Chemische Trocknung: Biologische Probenvorbereitung für die Rasterelektronenmikroskopie (REM)

- Beginnen Sie mit dem Dehydrieren und Trocknen einer fixierten Probe, um den Probenverzerrung zu reduzieren, der durch die Entfernung von Gasen und flüssigem Wasser bei dem reduzierten Betriebsdruck herkömmlicher Rasterelektronenmikroskope (REM) verursacht wird.

Um die Probe zu dehydrieren, waschen Sie sie mit steigenden Ethanolkonzentrationen in Wasser, bis 100 % Ethanol erreicht sind. Wiederholen Sie dann diesen Vorgang mit einem chemischen Trocknungsmittel in Ethanol, bis die Probe mit reinem Trocknungsmittel gewaschen wird. Übertragen Sie die Probe und das Trocknungsmittel in eine Verdunstungsschale. Decken Sie es mit minimalem zusätzlichem Trockenmittel ab und lassen Sie es über Nacht in einem Abzug trocknen.

Montieren Sie anschließend die vorbereitete Probe mit Kohleklebeband auf die Oberseite eines Mikroskopstumpfes. Tragen Sie schließlich Silberfarbe auf die Ränder des Stummels und dann vom Rand des Stummels auf jede der Proben auf, um die Ansammlung von überschüssigen Elektronen zu reduzieren, die zu unerwünschten Bildartefakten führen könnten.

In diesem Experiment werden Fruchtfliegen, Drosophila melanogaster, für die REM-Analyse mit dem Trocknungsmittel HMDS vorbereitet