0 Aufrufe • 2:23 Min. • April 30th, 2023
- Um Eierstöcke von lebenden Drosophila-Fliegen zu isolieren, beginnen Sie damit, ein betäubtes Weibchen in eine von drei Seziervertiefungen zu bringen, die mit vorgewärmtem Insektenpräparationsmedium gefüllt sind. Das Medium trägt dazu bei, die Integrität und Lebensfähigkeit des Gewebes zu erhalten.
Trennen Sie unter einem Präpariermikroskop den Bauch vom Thorax. Schieben Sie dann den Bauch in eine neue Vertiefung. Um die Eierstöcke zu isolieren, halten Sie den Bauch am hinteren Ende fest und kratzen Sie die Fortpflanzungsorgane vorsichtig heraus. Zuletzt die Eierstöcke in eine frische Mulde geben. Nach diesem Schritt können Sie entweder den gesamten Eierstock verwenden oder ihn weiter in seine einzelnen Strukturen zerlegen.
Jeder Fruchtknoten von Drosophila besteht aus mehreren Ovariolen, die aus einer Kette von Eikammern mit zunehmendem Reifegrad bestehen. Um die Eierstöcke zu befreien, stecken Sie den Eierstock am undurchsichtigen hinteren Ende fest und ziehen Sie die Schutzhülle vorsichtig um den Eierstock herum, bis die Eierstöcke richtig getrennt sind.
Im Beispielprotokoll zeigen wir die Dissektion von Drosophila-Eierstöcken für ihre Verwendung in der Lebend- und Fixgewebsmikroskopie.
- Nachdem Sie fünf betäubte weibliche Fliegen gemäß dem Textprotokoll sortiert haben, verwenden Sie unter dem Präpariermikroskop zwei Pinzettenpaare, um den Thorax vom Bauch zu trennen. Übertragen Sie dann die Bäuche vorsichtig in die zweite Vertiefung der Schüssel. Halten Sie mit einer Pinzette den Bauch am hinteren Ende fest, und drücken Sie mit der anderen Pinzette langsam die Eierstöcke heraus.
Halte dann mit der Pinzette einen einzelnen Eierstock am undurchsichtigen hinteren Ende fest und bewege ihn vorsichtig in die dritte Vertiefung der Schale, um ihn zu necken oder zu fixieren. Toupieren Sie die Schutzhülle vorsichtig um die Eierstöcke herum, indem Sie mit einer Pinzette das hintere Ende halten und eine Nadel leicht vom hinteren zum vorderen Ende führen.