Mikro-Antriebe für eine maximale Verfahrweg von 5-6 mm ausreichend, um viele neokortikalen Gebiete und der dorsalen Hippocampus von einer erwachsenen Ratte erreichen ausgelegt. Zunächst unteren all die Mikro-Laufwerke, so dass die Tetroden maximal ausgesetzt sind. Gleichzeitig schneiden alle Tetroden um Längen, die ca. 5 mm länger als die gewünschte endgültige Länge mit einer scharfen feinen Schere. </li><li> Für den letzten Schnitt, bereiten ein Paar gezahnte Schere in einem Panavise. Clamp einem Griff mit einem leichten Winkel nach unten und mit Zacken nach oben, während die anderen Griff baumelt. </li><li> Jetzt komplett zurückziehen alle Tetroden in ihre Führungskanüle durch Drehen der Mikro-Laufwerke auf. </li><li> Mit einem Stereoskop, vollständig strecken Sie ein Tetrode aus seiner Kanüle. Mit einem Lineal, positionieren Sie den gezackten Schere in der gewünschten Entfernung von der Führungskanüle. Langsam und sanft schneiden die Tetrode mit einer fließenden Bewegung. Nach diesem Tetrode geschnitten worden ist, ziehen Sie den Mikro-Antrieb von 3-4mm. Wiederholen Sie diesen Vorgang für jeden Tetrode, bis alle geschnitten wurden. An diesem Punkt sind Sie bereit für Vergoldung. </li></ol> 4. Vergoldung von Tetroden und Qualitäts-Check Vergoldung der Nichrom Tetrode Drähte ist entscheidend für die langfristige stabile Aufnahmen. Es verhindert Korrosion und verbessert Biokompatibilität. <ol><li> Richten Sie die Impedanzmeter im externen Modus und den Stromgenerator in DC Prüfmodus mit Audio-Ausgang (Abbildung 1d). Berühren Sie die beiden Adern des Stromgenerator, um die sechs möglichen Paaren von Kanälen in jedem Tetrode, und verwenden Sie die Audio-Feedback, um festzustellen, ob Kurzschlüsse zwischen Paaren bestehen. Wenn eine kurze existiert, neu geschnitten die Tetrode mit Wellenschliff Schere und erneut testen. Wenn das Problem weiterhin besteht, entsorgen Sie die Tetrode und ersetzen Sie es. </li><li> Wenn keine Shorts in allen Tetroden existieren, verschieben Sie alle Mikro-Laufwerke ab, Verlängerung alle Tetroden so weit als möglich. </li><li> Ändern Sie die Konfiguration der Geräte für die Kontrolle Elektrodenimpedanz (Abbildung 1e). Jetzt tauchen die Spitzen aller Tetroden in ein Bad von Standard-Vergoldung Lösung. Das Goldbad ist elektrisch mit dem Pluspol der Impedanzmeter verbunden. Überprüfen Sie die Impedanz der Elektrode durch Berühren der negativen Steigung der Impedanz-Meter zu den entsprechenden Pin am Stecker Bord. </li><li> Messen und notieren die Impedanz eines jeden Draht auf der Mikro-Drive Array. Normale Werte liegen im Bereich von 1 bis 3 MOhm. </li><li> Auf die aktuelle Generator, stellen Sie die aktuelle zwischen 1-3 uA. Als nächstes sichere Befestigung der negativen Steigung der Impedanz-Meter, um den Stift auf dem Stecker Bord. Platzieren Sie die Geräte in der Galvanik-Konfiguration (Abbildung 1f). Auf der Impedanzmeter, schnell von den normalen Modus zu wechseln, um den Bypass-Modus und wieder zurück. Während in den Bypass-Modus wird Strom durch die Tetrode und Gold Lösung gehen, und Gold wird auf die Spitze der Elektrode beschichtet werden. Die Impedanz nach jeder Runde der Beschichtung sollte weniger als zuvor. Wiederholen Sie den aktuellen Puls, wenn die Impedanz nicht unter 1 MOhm fallen. Eine konservative Bereich der akzeptablen Impedanzen sind 250kOhm bis 350 kOhm. Wenn die Impedanz sinkt unter 200 kOhm, kann dies auf einen Kurzschluss. </li><li> Wenn nach wiederholter Impulse die Impedanz nicht ausreichend fallen, kann die Spitze der Elektrode behindert werden. Re-Cut der Tetrode, auf Kurzschlüsse überprüfen, und wiederholen Sie die Vergoldung Prozess. Wenn Nachschneiden nicht hilft, ersetzen Sie die Tetrode und erneut starten. </li><li> Nach dem Plattieren alle Tetroden, tauchen die Tetrode Tipps kurz in Ethanol, und lassen Sie sie für 3 bis 5 Minuten trocknen lassen. </li><li> Test für Kurzschlüsse innerhalb Tetroden mit dem Stromgenerator mit der Tetrode Tipps der Luft ausgesetzt. Wenn ein DC-Verbindung zwischen zwei oder mehr Elektroden eines Tetrode, wieder schneiden die Tetrode, und die Platte mit Gold wieder. </li><li> Nach Vergoldung aller Tetroden abgeschlossen ist, einen Tropfen von mittlerer Dicke Cyano-Acrylat-Klebstoff, um die Schnittstelle zwischen den einzelnen tetrode und seine Polyimidschlauch. Dies wird die Tetrode an ihre mikro-Laufwerk zu sichern und zu erhalten die Länge der Tetrode. </li><li> Als letzter Schritt, verschieben Sie alle Tetroden in das Laufwerk ein, indem Sie alle Schrauben auf. </li></ol> 5. Anbringen des Schutztrichter Die schützende Membran Zweck ist die Mikro-Laufwerke und die exponierte Tetrode Draht aus der Umwelt abschirmen. Es bietet auch Unterstützung für den Umgang während eines Experiments und reduziert elektrische Störungen. Wir verwenden eine 3-D gedruckt Kunststoffkonus (Reference Part I: Laufwerk Fertigung). Allerdings ist es möglich, den Kegel aus anderen Materialien zu machen, wie ein gebogenes Stück von Soda kann. <ol><li> Nehmen Sie die Kunststoffmembran und behebt einige Aluminiumfolienband der inneren oder äußeren Oberfläche. </li><li> Als nächstes ein kleines Loch bohren (1,5 mm im Durchmesser) durch den Kegel und lose Schraube mit einer Unterlegscheibe und Mutter innerhalb des Kegels. Dies wird als elektrischer Durchgang für die Erdleitung dienen. Wir empfehlen die Verwendung eines 0-80 Größe Schraube und Unterlegscheibe Kombination. </li><li> Legen Sie zuerst und teilweise wiederum drei 1-72 Schrauben der Größe (16.3 cm in der Länge) in die Seiten des Kegels. Mit dem Laufwerk-Array ausgesetzt, legen Sie die Kegel über den Antrieb. Achten Sie darauf, beide Masseleitungen erstrecken sich von der Unterseite des Laufwerks-Array. Wickeln Sie das freiliegende Teil der 4 &#39;Erdungskabel an einem der 1-72 Schrauben mehrmals und festschrauben fest. Sichern Sie die Kegel, um das Laufwerk Basis durch Anziehen der restlichen zwei Kegel Schrauben. </li><li> Schließlich nehmen Sie die 1 cm abisoliert Ende des kurzen Erdungskabel und wickeln Sie es um die Schraube, zwischen den Folienstreifen und Unterlegscheibe. Sichern Sie den Boden durch Anziehen der Schraube. Jetzt haben wir ein Mikro-Laufwerk-Array, das ist endlich bereit für die chirurgische Implantation. </li></ol> 6. Repräsentative Ergebnisse <ol><li> Micro-Drive-Array Produktion ist nun abgeschlossen. Ihre Mikro-Laufwerk-Array ist mit 18 Tetroden und 3 Sollwertkanäle geladen. Es ist eingehüllt in eine schützende Membran und Kappe für Langlebigkeit. Die fertigen Mikro-Laufwerk-Array mit Schutztrichter wiegt 20g bis 25g im Durchschnitt. </li><li> Das fertige Laufwerk-Array wird implantiert mit Standard-chirurgischen Eingriffs. Wie Sie sehen können, ist das Laufwerk mit einem Vorverstärker-Chip und ein Bündel von Drähten, die das Signal tragen, um die Datenerfassung Hard-und Software verbunden. </li></ol><img src="/files/ftp_upload/1098/CompositeFigure1_highqualityn.jpg" alt="Abbildung 1" /> Abbildung 1: A) Schematische Darstellung der Tetrode Verdrehen Konfiguration. Ein horizontaler Balken unterbricht die ungebundenen Elektrodendrähte der Tetrode über den automatisierten Tetrode Verdreheinrichtung. B) Setup für Tetrode Impedanzmessung und Elektrode beschichtet. Bei der Überprüfung auf Kurzschlüsse, ist der Stromkreis:. Das schwarze Kabel an einen anderen Elektrode Kanal auf dem Connector Board befestigt C) Eine Nahaufnahme eines maßgeschneiderten Micro-Drive-Array Halter Werkzeug. Die zylindrische Stange ist ein X-Acto Messergriff. Der Stecker ist ein 26-poliges, zweireihig, Mill-Max-Anschluss. Die beiden Teile sind zusammen mit dental Acryl verklebt. D)-Konfiguration für kurze Überprüfung. Channel X und Y-Kanal werden alle zwei unterschiedliche Kanäle der vier Tetrode Kanäle. E)-Konfiguration für Messelektrode Impedanz. Die Stromquelle ist &#39;off&#39;. Die Impedanz-Meter wird auf &#39;on&#39; und &#39;test&#39; gesetzt. F)-Konfiguration für Vergoldung von Elektrodenspitzen. Die Stromquelle eingestellt ist &#39;on&#39;, wird das Audiosignal &#39;on&#39;, mode &#39;unipolar&#39; ist, DC-Test &#39;on&#39; ist, wird derzeit auf 2 Mikroampere.

<ol><li>Gray, C. M., Maldonado, P. E., Wilson, M., McNaughton, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Tetrodes+markedly+improve+the+reliability+and+yield+of+multiple+single-unit+isolation+from+multi-unit+recordings+in+cat+striate+cortex%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Neurosci.+Methods%22%5BJournal%5D)">Tetrodes markedly improve the reliability and yield of multiple single-unit isolation from multi-unit recordings in cat striate cortex.</a> J. Neurosci. Methods. 63 (1-2), 43-54 (1995).</li>
</ol>

Dieses Protokoll ist die zweite Tranche eines zweiteiligen Protokoll: &quot;Micro-Drive-Array für chronische in-vivo Aufnahme.&quot; Die Kombination von Mikro-Laufwerk-Array und Tetrode ist ein leistungsfähiges Werkzeug für den Erhalt von simultanen Aufnahmen von vielen Neuronen in einem wachen, verhalten Tier Vorbereitung. Hoffentlich haben wir Sie mit allen notwendigen Informationen für die Sie benötigen, um zu beginnen oder zu verbessern elektrophysiologischen Ableitungen in Ihrem eigenen Labor. <p class="jove_co...

<table><tbody><tr><td>Panavise</td><td>Werkzeug</td><td>Panavise</td><td>Modell 301</td><td>Hält entweder Mikroantriebsarray oder gezahnte Schere</td></tr><tr><td>Modifizierte Xcelite 378M Zange</td><td>Werkzeug</td><td>Newark Inc</td><td>96F8903</td><td>Zum Einsetzen von Steckverbinderstiften. Zur Herstellung 2 mm von einer Zangenspitze entfernen.</td></tr><tr><td>Langsam aushärtender Kleber</td><td>Material</td><td>Great Planes (Champaign, IL)</td><td>GPMR6015</td><td>Zum Verkleben des Tetrodes mit dem Mikroantrieb</td></tr><tr><td>Goldgalvaniklösung</td><td>Material</td><td>Neuralynx Inc.</td><td>Sifco Selectron Gold NC</td><td>Enthält Goldpartikel zur Galvanik</td></tr><tr><td>Stromgenerator</td><td>Werkzeug</td><td>World Precision Instruments, Inc.</td><td>A365D-B</td><td>Auch bekannt als Stimulusisolator. Dient zum galvanischen Beschichten der Elektrodenenden mit Goldlösung.</td></tr><tr><td>Impedanzmessgerät</td><td>Werkzeug</td><td>BAK Electronics</td><td>IMP-1 / 6662 / 2788</td><td>Zur Überprüfung der Impedanz der Elektroden</td></tr><tr><td>Heißluftpistole</td><td>Werkzeug</td><td>Steinel (Deutschland)</td><td>HG 3002 LCD</td><td>Zum Verschmelzen der Elektroden zum Tetrode</td></tr><tr><td>Accu-Tek Carbofib-Spitzen-Pinzette</td><td>Werkzeug</td><td>Aven</td><td>18768 (Muster 304)</td><td>Zum Handhaben von Tetroden</td></tr><tr><td>Krokodilklemme</td><td>Werkzeug</td><td>Fine Science Tools</td><td>18050-35</td><td>Auch bekannt als Bulldog-Serrefine. Zum Zusammenklemmen der Tetroden während des Verdrillens</td></tr><tr><td>Mikrochirurgische Schere</td><td>Werkzeug</td><td>Biomedical Research Instruments</td><td>25-1000</td><td>Zum allgemeinen Schneiden von Tetrode-/Elektrodendraht</td></tr><tr><td>Iris Toughcut gezahnte Schere</td><td>Werkzeug</td><td>Fine Science Tools</td><td>14058-09</td><td>Zum endgültigen Schneiden der Tetroden</td></tr><tr><td>Teflonbeschichteter Edelstahldraht</td><td>Material</td><td>A-M Systems</td><td>790500</td><td>Erdungsdraht</td></tr><tr><td>12,5-Mikron-Nichromdraht</td><td>Material</td><td>Kanthal Palm Coast</td><td>Rediohm-800 1/4 HARD PAC COATING</td><td>Polyimidbeschichteter Mikrodraht zur Herstellung von Tetroden.</td></tr><tr><td>Tetrode-Verdriller</td><td>Werkzeug</td><td>Neuralynx Inc.</td><td>Tetrode-Assemblierungsstation</td><td>Erhöht Geschwindigkeit und Konsistenz der Tetrode-Herstellung.</td></tr><tr><td>Silberlack</td><td>Material</td><td>GC International</td><td>22-023</td><td>Zum Verbinden der Mikroelektrodenadern des Tetrodes mit den Steckverbinderstiften (siehe Diskussion)</td></tr><tr><td>X-Acto-Messergriff</td><td>Material</td><td>MSC Direct</td><td>X3001</td><td>Zur Konstruktion einer Haltevorrichtung für Mikroantriebe.</td></tr><tr><td>26-poliger, 2-reihiger Steckverbinder</td><td>Material</td><td>Mill-Max</td><td>852-10-026-30-001000</td><td>Zur Konstruktion einer Haltevorrichtung für Mikroantriebe.</td></tr></tbody></table>

micro-drive-array für chronische in vivo recording: tetrode assembly

Micro-drive Array for Chronic in vivo Recording: Tetrode Assembly

Die Tetrode, ein Bündel von vier Elektroden, hat sich als wertvolles Tool für die gleichzeitige Aufzeichnung mehrerer Neuronen in-vivo werden. Die differentielle Amplitude der Aktionspotentiale Signaturen über die Kanäle einer Tetrode ermöglicht die Isolierung von Single-Unit-Aktivität von Multi-Unit-Signale. Die Fähigkeit zur präzisen Steuerung der stereotaktischen Lage und Tiefe der Tetrode ist von entscheidender Bedeutung für die Untersuchung koordiniert neuronale Aktivität in Hirnregionen. In Kombination mit einem Mikro-Laufwerk-Array, ist es möglich, eine präzise Platzierung und stabile Regelung von vielen Tetroden im Laufe von Tagen bis Wochen zu erreichen. In diesem Protokoll, zeigen wir, wie in der Herstellung und dem Zustand Tetroden mit einfachen Werkzeugen und Materialien, installieren Sie die Tetroden in eine Multi-Laufwerk Tetrode Array für chronische in-vivo Aufnahme in die Ratte, machen Erdungskabel Verbindungen zu den Mikro-Laufwerk-Array, und legen einen schützenden Kegel auf der Mikro-Laufwerk-Array, um die Tetroden von physischen Kontakt mit der Umwelt zu schützen.

In diesem Protokoll zeigen wir, wie in der Herstellung und dem Zustand Tetroden für die Verwendung mit einem Mikro-Laufwerk-Array, das für die chronische elektrophysiologischen Ableitungen in Ratten entworfen wurde. Darüber hinaus zeigen wir die Endphase der Mikro-Laufwerk-Array Konstruktion, die Installation Erdungskabel und eine schützende Membran enthält.

Micro-Drive-Array für chronische In vivo Recording: Tetrode Assembly

Die Tetrode, ein Bündel aus vier Elektroden, hat sich als wertvolles Instrument für die gleichzeitige Aufzeichnung mehrerer Neuronen in vivo erwiesen. Die differenzielle ...

In diesem Protokoll beschreiben wir die Herstellung und Montage von Tetroden-Bündeln mit jeweils vier Elektroden zur chronischen in-vivo-Ableitung bei wachen Nagetieren, um mit der Tetroden-Herstellung zu beginnen. Ein Strang aus Mikroelektroden-Draht wird zweimal um sich selbst gefaltet, um ein Bündel aus vier parallelen Drähten zu bilden. Diese Drähte werden anschließend miteinander verdrillt und mit einer Heißluftpistole imprägniert.Jeder fertige Tero wird in eine Aufbewahrungsbox gelegt. Während weitere Teros hergestellt werden, wird jeder Tero durch einen dedizierten Kanal eingeführt, der über eine Öffnung in einem Linearantrieb beginnt und durch die Basis des Mikroantriebsarrays austritt. Jeder der vier Drähte des Teros ist mit separaten Stiften auf einer Ausgangs-Anschlussplatine verbunden, die an der Oberseite des Mikroantriebsarrays befestigt ist.Die Impedanz jedes Kanals des Tero wird durch einen Galvanik-Goldbeschichtungsprozess verringert. Nachdem alle Teros installiert und galvanisch beschichtet wurden, werden zwei Masseleitungen an die entsprechenden Stifte auf der Anschlussplatine angebracht und ein Schutzkegel am Rahmen des Tero-Mikroantriebsarrays befestigt, nachde

micro-drive-array-for-chronic-in-vivo-recording-tetrode-assembly

Research

Forschung

JoVE Journal

Biology

Biologie

In diesem Protokoll haben wir demonstrieren, wie man ein Mikro-Laufwerk-Array für chronische elektrophysiologischen Ableitungen in Ratten zu fabrizieren.

Micro-Drive-Array für chronische In vivo Recording: Drive Fabrication

Das Design, die Fertigung und Montage von einer ultra-light motorisierten Microdrive beschrieben. Das Gerät bietet eine kostengünstige und einfach zu bedienende Lösung für chronische Aufnahmen von einzelnen Einheiten in kleinen verhaltenden Tier.

Konstruktion und Montage eines Ultra-light Motorisierte Microdrive für chronische Neural Recordings in Kleintiere

Das Video demonstriert die gleichzeitige elektrophysiologische Aufzeichnung von mehreren Gehirnregionen bei einer Ratte unter Verwendung eines integrativen Mikroantriebsarrays. Aufzeichnungselektroden werden im Riechkolben platziert, Referenzelektroden im frontalen Kortex und Mikroantriebs-Array-Elektroden im Hippocampus. Die Ratte kann frei nach Futter suchen, und die gleichzeitige Aufzeichnung von allen implantierten Elektroden wird mit dem Array aufgezeichnet.

Eine Micro-Drive-Array-Methode zur elektrophysiologischen Aufzeichnung von mehreren Hirnregionen

Die Konstruktion und Montage von Mikroantriebe für in vivo elektrophysiologischen Aufnahmen von Gehirn Signale von der Maus beschrieben. Durch das Anbringen Mikroelektroden Bundles robust fahrbare Träger erlauben diese Techniken für die langfristige und stabile neuronale Aufnahmen. Das leichte Design ermöglicht uneingeschränkte Verhaltensleistung durch das Tier folgende Laufwerk Implantation.

Bau Microdrive Arrays für chronische Neural Recordings in Awake benimmt Mäuse

Um die neuronalen Substrate des Verhaltens zu verstehen, ist die Aufzeichnung von Gehirnschaltkreis-Ensembles erforderlich. Aufgrund ihrer genetischen Rückverfolgbarkeit bietet die Maus ein Modell für die Dissektion von Schaltkreisen und die Nachahmung von Krankheiten. Hier wird ein Verfahren zum Entwerfen und Herstellen miniaturisierter Sonden beschrieben, das geeignet ist, die tiefe Hirnstruktur in der Maus gezielt zu untersuchen.

Design und Fertigung von Ultraleichtgewicht, verstellbare Multi-Elektroden-Sonden für elektrophysiologischen Ableitungen in Mäuse

Wir präsentieren den Bau einer 3D-druckbare Hyperdrive mit achtzehn unabhängig voneinander einstellbare Tetroden. Der Hyperdrive soll Hirnaktivität in frei Verhalten Ratten über einen Zeitraum von mehreren Wochen aufnehmen.

Bau eine verbesserte Multi-Tuberkuloseinfektion Hyperdrive für groß angelegte neuronalen Aufnahme in Ratten Verhalten

Dieses Protokoll beschreibt die Konstruktion eines Hybrid-Mikroantriebs-Arrays, das die Implantation von neun unabhängig einstellbaren Tetroden und einer einstellbaren Opto-Silizium-Sonde in zwei Hirnregionen in frei beweglichen Mäusen ermöglicht. Ebenfalls demonstriert ist eine Methode zur sicheren Wiederherstellung und Wiederverwendung der Opto-Silizium-Sonde für mehrere Zwecke.

Hybrid Microdrive System mit wiederherstellbarer Opto-Silikon-Sonde und Tetrode für Dual-Site High Density Recording in frei beweglichen Mäusen

Eine neuartige drahtlose Technik zur Aufzeichnung extrazellulärer neuronaler Signale aus dem Gehirn frei schwimmender Goldfische wird vorgestellt. Das Aufnahmegerät besteht aus zwei Tetrodes, einem Microdrive, einem neuronalen Datenlogger und einem wasserdichten Gehäuse. Alle Teile sind mit Ausnahme des Datenloggers und seines Anschlusses maßgeschneidert.

Drahtlose elektrophysiologische Aufzeichnung von Neuronen durch bewegliche Tetrodes in frei schwimmenden Fischen

Wir beschreiben hier eine Methode zur Herstellung von Ti3C2 MXene Mikroelektroden-Arrays und deren Verwendung für die in vivo-neurale Aufnahme.

Herstellung von Ti3C2 MXene Microelectrode Arrays für In Vivo Neural Recording

In dieser Arbeit beschreiben wir ein Mikroantriebsdesign, ein chirurgisches Implantationsverfahren und eine postoperative Erholungsstrategie, die chronische Feld- und Einzelableitungen von mehreren Hirnregionen gleichzeitig bei juvenilen und heranwachsenden Mäusen über ein kritisches Entwicklungsfenster vom 20. postnatalen Tag (p20) bis zum 60. postnatalen Tag (p60) und darüber hinaus ermöglichen.

Ein leichtes Antriebsimplantat für chronische Tetrodenableitungen bei juvenilen Mäusen

Hier stellen wir ein leichtes, kostengünstiges Sondenimplantatsystem für die chronische Elektrophysiologie bei Nagetieren vor, das für Benutzerfreundlichkeit, Sondenwiederherstellung, experimentelle Vielseitigkeit und Kompatibilität mit dem Verhalten optimiert ist.

Das DREAM-Implantat: ein leichtes, modulares und kostengünstiges Implantatsystem für die chronische Elektrophysiologie bei kopffesten und sich frei verhaltenden Mäusen

Lernen Sie die Herstellung und Montage von Tetroden für chronische In-vivo-Elektrophysiologie bei wachen Ratten. Dieses Protokoll zeigt die vollständige Mikro-Drive-Array-Konstruktion mit Goldplattierung.

Micro-Drive-Array für chronische In vivo Recording: Tetrode Assembly

Weitere Videos entdecken