Geschmackspräferenz-Assay: Eine Methode zur Messung des Fressverhaltens bei Drosophila

0 views • 3:45 min • April 30th, 2023

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- Um den Geschmackspräferenz-Assay durchzuführen, verwenden Sie eine Kammer, z. B. eine Petrischale, die in gleiche Abschnitte unterteilt ist. Wenn Sie die Wahl zwischen zwei Lösungen unterschiedlichen Geschmacks messen, beschriften Sie eine in rot und die andere in blau mit geschmacksneutralen Lebensmittelfarbstoffen. Geben Sie dann gleichmäßig verteilte Tropfen jeder Lösung entlang des Randes der Schale in abwechselnden Abschnitten.

Geben Sie nun betäubte und zuvor ausgehungerte Fliegen in die Mitte der Kammer und decken Sie die Schale ab. Führen Sie das Experiment im Dunkeln durch, um eine mögliche Farbverzerrung auszuschließen, und inkubieren Sie es über einen festgelegten Zeitraum bei 25 Grad Celsius. Wenn sie die Wahl zwischen zwei Lösungen haben, bevorzugen mehr Probanden den Konsum von Lösungen, deren Geschmack attraktiver ist, z. B. süß, während sie aversive Optionen wie bittere Lösungen vermeiden. Stoppen Sie das Experiment, indem Sie die Kammer in einen Gefrierschrank stellen.

Um das Fressverhalten und die Geschmackspräferenz zu messen, vergleichen Sie die Anzahl der Fliegen mit verschiedenfarbigen Abdomen. Im Beispielprotokoll sehen wir eine Demonstration des Geschmackspräferenz-Assays, der die Wahl zwischen verschiedenen Saccharoselösungen misst.

- Um das Experiment zu beginnen, tränken Sie einen Wattebausch mit Wasser am Boden eines Standard-Fliegenfläschchens. Sammeln Sie als Nächstes Fliegen in Sets von 100 Tieren auf einem CO2-Pad und geben Sie die Fliegen dann in ein vorbereitetes Fläschchen. Verwenden Sie einen Wattebausch, um die Fläschchen geschlossen zu halten. Legen Sie dann die Fläschchen auf die Seite in einen umweltkontrollierten Inkubator. Bereiten Sie den Kontrollgeschmack aus 1 Millimolar Saccharose vor, indem Sie 10 Mikroliter 100 Millimolare Saccharoselösung, 13 Mikroliter rote Lebensmittelfarbe und 977 Mikroliter Wasser kombinieren.

Bereiten Sie als Nächstes den experimentellen Geschmack aus 5 Millimolar Saccharose vor. Erstellen Sie dann die Assay-Kammern, indem Sie eine 100 Millimeter x 15 Millimeter große Petrischale aus Kunststoff besorgen und drei 10-Mikroliter-Tropfen des Kontrollgeschmacks so nah wie möglich am Rand der Platte in der 12-Uhr-Position platzieren. Platzieren Sie auf der 3-Uhr-Position drei 10-Mikroliter-Tropfen experimentellen Schmacks so nah wie möglich am Rand der Platte. Platzieren Sie weitere drei Tropfen des Reglers auf der 6-Uhr-Position. Platzieren Sie dann weitere drei Tropfen des experimentellen Geschmacks auf der 9-Uhr-Position.

Leeren Sie dann ein Fläschchen mit 100 verhungerten Fliegen auf ein CO2-Pad, gerade lange genug, um alle Tiere zu betäuben. Bürsten Sie die Tiere in die Mitte einer vorbereiteten Untersuchungskammer und decken Sie sie mit dem Schalendeckel ab. Legen Sie die Untersuchungskammer in einen undurchsichtigen Karton. Beschriften Sie dann die Außenseite der Box mit der zu testenden Erkrankung und dem Genotyp. Verschieben Sie das gesamte Setup in einen Inkubator. Nach zwei Stunden stellen Sie die Assay-Kammern, die sich noch in Pappkartons befinden, direkt in einen Gefrierschrank bei minus 20 Grad Celsius, bis sie für die Quantifizierung bereit sind.

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Last updated: 18 July 2026