0 Aufrufe • 3:32 Min. • April 30th, 2023
- Legen Sie ein Deckglas mit präparierten Eikammern auf den Mikroskoptisch. Suchen Sie eine Eikammer mit dem entsprechenden Entwicklungsstadium und der entsprechenden Ausrichtung für die Mikroinjektion. Die Eikammern im mittleren bis späten Stadium haben ein großes sichtbares Eigelb, und die Eizellen in der richtigen Ausrichtung sind mit ihrer anterior-posterioren Achse senkrecht zur Injektionsrichtung.
Drosophila-Nervenzellen sind eine Gruppe von 15 Zellen in der Eikammer, die für die Ablagerung von Nährstoffen und Biomolekülen aus der Mutter in der sich entwickelnden Eizelle verantwortlich sind. Richten Sie das Mikroinjektorsystem auf den entsprechenden Einspritz- und Kompensationsdruck ein, um ein gleichmäßiges Einspritzvolumen und einen gleichmäßigen Durchfluss nach außen zu gewährleisten. Bringen Sie eine zuvor geladene Kapillarnadel vorsichtig in das Sichtfeld, so dass sich die Zellen und die Nadel in derselben Brennebene befinden.
Stellen Sie sicher, dass keine Luft in der Spitze der Kapillare eingeschlossen ist und dass die Lösung kontinuierlich fließt. Passen Sie dann die Z-Position des Objektivs so an, dass der Fokus auf die Membran gelegt wird, die die Follikelzellen von
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